原代肝細胞由于自身良好的體外重現(xiàn)性，以及保持了高度的酶水平，在藥物篩選中發(fā)揮著重要作用。原代肝細胞可以用于藥物代謝動力學、藥物毒性評估和藥物相互作用研究等方面。原代肝細胞可以更準確地預(yù)測藥物的代謝和毒性，因此在藥物研發(fā)領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用前景。 原代肝細胞還可以用于研究肝病的發(fā)病機制、診斷和therapeutic method。例如，可以利用原代肝細胞研究肝細胞cancer的發(fā)生機制，探索新的therapeutic method。此外，原代肝細胞還可以用于研究肝炎病毒的原理和therapeutic method，為肝炎的攻克提供新的思路和方法。 除了在藥物篩選和肝病研究中的應(yīng)用，原代肝細胞在生物醫(yī)學研究中也有著廣泛的應(yīng)用。例如，可以利用原代肝細胞研究肝細胞的分化和增殖機制，探索新的therapeutic method。此外，原代肝細胞還可以用于研究肝臟的生理和病理過程，為肝臟疾病的克服提供新的思路和方法。 原代肝細胞在藥物篩選、肝病研究和生物醫(yī)學研究中具有廣泛的應(yīng)用前景。它們可以幫助科學家們更好地了解藥物的代謝和毒性、肝病的發(fā)病機制和therapeutic method、肝臟的生理和病理過程等方面，為人類健康事業(yè)做出重要的貢獻。立沃生物的原代肝細胞配套提供多種細胞培養(yǎng)質(zhì)量控制服務(wù)，包括細胞培養(yǎng)質(zhì)量檢測、細胞培養(yǎng)質(zhì)量評估等。上海羅非魚原代肝細胞純化
原代肝細胞的3D培養(yǎng)是一種新興的細胞培養(yǎng)技術(shù)，它可以更好地模擬人體內(nèi)肝臟的生理環(huán)境，從而更準確地研究肝臟疾病的發(fā)生機制。相比傳統(tǒng)的2D培養(yǎng)方式，3D培養(yǎng)可以提供更多的細胞-細胞和細胞-基質(zhì)相互作用，使細胞在培養(yǎng)過程中更加穩(wěn)定和健康。 在3D培養(yǎng)中，原代肝細胞被培養(yǎng)在一種類似于人體內(nèi)肝臟的三維結(jié)構(gòu)中，可以更好地模擬人體內(nèi)肝臟的生理環(huán)境。此外，3D培養(yǎng)還可以提供更多的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，使原代肝細胞在培養(yǎng)過程中更加穩(wěn)定和健康。 原代肝細胞的3D培養(yǎng)模型可以用于研究肝臟疾病的發(fā)生機制和治療方法，例如liver cancer、肝纖維化、肝硬化等。此外，它還可以用于藥物篩選和毒性測試，從而更好地評估藥物的安全性和有效性。 原代肝細胞的3D培養(yǎng)是一種具有廣闊應(yīng)用前景的新興細胞培養(yǎng)技術(shù)，它可以更準確地模擬人體內(nèi)肝臟的生理環(huán)境，為肝臟疾病的研究提供更加可靠的實驗?zāi)Ｐ汀７鹕酵迷渭毎囵B(yǎng)基立沃生物的原代肝細胞的分離技術(shù)門檻很高，需要特定的實驗室條件和技術(shù)，以及嚴格的實驗室管理和質(zhì)量控制。
原代肝細胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細胞培養(yǎng)是一種常用的實驗方法，但在培養(yǎng)過程中，細胞可能會受到endotoxin的污染，這會影響實驗結(jié)果的準確性。 endotoxin是一種由細菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，可以引起炎癥反應(yīng)和細胞損傷。在原代肝細胞培養(yǎng)中，endotoxin可能來自于培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)器具或細胞本身。因此，需要采取一些措施來去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑，例如聚陽離子樹脂（Polyclonal Cationic Resin，PCR）或聚乙烯醇（Polyvinyl Alcohol，PVA）。這些去除劑可以吸附endotoxin，從而減少其對細胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡單，只需要將其加入培養(yǎng)基中，然后將細胞培養(yǎng)在其中即可。 可以使用endotoxin檢測試劑盒來檢測培養(yǎng)基中的endotoxin含量。如果檢測結(jié)果顯示endotoxin含量較高，可以考慮更換培養(yǎng)基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測試劑盒外，還可以采取一些預(yù)防措施來減少endotoxin的污染。例如，使用無菌技術(shù)操作、定期更換培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基、避免過度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細胞培養(yǎng)中必須注意的問題。采取適當?shù)拇胧┛梢詼p少endotoxin的污染，保證實驗結(jié)果的準確性。
