原代肝細胞的2D培養(yǎng)模型是一種常用的體外實驗模型，用于研究肝細胞的生物學特性和功能。原代肝細胞的2D培養(yǎng)模型具有許多優(yōu)點。首先，該模型可以提供一定量的原代肝細胞，使研究人員能夠進行大規(guī)模的實驗研究。其次，該模型提供了一個穩(wěn)定的環(huán)境，使研究人員能夠更好地控制原代細胞的生長和分化，以及研究肝細胞在不同條件下的反應和功能。此外，該模型還提供了一種簡單、快速和經濟的方法，用于評估藥物的毒性和療效，以及研究原代肝細胞在不同疾病狀態(tài)下的反應和功能。原代肝細胞的2D培養(yǎng)模型也存在一些限制。首先，該模型只能提供有限的原代肝細胞數(shù)量，因為原代肝細胞在體外的壽命較短，容易失去其生物學特性和功能。其次，該模型無法完全模擬肝臟在體內的復雜環(huán)境，因此可能無法準確預測原代肝細胞在體內的反應和功能。此外，該模型也存在一些技術挑戰(zhàn)，如原代肝細胞分離和培養(yǎng)條件的優(yōu)化等。原代肝細胞的2D培養(yǎng)模型是一種重要的實驗方法，可以用于研究原代肝細胞的生物學特性和功能，以及評估藥物的毒性和療效。雖然存在一些限制，但該模型仍然是原代肝細胞研究的重要工具之一。立沃生物科技有限公司原代肝細胞是從健康肝臟中提取后體外培養(yǎng)的，保留了肝臟的酶水平和功能。深圳新西蘭兔原代肝細胞
原代肝細胞的來源供體來源很多。鑒于人原代肝細胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問題,研究人員嘗試從動物肝臟中分離原代肝細胞,用來體外培養(yǎng)并進行研究。使用較多的是嚙齒動物,還有一些哺乳動物和魚類。目前常用的供體品系有樹鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚等。 原代肝細胞除了供體品系不同以外，也會根據細胞來源的供體數(shù)，分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實驗的研究目的。 原代肝細胞的應用場景也很多。隨著技術水平的不斷提高，原代培養(yǎng)的動物和人肝細胞已廣泛應用于藥物研究：①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學的研究；②預測和解釋藥物與藥物之間的相互作用；③研究藥物的細胞毒性等。深圳新西蘭兔原代肝細胞原代肝細胞的研究可以幫助人們了解肝臟的功能和疾病，從而了解肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展，為其攻克提供可能。
貼壁培養(yǎng)是一種常用的細胞培養(yǎng)方法，可以使原代肝細胞在培養(yǎng)皿表面附著生長，形成單層細胞群落。原代肝細胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點： 1. 分離和準備細胞：從新鮮的動物肝臟中分離出原代肝細胞后，需要進行細胞計數(shù)和質量檢測，確保細胞數(shù)量和質量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇：原代肝細胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長和代謝的培養(yǎng)基，常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層：為了使原代肝細胞能夠附著生長，需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細胞黏附因子。 4. 細胞接種和培養(yǎng)：將準備好的原代肝細胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中，加入適量的培養(yǎng)基，放入恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。需要注意的是，原代肝細胞的培養(yǎng)時間較短，一般在3-5天左右，因此需要及時更換培養(yǎng)基和進行細胞觀察。 原代肝細胞的貼壁培養(yǎng)可以通過在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來達到讓原代肝細胞快速貼壁的效果。
