鑒于新生仔豬腸細(xì)胞精氨酸合成能力下降主要是由線粒體NAG利用性下降所致，除了直接供給外源精氨酸外，還可利用NCG和NAG結(jié)構(gòu)與功能類似的特性，通過NCG促使腸道瓜氨酸和精氨酸合成代謝活動(dòng)升高，從而提供一條改善新生仔豬精氨酸供應(yīng)的有效途徑，這對提高仔豬生產(chǎn)性能具有重要意義。2精氨酸在生長豬營養(yǎng)中的應(yīng)用Tan等（2008）研究表明，在生長育肥豬日糧中添加1%精氨酸能夠提高日增重，增強(qiáng)體**蛋白質(zhì)沉積，降低體脂水平，增加肌肉蛋白質(zhì)和脂肪含量，減少肌肉乳酸濃度，從而提高胴體質(zhì)量；推測其作用機(jī)理可能與NO調(diào)節(jié)營養(yǎng)分配，從而有利于蛋白質(zhì)和脂肪在體內(nèi)的優(yōu)化有關(guān)。馬現(xiàn)永等（2008a）研究表明，肥育豬日糧中添加%～1%精氨酸能夠降低腎上腺素受體基因的表達(dá)，***提高肌肉中PPAR-γ基因的表達(dá)，提示精氨酸能夠緩解豬的應(yīng)激狀態(tài)，并對肌肉中脂肪代謝具有一定的調(diào)控作用。此外，該研究還提示精氨酸能夠改善肉質(zhì)，其中以1%精氨酸效果比較好，提高了肌內(nèi)脂肪含量，同時(shí)降低滴水損失，并且肌肉嫩度也有提高的趨勢（馬現(xiàn)永等，2008b）。3精氨酸在成年豬營養(yǎng)中的應(yīng)用妊娠母豬對于成年豬的研究多集中在繁殖母豬上，而在公豬上則鮮有報(bào)道。
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仔豬斷奶的特點(diǎn)是精氨酸和脯氨酸營養(yǎng)發(fā)生***的變化(Ball等，1986；Chung和Baker，1993；Kim等，2007)。具體表現(xiàn)為，在營養(yǎng)上從必需氨基酸向非必需氨基酸的精氨酸和脯氨酸需求轉(zhuǎn)變。為了解釋潛在的機(jī)理，我們對剛斷奶仔豬進(jìn)行了一系列生物化學(xué)和飼喂試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)21日齡斷奶的仔豬在29日齡時(shí)腸上皮細(xì)胞中催化瓜氨酸合成的P5C合成酶和NAG合成酶的活性增強(qiáng)(Wu等，1994b,2004d)。此外，我們的研究結(jié)果表明，斷奶仔豬小腸中精氨酸酶和ODC的催化功能***增強(qiáng)，從而促進(jìn)了脯氨酸、尿素和多胺在腸上皮細(xì)胞中的合成(Wu等，2000a,b)。重要的是，我們在斷奶仔豬小腸中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)用于氨***的尿素循環(huán)(Wu,1995)。令人感興趣的是，剛斷奶仔豬腸上皮細(xì)胞中II型精氨酸酶的表達(dá)得到了提高，而I型精氨酸酶的表達(dá)則沒有(Flynn等，1999)。在小腸中II型精氨酸酶的誘導(dǎo)作用可能對于**修復(fù)來說是很重要的，這是因?yàn)楦彼崾蔷彼岱纸獯x的一個(gè)產(chǎn)物，也是細(xì)胞外間質(zhì)膠原蛋白的一種主要成分(Davis和Wu,1998)。需要注意的是，剛斷奶仔豬腸上皮細(xì)胞中瓜氨酸和精氨酸的合成率大于其降解率(Wu等,1994b)，從而導(dǎo)致斷奶后這2種氨基酸從小腸中的凈釋放量上升(Wu等，1994a)。 圣農(nóng)精氨酸生素用量大
