慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)??商峁┧械霓D(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的慢病毒顆粒,需要利用表達(dá)載體和包裝載體同時共轉(zhuǎn)染293細(xì)胞或其衍生細(xì)胞,在細(xì)胞中進(jìn)行病毒的包裝,包裝好的慢病毒顆粒分泌到細(xì)胞外的培養(yǎng)基中,離心取得上清液后,通過純化濃縮進(jìn)一步提供慢病毒滴度,即可以直接用于宿主細(xì)胞的gan ran。目的基因進(jìn)入到宿主細(xì)胞之后,經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄,整合到基因組,從而高水平的表達(dá)效應(yīng)分子。有可以增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的試劑嗎?研究級慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)
人間充質(zhì)干細(xì)胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達(dá),并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,但它未被批準(zhǔn)用于人體,并且還被證明會損害MSCs細(xì)胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。polybrene的確切作用機(jī)制尚不清楚,多認(rèn)為它是通過中和細(xì)胞表面與病毒粒子之間的負(fù)靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細(xì)胞表面,從而促進(jìn)病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio高效慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)詳細(xì)步驟哪種試劑可以幫助增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)?
慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1(HIV-1)來源的一種病毒載體,慢病毒載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,是慢病毒載體系統(tǒng)的主要組成部分。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細(xì)胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有g(shù)anran力的病毒顆粒,通過ganran細(xì)胞或huoti組織,實現(xiàn)外源基因在細(xì)胞或huoti組織中表達(dá)。慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個關(guān)鍵參數(shù)是ganran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個細(xì)胞ganran的病毒粒子個數(shù),病毒粒子滴度以ganran單位(IU)/mL或TU/mL表示。慢病毒的ganran能力隨細(xì)胞類型的不同而不同,因此每種不同的細(xì)胞類型需要不同的MOI。MOI值越大,慢病毒ganran上的可能性也越大,ganran效率越高,但對細(xì)胞的毒性也越大。另外細(xì)胞需要的MOI值越大,也說明細(xì)胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo)。SIRIONBiotech為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的GMP材料供應(yīng)條件。LentiBOOST目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。更多產(chǎn)品信息歡迎咨詢上海曼博生物,也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑是用來干什么的?
SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發(fā),以及評估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方案,目前美國和歐洲多個 Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗正在進(jìn)行。Lentiboost可增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,高達(dá)90%以上,研究證明對于細(xì)胞增殖無不良影響,且在T細(xì)胞中觀察到一定的促增殖效果??蓽p少M(fèi)OI,從而降低物料成本。均勻增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的數(shù)量,但不會過度增加單個細(xì)胞病毒載體拷貝數(shù)(VCN),符合FDA/EMA對ATMP產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)。為提供更好的服務(wù),上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國市場的營銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負(fù)責(zé)。國內(nèi)做慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的公司有哪些呢?一體化慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實驗
如何使用慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑?研究級慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)
人間充質(zhì)干細(xì)胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達(dá),并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,但它未被批準(zhǔn)用于人體,并且還被證明會損害MSCs細(xì)胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。polybrene的確切作用機(jī)制尚不清楚,多認(rèn)為它是通過中和細(xì)胞表面與病毒粒子之間的負(fù)靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細(xì)胞表面,從而促進(jìn)病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。更多關(guān)于Sirion慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio研究級慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)