如何提升原代肝細胞的活率一直是個很大的挑戰(zhàn)。由于原代肝細胞的特殊性質，它們的活率和得率往往比一般細胞低，這給研究工作帶來了很大的挑戰(zhàn)。為了提高原代肝細胞的活率和得率，我們可以采取以下措施： 1.優(yōu)化細胞培養(yǎng)條件：原代肝細胞對培養(yǎng)條件非常敏感，因此我們需要針對不同的細胞類型和實驗目的，優(yōu)化培養(yǎng)條件，包括培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度、CO2濃度等。 2.選擇合適的細胞來源：原代肝細胞可以從不同的來源獲得，如人體肝臟組織、動物肝臟組織等，我們需要根據實驗需要選擇合適的細胞來源。 3. 優(yōu)化細胞分離方法：原代肝細胞的分離方法也會影響細胞的活率和得率。我們可以采用不同的分離方法，如機械分離、酶消化等，選擇適合的方法來分離細胞。 4. 使用適當?shù)募毎囵B(yǎng)基：不同的細胞類型需要不同的培養(yǎng)基，我們需要根據實驗需要選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)基。同時，我們還可以添加一些生長因子和細胞因子來促進細胞的生長和增殖。 5. 保持細胞的穩(wěn)定性：定期更換培養(yǎng)基、避免過度培養(yǎng)等。 提高原代肝細胞的活率和得率需要我們綜合考慮多個因素，包括細胞培養(yǎng)條件、細胞來源、細胞分離方法、培養(yǎng)基配方等。懸浮肝細胞主要應用于藥物代謝研究，一般使用多供體混合懸浮肝細胞，適用于試驗周期比較短的實驗。
在原代肝細胞培養(yǎng)過程中，如何避免污染？在原代肝細胞培養(yǎng)過程中，避免污染是非常重要的，以下是一些避免細胞污染的方法：1.嚴格遵守無菌操作：在進行原代肝細胞培養(yǎng)前，需要對所有設備和材料進行嚴格的無菌處理，并在操作過程中嚴格遵守無菌操作規(guī)范，避免細菌和其他微生物的污染。2.使用無菌技術：在進行原代肝細胞培養(yǎng)時，需要使用無菌技術，例如使用無菌培養(yǎng)皿、無菌吸管、無菌手套等，以避免污染。3.保持培養(yǎng)環(huán)境清潔：培養(yǎng)環(huán)境的清潔度對原代肝細胞的培養(yǎng)非常重要。需要定期清潔培養(yǎng)室和培養(yǎng)設備，并保持室內通風良好。4.控制人員流動：在培養(yǎng)過程中，需要控制人員流動，盡量減少人員進出培養(yǎng)室，以避免污染。5.使用無菌培養(yǎng)基：使用無菌培養(yǎng)基可以避免培養(yǎng)基中的細菌和其他微生物的污染。6.定期檢查：定期檢查培養(yǎng)物的生長情況和污染情況，及時發(fā)現(xiàn)和處理污染。 立沃原代肝細胞配套提供多種細胞培養(yǎng)實驗設計服務，包括細胞培養(yǎng)實驗方案設計、細胞培養(yǎng)實驗數(shù)據分析等。廣州鴨原代肝細胞圖片
原代肝細胞擁有肝臟的特性和功能，可用于研究肝臟疾病的細胞信號傳導和細胞增殖，是有效的體外實驗模型。深圳新西蘭兔原代肝細胞
原代肝細胞是藥物代謝研究領域非常重要的體外模型。原代肝細胞作為藥物代謝和藥物毒理研究的經典模型，在探討藥物在肝中的代謝途徑和藥代動力學的研究中發(fā)揮著重要作用。將苗頭化合物與懸浮原代肝細胞共孵育，不但可對化合物在肝細胞中的代謝穩(wěn)定性進行研究，而且還可得到相對多量的高純度的代謝產物，在研究藥物生物轉化特征，尋找藥物可能的代謝物方面具有很大的優(yōu)勢。尤其是當有證據顯示化合物的生物轉化途徑為二相代謝、水解作用或肝微粒體中非特異性蛋白結合很高、肝微粒體中代謝不明顯的時候，原代肝細胞更為不可替代的體外模型。深圳新西蘭兔原代肝細胞