豬小腸會(huì)利用谷氨酰胺產(chǎn)生瓜氨酸和精氨酸(Wu等，1994a；LeFloc'h和Seve，2000)。重要的是，谷氨酰胺是豬動(dòng)脈血中***可以被處于吸收后狀態(tài)的小腸所吸收的氨基酸(Wu等，1994a)。通過使用非膠原酶細(xì)胞制備技術(shù)(Watford等，1979)，我們成功地從豬小腸分離出在生物化學(xué)上具有活性的腸上皮細(xì)胞，并利用谷氨酰胺對其進(jìn)行培育(Wu等，1994b)。細(xì)胞外谷氨酰胺的濃度由mM上升至5mM，會(huì)相應(yīng)地使豬腸上皮細(xì)胞中瓜氨酸和精氨酸的合成量呈劑量依賴性的提高(Wu等，1994b)。對于0～7日齡仔豬，精氨酸的合成與腸上皮細(xì)胞中[U14C]谷氨酰胺轉(zhuǎn)化為[14C]精氨酸的速度保持一致(Blachier等，1993)。這一合成過程所需的所有底物(包括氨、HCO3-、谷氨酸、天冬氨酸和ATP)都是由谷氨酰胺分解代謝產(chǎn)生(Wu等，1995b)。P5C合成酶和N-乙酰谷氨酸(NAG)合成酶是谷氨酰胺轉(zhuǎn)化為瓜氨酸的過程中兩種重要調(diào)控酶(圖3)。新生仔豬和剛斷奶仔豬的其他主要**(包括肝臟、腎臟和骨骼肌)都缺少催化谷氨酰胺或谷氨酸轉(zhuǎn)化為瓜氨酸的P5C合成酶(Wu等，1997)。谷氨酰胺合成瓜氨酸的反應(yīng)發(fā)生在腸上皮細(xì)胞的線粒體中，隨后的瓜氨酸轉(zhuǎn)化為精氨酸的反應(yīng)則發(fā)生在胞質(zhì)中(Dillon等，1999)。這些結(jié)果表明。
通過提高細(xì)胞線粒體NAG水平，可能促進(jìn)小腸瓜氨酸合成，從而增加內(nèi)源性精氨酸供給。哺乳仔豬日糧中添加NAG可以成為***腸道瓜氨酸合成下降的一個(gè)有效方式，進(jìn)而促進(jìn)精氨酸的營養(yǎng)，提高日糧氨基酸合成蛋白質(zhì)的利用率(Wu等，2004)。然而，哺乳動(dòng)物的腸上皮細(xì)胞中降解NAG的脫酰(基)酶的活性很高，而限制了通過外源性添加NAG提高其線粒體濃度的途徑(Meijer等，1985)。。精氨酸生素(ArginineActivatorAdditive,AAA)是尿素循環(huán)中鳥氨酸生成瓜氨酸的中間體-NAG的類似物，可以***尿素循環(huán)中的***個(gè)酶CPS-Ⅰ——腸上皮細(xì)胞合成精氨酸過程中的一個(gè)關(guān)鍵的酶(Elhaji等，2004)。用AAA***NAGS缺乏的病人后，同位素標(biāo)記的15N，血氨和血中谷氨酰胺含量***降低，血清尿素含量提高了2～3倍(Tuchman等，2008)；用AAA***甲基丙二酸尿的病人，***增加了尿素含量，同時(shí)降低了血中谷氨酰胺、丙氨酸和甘氨酸含量，表明AAA的攝入影響氮代謝(Gebhardt等，2005,Jones等，2008)。許多研究發(fā)現(xiàn)，AAA在內(nèi)源性精氨酸的調(diào)控中具有明顯的效果。體內(nèi)和體外試驗(yàn)證明，AAA促進(jìn)了14日齡仔豬小腸上皮細(xì)胞瓜氨酸和精氨酸合成(Wu等，2004)。從日糧的管理途徑提高哺乳仔豬精氨酸或者瓜氨酸來說，添加AAA具有獨(dú)特的優(yōu)勢。