在進行原代肝細胞培養(yǎng)時，通常需要對分離得到的肝細胞進行特殊的處理或篩選，以提高肝細胞的存活率和純度。以下是一些常見的處理或篩選方法：1.密度梯度離心：密度梯度離心是一種常用的分離和篩選肝細胞的方法。通過使用密度梯度介質(zhì)（如Percoll或Ficoll），可以將肝細胞與其他細胞分離出來，從而提高肝細胞的純度。2.選擇性貼壁：選擇性貼壁是一種基于肝細胞和其他細胞在培養(yǎng)皿上的貼壁特性不同的篩選方法。肝細胞通常會在培養(yǎng)皿上貼壁生長，而其他細胞則不會。通過選擇合適的培養(yǎng)條件和時間，可以篩選出貼壁生長的肝細胞。3.流式細胞術(shù)：流式細胞術(shù)是一種基于細胞表面標志物的篩選方法。通過使用熒光標記的抗體，可以識別和篩選出表達特定標志物的肝細胞。4.細胞篩選：細胞篩選是一種基于細胞形態(tài)和功能的篩選方法。通過觀察細胞的形態(tài)和功能特征，可以篩選出符合要求的肝細胞。以上是一些常見的原代肝細胞處理或篩選方法，不同的方法適用于不同的實驗需求和研究目的。在進行原代肝細胞培養(yǎng)時，需要根據(jù)具體情況選擇合適的處理或篩選方法，以提高肝細胞的存活率和純度。立沃生物原代肝細胞提供動物源肝細胞供體數(shù)定制服務(wù)，滿足客戶在不同實驗用途和不同實驗場景下的需求。
原代肝細胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中，根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長的特性，可分為懸浮型和貼壁型兩大類。 原代肝細胞懸浮生長時可以呈單個細胞或細小的細胞團，胞體為圓形。其優(yōu)點是在培養(yǎng)液中生長，生存空間大，允許長時間生長，便于大量繁殖。正常貼壁原代肝細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性，細胞相互接觸后可抑制細胞的運動，因此細胞不會相互重疊于其上面生長。細胞生長、匯合成片后，雖發(fā)生接觸抑制，但只要營養(yǎng)充分，仍可增殖分裂，但當細胞數(shù)量達到一定密度后，由于營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響，細胞分裂停止，稱為密度抑制。 當肝細胞被分離后，可以進行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的原代肝細胞在開始的4~6h內(nèi)細胞色素P450酶的活性和體內(nèi)一致，隨時間的延長而迅速下降，故懸浮肝細胞一般用于代謝穩(wěn)定性研究或代謝物譜研究。貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞有足夠的時間從損傷中恢復過來，保持了正常肝細胞的生物學特征及代謝活性，一般用于酶誘導研究、藥物細胞毒性研究、慢代謝藥物的代謝穩(wěn)定性或產(chǎn)物推斷研究。原代肝細胞衍生的Organoid既能提供需要的擁肝毒模型，也能體現(xiàn)肝細胞在應(yīng)對病原體時的生理反應(yīng)和結(jié)構(gòu)變化。大鼠原代肝細胞培養(yǎng)技巧
作為一種重要的體外細胞模型，原代肝細胞在藥物篩選、毒性測試和疾病研究等領(lǐng)域具有重要的作用。上海羅非魚原代肝細胞純化
原代肝細胞的細胞形態(tài)有許多獨特的形態(tài)特征。原代肝細胞是指從新鮮肝臟組織中分離出來的一種細胞類型，呈多邊形或多角形形狀，大小約為20-30微米。原代肝細胞具有明顯的細胞核和細胞質(zhì)，核小而高亮，細胞核呈圓形或橢圓形，也有雙核情況存在。原代肝細胞的細胞質(zhì)內(nèi)含有豐富的細胞器和細胞骨架，濃稠且顏色較深。此外，原代肝細胞表面具有許多微絨毛和微細突起，這些結(jié)構(gòu)有助于細胞之間的黏附和交流。同時，原代肝細胞具有高度的代謝活性和生物合成能力，能夠合成和分泌多種生物活性物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、hormone、細胞因子等。這些獨特的形態(tài)特征使得原代肝細胞成為研究肝臟生理和病理過程的重要模型細胞。上海羅非魚原代肝細胞純化