原代肝細(xì)胞的來(lái)源供體來(lái)源很多。鑒于人原代肝細(xì)胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問(wèn)題,研究人員嘗試從動(dòng)物肝臟中分離原代肝細(xì)胞,用來(lái)體外培養(yǎng)并進(jìn)行研究。使用較多的是嚙齒動(dòng)物,還有一些哺乳動(dòng)物和魚(yú)類。目前常用的供體品系有樹(shù)鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚(yú)等。 原代肝細(xì)胞除了供體品系不同以外，也會(huì)根據(jù)細(xì)胞來(lái)源的供體數(shù)，分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實(shí)驗(yàn)的研究目的。 原代肝細(xì)胞的應(yīng)用場(chǎng)景也很多。隨著技術(shù)水平的不斷提高，原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究：①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究；②預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用；③研究藥物的細(xì)胞毒性等。立沃生物的原代肝細(xì)胞的分離技術(shù)門檻很高，需要特定的實(shí)驗(yàn)室條件和技術(shù)，嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理和質(zhì)量控制。汕頭原代肝細(xì)胞培養(yǎng)方法
原代肝細(xì)胞是一種來(lái)源于肝臟組織的細(xì)胞，具有很高的生物學(xué)活性和穩(wěn)定性，是進(jìn)行肝臟相關(guān)研究的重要材料。我們公司的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品采用較新的培養(yǎng)技術(shù)，能夠保持細(xì)胞的原始性，具有很高的可再生性和穩(wěn)定性，可以廣泛應(yīng)用于肝臟疾病的研究和藥物篩選。我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品采用關(guān)鍵技術(shù)的培養(yǎng)方法，能夠保證細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化，同時(shí)不會(huì)影響細(xì)胞的穩(wěn)定性和功能。我們的產(chǎn)品具有以下特點(diǎn)：1.高質(zhì)量：我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品來(lái)源于健康的人體肝臟組織，具有很高的生物學(xué)活性和穩(wěn)定性，可以保證研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。2.易于培養(yǎng)：我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品采用較新的培養(yǎng)技術(shù)，能夠保持細(xì)胞的原始性，同時(shí)不需要復(fù)雜的培養(yǎng)條件，可以方便地進(jìn)行培養(yǎng)和擴(kuò)增。3.廣泛應(yīng)用：我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品可以廣泛應(yīng)用于肝臟疾病的研究和藥物篩選，例如肝病、肝纖維化、肝炎等疾病的相關(guān)研究，以及藥物代謝和毒性研究等領(lǐng)域。4.高效：我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品具有很高的可再生性和穩(wěn)定性，可以進(jìn)行多次傳代和擴(kuò)增，能夠較大提高研究效率和成本效益?？傊?，我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品是一種高質(zhì)量、易于培養(yǎng)、廣泛應(yīng)用、高效的研究材料，能夠?yàn)楦闻K相關(guān)研究和藥物篩選提供有力的支持。廣東魚(yú)原代肝細(xì)胞圖片肝原代細(xì)胞執(zhí)行著許多重要的功能,如毒物的分解、尿素的合成、制造血漿中的的大多數(shù)血漿蛋白質(zhì)等。
貼壁培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞是酶誘導(dǎo)研究的重要模型。這種模型可以通過(guò)倍數(shù)變化方法來(lái)評(píng)估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。具體來(lái)說(shuō)，研究人員可以使用已知的陽(yáng)性和陰性對(duì)照藥物來(lái)校準(zhǔn)體外系統(tǒng)，然后將研究藥物與細(xì)胞共孵育，測(cè)定孵育后CYP酶的mRNA表達(dá)水平倍數(shù)變化，以評(píng)估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機(jī)制，從而更好地指導(dǎo)臨床用藥。 酶誘導(dǎo)是一種藥物相互作用的現(xiàn)象，指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性，從而導(dǎo)致合用的藥物代謝速率加快，使得原藥的血藥濃度下降，進(jìn)而使其療效降低或喪失。這種現(xiàn)象在臨床上非常常見(jiàn)，因?yàn)樵S多藥物都需要通過(guò)肝臟代謝酶來(lái)進(jìn)行代謝，而酶誘導(dǎo)會(huì)影響這些代謝酶的活性，從而影響藥物的代謝。 酶誘導(dǎo)的機(jī)制是通過(guò)影響肝臟細(xì)胞內(nèi)的CYP酶的表達(dá)和活性來(lái)實(shí)現(xiàn)的。CYP酶是肝臟細(xì)胞內(nèi)重要的藥物代謝酶之一，它能夠代謝許多藥物和毒物，從而使它們被代謝出體外。當(dāng)某些化合物進(jìn)入體內(nèi)后，它們會(huì)與CYP酶結(jié)合并使它們的特異性表達(dá)，從而使得CYP酶能夠更快地代謝藥物和毒物，使其被代謝出體外。 原代肝細(xì)胞依舊是目前理想的體外模型，是藥物代謝研究的重要組成部分。
