ELAREM Prime人血小板裂解液是面向未來需求的先進的細胞培養(yǎng)解決方案。基于人血小板的經濟實惠的細胞生長促進劑可實現從動物血清添加劑到無異種細胞培養(yǎng)條件的簡單轉換。每批ELAREM Prime均由大量血小板單位生產,以比較大限度地減少批次間的差異。ELAREM Prime支持細胞擴增,無需批間測試即可提供一致的試驗結果。ELAREM Prime只供體外實驗和研究使用(RUO),該產品不適合直接用于人類或動物用途。有關安全預防措施,請參閱相應的SDS。推薦用于與FBS相比,ELAREM Prime人血小板裂解液支持間充質干細胞(MSC)的細胞生長性能,而不會丟失表型。非靈長類細胞系的體外繁殖和維持需要根據具體情況進行測試和優(yōu)化。血清替代里有哪些生長因子?gamma射線輻照血小板裂解液好用么
凍融循環(huán)后的穩(wěn)定性:對所有的血小板裂解液不建議反復凍融超過3次(包括初始解凍),次數過多會形成較多的碎片沉淀,影響性能,因此建議***次解凍時即進行分裝。Sexton進行了內部研究,以檢查經歷反復凍融循環(huán)的hPL的穩(wěn)定性。雖然數據是使用Stemulate作為測試血清收集的,但基于產品的相似成分和相似的放行規(guī)范標準,測試結果同樣適用于nLivenPR和T-LivenPR。Sexton建議單瓶的hPL產品經歷不超過三個冷凍/解凍循環(huán),包括初始解凍。內部數據顯示,在經過多達三個冷凍/解凍循環(huán)時,pH、滲透壓、總蛋白或細胞生長沒有顯著變化。然而,需要注意的是,單個單位hPL所經歷的凍融循環(huán)次數越多,碎片形成的發(fā)生率就越高。建議客戶在其培養(yǎng)基產品中遇到碎片問題時盡可能減少冷凍/解凍循環(huán)次數。此外,建議需要三次以上冷凍/解凍循環(huán)的客戶在初次解凍時進行分裝。GMP等級血小板裂解液protocol血小板裂解物是無菌過濾的黃色澄清溶液,來自于多人份健康人血小板,裂解后經無菌過濾制備而成。
本發(fā)明公開了一種制備血小板裂解液的方法及其應用,制備血小板裂解液的方法其包括以下步驟:將濃縮血小板在8001000rpm的離心機下離心處理1525min,離心處理后上層為富含血小板血漿,底層為紅細胞層,將底層紅細胞層分離出;將上層的富含血小板血漿成批地充分混合均勻,采用反復凍融發(fā)充分裂解血小板;去除細胞碎片,得到很終的血小板裂解液.本發(fā)明還提供一種細胞培養(yǎng)方法,其采用上述方法所制得的血小板裂解液培養(yǎng)細胞.通過本發(fā)明的方法可將濃縮血小板中提取的血小板的裂解液率提高至95%,縮短了操作的時間,且可使用臨床過期產品重復開發(fā)利用.1.一種制備血小板裂解液的方法,其特征在于包括以下步驟:將濃縮血小板在800-1000rpm的離心機下離心處理15-25min,離心處理后上層為富含血小板血漿,底層為紅細胞層,將底層紅細胞層分離出;將上層的富含血小板血漿成批地充分混合均勻,采用反復凍融發(fā)充分裂解血小板;去除細胞碎片,得到很終的血小板裂解液。更多關于人血小板裂解液/血清替代相關產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio
為了排除肝素對于細胞增長的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關。我們對不添加防腐劑的肝素進行了相同實驗,結果對AT-MSC和BM-MSC細胞增殖抑制趨勢相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時累積細胞群體倍增指數(cPD)較高。CFU-F的塑料粘附生長性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結合泊松統(tǒng)計進行CFU-F試驗,顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時明顯降低。這些結果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報道的其他研究結論一致。
血小板裂解液怎么樣使用?
Sexton的血小板裂解液系列產品使用干冰運輸,全程確保產品處于凍存狀態(tài)。接收后立即儲存在-20°C環(huán)境中,使用的時候必須使用37°C水浴解凍,而非4°C冰箱或室溫解凍方法,否則會產生更多碎片,影響性能。對于不立即使用的整瓶/袋解凍的血小板裂解液產品,建議將剩余體積制備成一次性使用的等分試樣。在滿足生物血清相容性和低溫要求的條件下,可以使用錐形管或較小的瓶子進行等分儲存。等分試樣的制備將減少血小板裂解液產品的冷凍/解凍循環(huán)。人源血小板裂解液是一種能有效支持間充質干細胞等人類細胞生長的高效細胞培養(yǎng)補充劑。gamma射線輻照血小板裂解液怎樣使用
血小板裂解液使用的時候有什么注意事項嗎?gamma射線輻照血小板裂解液好用么
間充質間質細胞(MSCs)體外擴增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應的風險,監(jiān)管機構并不鼓勵使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應或牛病原體ganran的風險,有助于增強間充質干細胞的擴增,也相對容易地根據良好的生產規(guī)范程序生產,并已用于臨床應用,因此現如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻1)。 血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對于一般細胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來說通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來防止凝膠形成,其中肝素很為常用。 更多關于Sexton人血小板裂解液的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!gamma射線輻照血小板裂解液好用么