線性PEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法

產(chǎn)品簡介：Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液，由PEIMAX配置而成，采用0.1umPES無菌過濾器，完全消除支原體污染風(fēng)險。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細(xì)胞，并且Transporter5-DNA復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21）等真核細(xì)胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。Transporter5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時間，加快項目進度。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復(fù)性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。產(chǎn)品特點：非GMP，研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液；高轉(zhuǎn)染效率；無縫過渡到MAXgeneGMP；易放大，可預(yù)測產(chǎn)量；用于工藝開發(fā)，臨床前和早期臨床研究。請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bioPEI轉(zhuǎn)染試劑的穩(wěn)定性如何？線性PEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務(wù)，以創(chuàng)新和為價值理念，通過自身研發(fā)團隊，以及與國內(nèi)外專業(yè)科研團隊強強聯(lián)合，不斷創(chuàng)新，為生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產(chǎn)品和服務(wù)。生物醫(yī)學(xué)工程是綜合應(yīng)用生命科學(xué)與工程科學(xué)的原理和方法，從工程學(xué)角度在分子、細(xì)胞、組織、乃至整個人體系統(tǒng)多層次認(rèn)識人體的結(jié)構(gòu)、功能和其他生命現(xiàn)象，研究用于防病、治病、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料、制品、裝置和系統(tǒng)技術(shù)的總稱。也歡迎關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，查看更多技術(shù)文章！血清兼容PEI轉(zhuǎn)染試劑運輸方式PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種合成的聚乙烯亞胺聚合物。

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。若想咨詢更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)信息，歡迎咨詢上海曼博生物！

Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風(fēng)險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細(xì)胞，并且Transporter 5-DNA 復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細(xì)胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。 Transporter 5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時間，加快項目進度。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復(fù)性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。產(chǎn)品特點：非GMP，研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液；高轉(zhuǎn)染效率；無縫過渡到MAXgene GMP；易放大，可預(yù)測產(chǎn)量；用于工藝開發(fā)，臨床前和早期臨床研究。PEI轉(zhuǎn)染試劑的主要分子量是多少呢？

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。更多Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑等相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！近期還有PEI試用裝申請活動，可關(guān)注我們的公眾號：Mine-bioPEI轉(zhuǎn)染試劑在使用時出現(xiàn)沉淀的原因是什么?浙江PEI轉(zhuǎn)染試劑價格多少

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產(chǎn)品特點：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品。相比于PEI25K，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙?；?；2.鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應(yīng)用領(lǐng)域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段，以固體粉末形式提供，需用戶自行配置（詳情見使用方法）。更多關(guān)于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！線性PEI轉(zhuǎn)染試劑配置方法