原代肝細(xì)胞可以用于乙肝病毒的對(duì)照試驗(yàn)。為探究不同類型肝細(xì)胞對(duì)乙型肝炎病毒（HBV）的影響，以及不同藥物和生物學(xué)處理對(duì)HBV的影響，可以選擇了人原代肝細(xì)胞（PHH）樹(shù)鼩原代肝細(xì)胞（PTH）、hNTCP穩(wěn)定表達(dá)豬肝細(xì)胞（PPH-hNTCP）和hNTCP穩(wěn)定表達(dá)liver cancer細(xì)胞系（Huh7D-hNTCP）作為研究對(duì)象。 采用HBV模型，將不同類型肝細(xì)胞融合HBV，并進(jìn)行藥物處理和生物學(xué)處理。藥物處理包括小分子化合物和中藥提取物等，生物學(xué)處理包括過(guò)表達(dá)、敲除siRNA和shRNA等。通過(guò)對(duì)處理后的細(xì)胞進(jìn)行評(píng)價(jià)，可以了解不同藥物和生物學(xué)處理對(duì)HBV的影響。 這種研究方法的意義在于探究不同類型肝細(xì)胞對(duì)HBV的影響，為研究HBV的機(jī)制提供重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。同時(shí)，本研究還可以為開(kāi)發(fā)新型抗HBV藥物提供參考，為臨床克服乙型肝炎提供新的思路和方法。原代肝細(xì)胞衍生的Organoid既能提供需要的擁肝毒模型，也能體現(xiàn)肝細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病原體時(shí)的生理反應(yīng)。
原代肝細(xì)胞的融合度是影響其生長(zhǎng)和增值能力的重要因素之一。當(dāng)融合度達(dá)到70%以上時(shí)，細(xì)胞開(kāi)始進(jìn)入高度同步狀態(tài)，細(xì)胞之間的相互作用也得到了有效的發(fā)揮，從而促進(jìn)了細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。但是，如果融合度低于70%，細(xì)胞之間的相互作用就會(huì)受到限制，導(dǎo)致細(xì)胞的增值能力受到限制，無(wú)法達(dá)到100%。 此外，細(xì)胞之間的距離也是影響細(xì)胞生長(zhǎng)和增值能力的重要因素之一。當(dāng)細(xì)胞之間的距離剛好是黃金分割點(diǎn)時(shí)，細(xì)胞開(kāi)始進(jìn)入高度同步狀態(tài)，細(xì)胞之間的相互作用也得到了有效的發(fā)揮，從而促進(jìn)了細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。但是，如果細(xì)胞之間的距離超過(guò)了黃金分割點(diǎn)，細(xì)胞就無(wú)法進(jìn)入高度同步狀態(tài)，從而導(dǎo)致細(xì)胞的增值能力受到限制。 細(xì)胞的培養(yǎng)密度也是影響細(xì)胞生長(zhǎng)和增值能力的重要因素之一。低密度培養(yǎng)雖然可以保持細(xì)胞的功能，但是細(xì)胞的增值能力會(huì)很快丟失。而高密度培養(yǎng)可以維持細(xì)胞的功能一段時(shí)間，但是也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞之間的相互作用受到限制，從而影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。因此，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)，需要根據(jù)實(shí)際情況選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)密度，以保證細(xì)胞的生長(zhǎng)和增值能力得到正常的發(fā)揮。立沃生物的原代肝細(xì)胞可提供不同狀態(tài)的細(xì)胞，如貼壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞等，滿足客戶基于使用場(chǎng)景的個(gè)性化需求。浙江新西蘭兔原代肝細(xì)胞圖片
目前，分離原代肝細(xì)胞的方法有直接剪切法、組織塊消化法和兩步膠原酶灌流法等。汕頭原代肝細(xì)胞培養(yǎng)方法
貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法，可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長(zhǎng)，形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點(diǎn)： 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞：從新鮮的動(dòng)物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后，需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量檢測(cè)，確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇：原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長(zhǎng)和代謝的培養(yǎng)基，常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層：為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長(zhǎng)，需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng)：將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中，加入適量的培養(yǎng)基，放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意的是，原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間較短，一般在3-5天左右，因此需要及時(shí)更換培養(yǎng)基和進(jìn)行細(xì)胞觀察。 原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)可以通過(guò)在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來(lái)達(dá)到讓原代肝細(xì)胞快速貼壁的效果。汕頭原代肝細(xì)胞培養(yǎng)方法
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