不同物種的原代肝細胞在貼壁時間上存在差異。以小鼠為例,其原代肝細胞可能在培養(yǎng)基中需1個小時開始貼壁,而其他物種則需要4-6小時左右。這是由于不同物種的細胞形態(tài)、生理特性和培養(yǎng)條件等因素的影響。 在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,貼壁時間是一個重要的指標。一般來說,原代肝細胞在培養(yǎng)基中貼壁后,細胞的代謝活性和功能會得到提高,因此貼壁時間越短,細胞的生物學活性就越高。但是,如果貼壁時間過短,細胞可能會出現(xiàn)脫落或死亡等情況,因此需要根據(jù)具體情況進行調(diào)整。 另外,原代肝細胞的貼壁能力也與細胞的新鮮程度有關。新鮮分離的原代肝細胞一般需要4-6小時才能貼壁,而經(jīng)過冷凍保存的細胞則需要更長的時間。因此,在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,需要根據(jù)細胞的新鮮程度和貼壁時間進行合理的調(diào)整。 需要注意的是,幾乎所有物種的原代肝細胞都可以貼壁,但不同物種的細胞在培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基配方等方面存在差異。因此,在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,需要根據(jù)具體物種和實驗要求進行合理的選擇和調(diào)整,以確保細胞的生物學活性和代謝功能得到有效的發(fā)揮。原代肝細胞保留了肝細胞原始的生理功能與分化狀態(tài),是肝臟研究與藥物研發(fā)的“金標準”細胞模型。佛山牛原代肝細胞
原代肝細胞可以用于乙肝病毒的對照試驗。為探究不同類型肝細胞對乙型肝炎病毒(HBV)的影響,以及不同藥物和生物學處理對HBV的影響,可以選擇了人原代肝細胞(PHH)樹鼩原代肝細胞(PTH)、hNTCP穩(wěn)定表達豬肝細胞(PPH-hNTCP)和hNTCP穩(wěn)定表達liver cancer細胞系(Huh7D-hNTCP)作為研究對象。 采用HBV模型,將不同類型肝細胞融合HBV,并進行藥物處理和生物學處理。藥物處理包括小分子化合物和中藥提取物等,生物學處理包括過表達、敲除siRNA和shRNA等。通過對處理后的細胞進行評價,可以了解不同藥物和生物學處理對HBV的影響。 這種研究方法的意義在于探究不同類型肝細胞對HBV的影響,為研究HBV的機制提供重要的實驗數(shù)據(jù)。同時,本研究還可以為開發(fā)新型抗HBV藥物提供參考,為臨床克服乙型肝炎提供新的思路和方法。湛江食蟹猴原代肝細胞培養(yǎng)步驟貼壁原代肝細胞主要用于肝臟再生研究、肝臟3D打印、肝臟疾病研究、HBV、HCV病毒研究等。
貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞是酶誘導研究的重要模型。這種模型可以通過倍數(shù)變化方法來評估藥物是否為酶的誘導劑。具體來說,研究人員可以使用已知的陽性和陰性對照藥物來校準體外系統(tǒng),然后將研究藥物與細胞共孵育,測定孵育后CYP酶的mRNA表達水平倍數(shù)變化,以評估藥物是否為酶的誘導劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機制,從而更好地指導臨床用藥。 酶誘導是一種藥物相互作用的現(xiàn)象,指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性,從而導致合用的藥物代謝速率加快,使得原藥的血藥濃度下降,進而使其療效降低或喪失。這種現(xiàn)象在臨床上非常常見,因為許多藥物都需要通過肝臟代謝酶來進行代謝,而酶誘導會影響這些代謝酶的活性,從而影響藥物的代謝。 酶誘導的機制是通過影響肝臟細胞內(nèi)的CYP酶的表達和活性來實現(xiàn)的。CYP酶是肝臟細胞內(nèi)重要的藥物代謝酶之一,它能夠代謝許多藥物和毒物,從而使它們被代謝出體外。當某些化合物進入體內(nèi)后,它們會與CYP酶結合并使它們的特異性表達,從而使得CYP酶能夠更快地代謝藥物和毒物,使其被代謝出體外。 原代肝細胞依舊是目前理想的體外模型,是藥物代謝研究的重要組成部分。
