分離外泌體的方法之超濾：樣品通過0.2μm聚醚砜（PES）膜過濾，較大的顆粒物質(zhì)（如細(xì)胞碎片和凋亡體）被滯留出來。然后，包括外泌體在內(nèi)的半處理濾液樣品通過TFF系統(tǒng)通過500kDa截止濾芯進(jìn)行超濾過程，進(jìn)料流速為120mL/min，跨膜壓力<3.5psi跨膜壓力>10:1，外泌體太大而無法通過毛孔并保持保留。相反，包括游離蛋白在內(nèi)的小分子通過中空纖維孔并作為滲透物洗脫并較終從過程中丟棄。為了獲得高質(zhì)量的外泌體分離和純化，通過TFF連續(xù)重新濃縮截留物樣品，并去除小于500kDa的污染物。較后，將純化的外泌體重懸并儲(chǔ)存在-80°C的聚對(duì)苯二甲酸乙二醇（PETG）瓶中的0.1M蔗糖中，并用于所需的分析。通常，通過結(jié)合超濾加超速離心或離心加超濾等不同分離方法可以成功分離外泌體，使用較低孔徑的膜過濾和超速離心可提供純外泌體。分離過程中避免對(duì)外泌體結(jié)構(gòu)和功能造成影響至關(guān)重要。上海血液DNA外泌體報(bào)價(jià)
外泌體分離方法之密度梯度離心法：這種方法將超速離心機(jī)的超速離心與蔗糖密度梯度相結(jié)合。具體地說，密度梯度離心用于將外泌體與非囊泡顆粒（例如蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)/RNA聚集體）分離。因此，該方法將囊泡與不同密度的顆粒分離。足夠的離心時(shí)間比較重要，否則如果外泌體部分具有相似的密度，則仍可能在外泌體部分中發(fā)現(xiàn)污染顆粒。該結(jié)構(gòu)不會(huì)讓大于1μm的細(xì)胞和其他顆粒進(jìn)入布線區(qū)域。一些較小的顆粒和細(xì)胞碎片可以進(jìn)入微柱區(qū)域，但被納米纖毛排除，形成直徑為30-200nm的孔。纖毛結(jié)構(gòu)選擇性地捕獲外泌體和小細(xì)胞外囊泡。肺泡外泌體企業(yè)發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)移可能為疾病治著和預(yù)后提供新的治著策略。
外泌體衍生物miRNA的重要應(yīng)用：miRNA是一類主要的小分子、單鏈、非編碼RNA分子，其成熟形式的長(zhǎng)度在20到22個(gè)核苷酸(NT)之間，在幾乎所有生物途徑中發(fā)揮重要作用，包括細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化、免疫反應(yīng)，細(xì)胞凋亡，代謝和疙瘩發(fā)生。外泌體在體液中的主要作用是可以保護(hù)miRNA，防止其生物分子在非生理?xiàng)l件下（多次凍融循環(huán)、長(zhǎng)期儲(chǔ)存和極端pH）降解。據(jù)報(bào)道，外泌體來源的miRNA在-20°C下可保持穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)5年，并且對(duì)凍融循環(huán)具有抵抗力.這也使外泌體成為病癥和其他疾病的潛在生物標(biāo)志物。miRNA與包括病癥在內(nèi)的許多疾病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)，并且還被證明被遠(yuǎn)端或附近的受體細(xì)胞吸收作為外泌體中的貨物，作為細(xì)胞間通訊的一種方法，可能會(huì)影響發(fā)病機(jī)制。所以，外泌體可以被看作是miRNA轉(zhuǎn)移至目標(biāo)受體細(xì)胞的載體。
分離外泌體的方法之免疫親和相互作用：免疫親和法是利用外泌體表面蛋白（抗原）與其靶抗體或分離配體分子之間的免疫親和相互作用原理分離純外泌體的理想方法。它有助于根據(jù)其表面標(biāo)志物分離特定類型的外泌體?；谖⒖装宓拿嘎?lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）是免疫親和分離試劑盒的一個(gè)例子，用于根據(jù)外泌體表面標(biāo)志物分離外泌體。Tetraspanin蛋白是這種分離方法的決定因素。抗CD9、抗CD63和抗CD81是免疫親和外泌體分離中使用的抗體的常見示例。免疫親和法可用于從結(jié)腸病細(xì)胞中分離外泌體，其效率高于超速離心和密度梯度分離。另外還有一種外泌體分離方法，該方法采用抗體包被的基于磁性顆粒的技術(shù)來分離外泌體。外泌體可作為一種新型的疙瘩治著策略，例如外泌體特異性LncRNA干擾RNA技術(shù)。
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。二是PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。未來可開發(fā)更加高效和精確的外泌體分離和檢測(cè)技術(shù)。泉州細(xì)胞外泌體分離生產(chǎn)商
外泌體作為一種重要的細(xì)胞通訊方式，在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中具有普遍的應(yīng)用前景。上海血液DNA外泌體報(bào)價(jià)
外泌體分離方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技術(shù)通常包括將生物流體與含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速離心。用于基于聚合物的沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。這種聚合物的沉淀可以對(duì)分離的外泌體產(chǎn)生溫和影響而且可以產(chǎn)生中性的pH值。由此，出現(xiàn)了幾種常見的外泌體試劑盒：比如：SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明，使用ExoQuick方法可以快速執(zhí)行，無需額外設(shè)備，只需用高速離心機(jī)進(jìn)行超速離心可以獲得高產(chǎn)量的外泌體。但是此方法的缺點(diǎn)是：非外泌體材料對(duì)外泌體分離物的污染仍然是基于聚合物的分離方法的一個(gè)問題。此外，分離物中的聚合物可能會(huì)干擾下游分析。上海血液DNA外泌體報(bào)價(jià)
蘇州英澤生物醫(yī)藥科技有限公司是以提供RNA\DNA試劑盒，外泌體提取試劑盒，逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，熒光定量PCR為主的有限責(zé)任公司（自然），英澤生物是我國醫(yī)藥健康技術(shù)的研究和標(biāo)準(zhǔn)制定的重要參與者和貢獻(xiàn)者。公司承擔(dān)并建設(shè)完成醫(yī)藥健康多項(xiàng)重點(diǎn)項(xiàng)目，取得了明顯的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。英澤生物將以精良的技術(shù)、優(yōu)異的產(chǎn)品性能和完善的售后服務(wù)，滿足國內(nèi)外廣大客戶的需求。