惠州牛原代肝細胞分離培養(yǎng)

來源: 發(fā)布時間:2024-05-15

貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞是酶誘導(dǎo)研究的重要模型,也是藥物代謝實驗的重要模型。這種模型可以通過倍數(shù)變化方法來評估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。具體來說,研究人員可以使用已知的陽性和陰性對照藥物來校準體外系統(tǒng),然后將研究藥物與細胞共孵育,測定孵育后CYP酶的mRNA表達水平倍數(shù)變化,以評估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機制,從而更好地指導(dǎo)臨床用藥。酶誘導(dǎo)是一種藥物相互作用的現(xiàn)象,指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性,從而導(dǎo)致合用的藥物代謝速率加快,使得原藥的血藥濃度下降,進而使其療效降低或喪失。這種現(xiàn)象在臨床上非常常見,因為許多藥物都需要通過肝臟代謝酶來進行代謝,而酶誘導(dǎo)會影響這些代謝酶的活性,從而影響藥物的代謝。酶誘導(dǎo)的機制是通過影響肝臟細胞內(nèi)的CYP酶的表達和活性來實現(xiàn)的。CYP酶是肝臟細胞內(nèi)重要的藥物代謝酶之一,它能夠代謝許多藥物和毒物,從而使它們被代謝出體外。當(dāng)某些化合物進入體內(nèi)后,它們會與CYP酶結(jié)合并使它們的特異性表達,從而使得CYP酶能夠更快地代謝藥物和毒物,使其被代謝出體外。原代肝細胞依舊是目前理想的體外模型,是藥物代謝研究的重要組成部分。立沃生物的原代肝細胞提供多種細胞培養(yǎng)技術(shù)培訓(xùn)服務(wù),包括細胞培養(yǎng)技術(shù)培訓(xùn)、細胞培養(yǎng)實驗指導(dǎo)等。惠州牛原代肝細胞分離培養(yǎng)

原代肝細胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細胞培養(yǎng)是一種常用的實驗方法,但在培養(yǎng)過程中,細胞可能會受到endotoxin的污染,這會影響實驗結(jié)果的準確性。 endotoxin是一種由細菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì),可以引起炎癥反應(yīng)和細胞損傷。在原代肝細胞培養(yǎng)中,endotoxin可能來自于培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)器具或細胞本身。因此,需要采取一些措施來去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑,例如聚陽離子樹脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。這些去除劑可以吸附endotoxin,從而減少其對細胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡單,只需要將其加入培養(yǎng)基中,然后將細胞培養(yǎng)在其中即可。 可以使用endotoxin檢測試劑盒來檢測培養(yǎng)基中的endotoxin含量。如果檢測結(jié)果顯示endotoxin含量較高,可以考慮更換培養(yǎng)基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測試劑盒外,還可以采取一些預(yù)防措施來減少endotoxin的污染。例如,使用無菌技術(shù)操作、定期更換培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基、避免過度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細胞培養(yǎng)中必須注意的問題。采取適當(dāng)?shù)拇胧┛梢詼p少endotoxin的污染,保證實驗結(jié)果的準確性。河北樹鼩原代肝細胞培養(yǎng)基立沃生物的原代肝細胞的分離技術(shù)門檻很高,需要特定的實驗室條件和技術(shù),以及嚴格的實驗室管理和質(zhì)量控制。

原代肝細胞是一種非常重要的體外細胞模型。原代肝細胞是從新鮮的肝臟組織中分離出來的,具有高度的生物學(xué)活性和功能性,可以用于許多不同的應(yīng)用,包括藥物代謝和毒性測試、肝細胞疾病研究、肝細胞移植等。原代肝細胞與其他肝細胞模型相比具有許多優(yōu)勢。原代肝細胞是從新鮮的肝臟組織中分離出來,具有更高的生物學(xué)活性和功能性,這意味著原代肝細胞可以更好地模擬人體肝臟的生理和代謝過程,因此更適合用于藥物代謝和毒性測試。這些細胞可以幫助研究人體對藥物的反應(yīng),以及藥物對肝臟的影響。原代肝細胞可以用于研究肝細胞疾病,如肝病、肝硬化等。這些疾病對人類健康造成了極大的威脅,因此研究這些疾病的機制非常重要。原代肝細胞可以提供一個更真實的模型,幫助科學(xué)家更好地理解這些疾病的發(fā)生和發(fā)展過程。此外,原代肝細胞還可以用于肝細胞移植。肝細胞移植是一種克服肝臟疾病的方法,可以幫助患者恢復(fù)肝臟功能。原代肝細胞可以用于移植,以幫助患者恢復(fù)健康。原代肝細胞是一種非常重要的細胞類型,可以用于藥物代謝和毒性測試、肝細胞疾病研究、肝細胞移植等,為人類健康做出了重要的貢獻。