原代肝細胞根據(jù)其形態(tài)和功能的不同可以分為多種類型。 首先是肝細胞,也稱為肝細胞主細胞,它們占據(jù)了肝臟細胞總數(shù)的80%以上。肝細胞是肝臟重要的細胞類型,它們具有多種重要的生理功能,如合成和分泌膽汁、代謝和儲存營養(yǎng)物質(zhì)等。 其次是肝星狀細胞,也稱為伊氏細胞。肝星狀細胞是肝臟中的一種非常重要的細胞類型,它們具有多種功能,如調(diào)節(jié)肝臟免疫反應、維持肝臟微環(huán)境穩(wěn)定等。 還有肝內(nèi)膽管上皮細胞,它們是肝內(nèi)膽管的主要細胞類型,具有分泌和排泄膽汁的功能。此外,還有肝內(nèi)血管內(nèi)皮細胞、肝內(nèi)間質(zhì)細胞等。 總之,原代肝細胞的分類是非常多樣化的,每種類型的細胞都具有不同的形態(tài)和功能,它們共同構成了肝臟。對于研究肝臟疾病和開發(fā)新的therapeutic method來說,了解原代肝細胞的分類和功能是非常重要的。原代肝細胞作為體外藥物代謝研究的“金標準”,在藥物研發(fā)和毒理學研究中具有重要的意義。
如何提高原代肝細胞的存活率?原代肝細胞是指直接從生物體肝臟中分離出來的肝細胞,其存活率的提高可以通過以下方法實現(xiàn):1.選擇合適的分離方法:選擇合適的分離方法可以提高原代肝細胞的存活率。例如,可以使用膠原酶消化法或機械分離法等方法分離肝細胞。2.控制培養(yǎng)條件:原代肝細胞的培養(yǎng)條件對其存活率有很大影響。例如,培養(yǎng)溫度、濕度、氧氣含量、培養(yǎng)基成分等都需要嚴格控制。3.使用合適的培養(yǎng)基:選擇合適的培養(yǎng)基可以提高原代肝細胞的存活率。例如,可以使用含有肝細胞生長因子、胰島素等成分的培養(yǎng)基。4.控制細胞密度:原代肝細胞的密度對其存活率也有很大影響。如果細胞密度過高,會導致細胞缺氧和營養(yǎng)不足,從而降低存活率。因此,需要控制細胞密度,使其保持在適當?shù)姆秶鷥?nèi)。5.添加細胞保護劑:添加細胞保護劑可以提高原代肝細胞的存活率。例如,可以添加谷胱甘肽、維生素E等抗氧化劑,以減少細胞氧化損傷。6.定期更換培養(yǎng)基:定期更換培養(yǎng)基可以防止細胞代謝產(chǎn)物積累和營養(yǎng)不足,從而提高原代肝細胞的存活率??傊?,提高原代肝細胞的存活率需要綜合考慮多種因素,包括分離方法、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基、細胞密度、細胞保護劑等。 立沃生物的原代肝細胞可以提供多種檢測服務,包括細胞活率、細胞數(shù)、endotoxin檢測等。佛山食蟹猴原代肝細胞價格
立沃生物的原代肝細胞可提供不同狀態(tài)的細胞,如貼壁細胞、懸浮細胞等,滿足客戶基于使用場景的個性化需求。佛山牛原代肝細胞
如何提升原代肝細胞的活率一直是個很大的挑戰(zhàn)。由于原代肝細胞的特殊性質(zhì),它們的活率和得率往往比一般細胞低,這給研究工作帶來了很大的挑戰(zhàn)。為了提高原代肝細胞的活率和得率,我們可以采取以下措施: 1.優(yōu)化細胞培養(yǎng)條件:原代肝細胞對培養(yǎng)條件非常敏感,因此我們需要針對不同的細胞類型和實驗目的,優(yōu)化培養(yǎng)條件,包括培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度、CO2濃度等。 2.選擇合適的細胞來源:原代肝細胞可以從不同的來源獲得,如人體肝臟組織、動物肝臟組織等,我們需要根據(jù)實驗需要選擇合適的細胞來源。 3. 優(yōu)化細胞分離方法:原代肝細胞的分離方法也會影響細胞的活率和得率。我們可以采用不同的分離方法,如機械分離、酶消化等,選擇適合的方法來分離細胞。 4. 使用適當?shù)募毎囵B(yǎng)基:不同的細胞類型需要不同的培養(yǎng)基,我們需要根據(jù)實驗需要選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)基。同時,我們還可以添加一些生長因子和細胞因子來促進細胞的生長和增殖。 5. 保持細胞的穩(wěn)定性:定期更換培養(yǎng)基、避免過度培養(yǎng)等。 提高原代肝細胞的活率和得率需要我們綜合考慮多個因素,包括細胞培養(yǎng)條件、細胞來源、細胞分離方法、培養(yǎng)基配方等。佛山牛原代肝細胞