根據(jù)我們對新生仔豬腸上皮細(xì)胞中瓜氨酸和精氨酸合成所進(jìn)行研究獲得的結(jié)果，我們提出了此通道是否也會(huì)出現(xiàn)在豬胎兒上的問題(Dekaney等，2001,2003)。在對不同妊娠時(shí)期的母豬胎兒液進(jìn)行分析后，我們發(fā)現(xiàn)母豬妊娠第40天(整個(gè)妊娠期為114d)時(shí)尿囊液中的精氨酸含量異常豐富(4～6mM)，而在母體血漿精氨酸濃度卻為～mM(Wu等，1995a,1996a,1998a)。此外，我們發(fā)現(xiàn)母豬妊娠第40天時(shí)尿囊液中的鳥氨酸和谷氨酰胺水平分別達(dá)1～3mM和3～4mM的特高水平，而母體血漿濃度卻分別僅為～mM和～mM(Wu等，1995a,1996a)。尤為***的是，母豬妊娠第30～40天間，其尿囊液的精氨酸、鳥氨酸和谷氨酰胺含量分別提高23、18和4倍，而這3種氨基酸的氮含量占游離α-氨基酸氮總含氮量的67%(Wu等，1996a)。胎液中精氨酸族氨基酸(AFAA)的異常豐富可導(dǎo)致妊娠前半階段中NO和多胺的合成達(dá)到比較大化(Wu等，2003；Wu等，2005a)，此階段是胎盤生長最快的時(shí)期(Knight等，1977；Self等，2004)。這些新的研究結(jié)果表明，精氨酸依賴型代謝通道在孕體生長和發(fā)育過程中起著至關(guān)重要的作用。妊娠母豬日糧添加精氨酸可提高其妊娠性能現(xiàn)代高產(chǎn)母豬每次排卵多達(dá)20～30個(gè)，但由于出生前的高損失使至妊娠終止時(shí)僅產(chǎn)9～15頭仔豬。
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神經(jīng)型一氧化氮合酶(nNOS)與血紅素氧合酶-2(HO-2)在應(yīng)激后大鼠結(jié)腸的表達(dá)。方法采用水浸-束縛應(yīng)激(WRS)動(dòng)物模型,用免疫**化學(xué)SABC法檢測nNOS和HO-2在大鼠結(jié)腸中的表達(dá),并通過圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量測定。結(jié)果對照組大鼠nNOS主要表達(dá)于結(jié)腸黏膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢的神經(jīng)元,HO-2主要表達(dá)于結(jié)腸黏膜固有層黏膜肌、肌層環(huán)行肌及黏膜下層的血管內(nèi)皮和平滑肌。應(yīng)激組黏膜下神經(jīng)叢和肌間神經(jīng)叢的nNOS陽性神經(jīng)元的平均灰度值較對照組明顯增加,陽性神經(jīng)元的平均數(shù)高于對照組,且在黏膜上皮細(xì)胞、固有層淋巴細(xì)胞也有nNOS表達(dá);應(yīng)激組HO-2陽性黏膜肌的平均灰度值較對照組增加,環(huán)行肌陽性單位(PU)明顯高于對照組,在部分大腸腺也有HO-2表達(dá)。與應(yīng)激組比較,應(yīng)激+L-NAME組的nNOS陽性神經(jīng)元的平均灰度值減少,陽性神經(jīng)元的平均數(shù)下降,應(yīng)激+ZnPP組HO-2陽性黏膜肌平均灰度值減少,環(huán)行肌PU下降。結(jié)論一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)均是結(jié)腸重要的氣體信號(hào)分子和神經(jīng)遞質(zhì),兩者在應(yīng)激所致的結(jié)腸功能失調(diào)中可能具有協(xié)同作用。四川精氨酸生素品牌
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