原代肝細胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中,根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為懸浮型和貼壁型兩大類。 原代肝細胞懸浮生長時可以呈單個細胞或細小的細胞團,胞體為圓形。其優(yōu)點是在培養(yǎng)液中生長,生存空間大,允許長時間生長,便于大量繁殖。正常貼壁原代肝細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性,細胞相互接觸后可抑制細胞的運動,因此細胞不會相互重疊于其上面生長。細胞生長、匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,仍可增殖分裂,但當(dāng)細胞數(shù)量達到一定密度后,由于營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,細胞分裂停止,稱為密度抑制。 當(dāng)肝細胞被分離后,可以進行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的原代肝細胞在開始的4~6h內(nèi)細胞色素P450酶的活性和體內(nèi)一致,隨時間的延長而迅速下降,故懸浮肝細胞一般用于代謝穩(wěn)定性研究或代謝物譜研究。貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞有足夠的時間從損傷中恢復(fù)過來,保持了正常肝細胞的生物學(xué)特征及代謝活性,一般用于酶誘導(dǎo)研究、藥物細胞毒性研究、慢代謝藥物的代謝穩(wěn)定性或產(chǎn)物推斷研究。立沃生物的原代肝細胞來源于不同的動物品系,以滿足客戶的個性化需求。

原代肝細胞的來源供體來源很多。鑒于人原代肝細胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問題,研究人員嘗試從動物肝臟中分離原代肝細胞,用來體外培養(yǎng)并進行研究。使用較多的是嚙齒動物,還有一些哺乳動物和魚類。目前常用的供體品系有樹鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚等。 原代肝細胞除了供體品系不同以外,也會根據(jù)細胞來源的供體數(shù),分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實驗的研究目的。 原代肝細胞的應(yīng)用場景也很多。隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動物和人肝細胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學(xué)的研究;②預(yù)測和解釋藥物與藥物之間的相互作用;③研究藥物的細胞毒性等。原代肝細胞培養(yǎng)實驗室哪家好?推薦立沃生物!中山雞原代肝細胞購買

人原代肝細胞保留了細胞在體內(nèi)環(huán)境里的功能與特性,是較為接近臨床的一種標準體外短期實驗培養(yǎng)模型。惠州牛原代肝細胞分離培養(yǎng)

肝臟是人體內(nèi)重要的organ之一,它不僅是人體的化學(xué)工廠,還是藥物代謝的重要organ。藥物在體內(nèi)的代謝過程中,肝臟扮演著至關(guān)重要的角色。因此,研究肝臟的代謝功能對于藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究具有重要的意義。 在體外藥物代謝研究中,肝臟是常用的模型之一。常用的體外模型包括肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液、原代肝細胞、肝組織切片和重組人代謝酶等。其中,原代肝細胞因具有較好的體外試驗重現(xiàn)性,基本維持了肝臟的代謝功能,特別是較好的保留了與體內(nèi)一致的酶水平,成為了體外藥物試驗的“金標準”,廣泛應(yīng)用于藥物代謝與毒理學(xué)研究中。 原代肝細胞的研究對于藥物代謝和毒理學(xué)研究具有重要的意義。它可以模擬體內(nèi)肝臟的代謝過程,研究藥物在體內(nèi)的代謝途徑和代謝產(chǎn)物,為藥物研發(fā)提供重要的參考。同時,原代肝細胞還可以用于毒理學(xué)研究,研究藥物的毒性和副作用,為藥物的安全性評價提供重要的依據(jù)。 肝臟是藥物代謝的重要organ,原代肝細胞作為體外藥物代謝研究的“金標準”,在藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究中具有重要的意義。未來,隨著科技的不斷發(fā)展,原代肝細胞的研究將會更加深入,為藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究提供更加準確的數(shù)據(jù)和依據(jù)。惠州牛原代肝細胞分離培養(yǎng)