酵母雙雜交技術(shù)，自創(chuàng)建以來(lái)被廣泛應(yīng)用于蛋白互作研究領(lǐng)域，在生命科學(xué)的基礎(chǔ)探秘研究中起著重要作用。然而該技術(shù)設(shè)計(jì)初衷，*是斯坦利先生為了完成申請(qǐng)學(xué)校經(jīng)費(fèi)的目的。該技術(shù)設(shè)計(jì)巧妙，它的許多優(yōu)點(diǎn)在設(shè)計(jì)之初并未顯現(xiàn)，反而在這么多年的高頻使用和進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用過(guò)程中越發(fā)明顯。（引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay：stillfindingconnectionsafter25years”）:(1）盡管酵母雜交技術(shù)揭示了蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)的詳細(xì)信息，但操作簡(jiǎn)單。只需2個(gè)質(zhì)粒+1個(gè)菌株即可完成，且有不同體系方便選擇。（2）該技術(shù)利用比較好的DNA結(jié)合位點(diǎn)，有效的***結(jié)構(gòu)域和友好的報(bào)告基因系統(tǒng)，可以放大弱互作的信號(hào)。（3）該技術(shù)可用于各種物種的蛋白互作檢測(cè)，具有物種普適性，尤其是人類(lèi)蛋白。（4）衍生技術(shù)具有更***的應(yīng)用，可擴(kuò)展到檢測(cè)蛋白質(zhì)與DNA、蛋白質(zhì)與RNA、蛋白質(zhì)與小分子以及其他組合之間的相互作用，甚至可實(shí)現(xiàn)將生理相互作用與表型數(shù)據(jù)直接關(guān)聯(lián)。當(dāng)然，做過(guò)酵母雜交實(shí)驗(yàn)的小伙伴應(yīng)該都了解，互作結(jié)果的判斷，往往要等酵母生長(zhǎng)好幾天才能看出來(lái)（當(dāng)然，小歐認(rèn)為這在偉大的科研事業(yè)過(guò)程中算不上啥），互作強(qiáng)弱也是主觀判斷性較強(qiáng)，存在假陽(yáng)性。博士期間長(zhǎng)期從事酵母單/雙雜交文庫(kù)構(gòu)建及篩選的工作。青海運(yùn)用酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
利用酵母雙雜交技術(shù)進(jìn)行篩選，結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用，并且二者互作關(guān)系通過(guò)酵母一對(duì)一互作、BiFC、Co-IP、LCI實(shí)驗(yàn)得以驗(yàn)證（圖A-C）。利用截短的SP8進(jìn)行酵母一對(duì)一互作和Co-IP檢測(cè)表明，與OsMYC3的結(jié)合依賴于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域（圖D-E）；同樣，OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的（圖F）。酵母雙雜交、BiFC實(shí)驗(yàn)表明，OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理，野生對(duì)照株根的長(zhǎng)度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)基因表達(dá)量上升，但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關(guān)基因表達(dá)量上升減少。浙江酵母文庫(kù)領(lǐng)域不懂就問(wèn),酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)室究竟長(zhǎng)啥樣?擁有十余年豐富的文庫(kù)構(gòu)建。
酵母單雜交測(cè)試：為驗(yàn)證該文庫(kù)在Y2H和Y1H體系中的有效性，作者以O(shè)sMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)，進(jìn)行了酵母雙雜交測(cè)試。以Ghd7的啟動(dòng)子片段為誘餌，進(jìn)行了酵母單雜交測(cè)試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)可以有效且高通量的檢測(cè)蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外，該研究中指出，使用該文庫(kù)篩選鑒定蛋白-TF互作，采用mating法較為方便，即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫(kù)菌液一對(duì)一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作，采用Y1HGold系統(tǒng)，即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫(kù)質(zhì)粒更簡(jiǎn)單高效。此外，可通過(guò)降低篩選壓力處理，進(jìn)行弱相互作用的檢測(cè)。
酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn):MAPK級(jí)聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中的關(guān)鍵事件，MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子，**終響應(yīng)病原菌的侵入。WRKYs轉(zhuǎn)錄因子是MAPK級(jí)聯(lián)的重要目標(biāo)，在植物對(duì)各種病原體的抗性中起著關(guān)鍵作用。蘋(píng)果如何響應(yīng)炭疽菌入侵，將信號(hào)傳導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)，以及哪個(gè)轉(zhuǎn)錄因子負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)促進(jìn)GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋(píng)果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)由蘋(píng)果炭疽菌******誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子MdWRKY17。在6個(gè)易感蘋(píng)果種質(zhì)中，MdWRKY17表達(dá)水平***高于6個(gè)耐受蘋(píng)果種質(zhì)，同時(shí)對(duì)應(yīng)的水楊酸含量降低，證實(shí)了MdWRKY17介導(dǎo)的水楊酸降解在GLS耐受中的關(guān)鍵作用。酵母文庫(kù)篩選做文庫(kù)篩選前,首先需要檢測(cè)你的誘餌的自***活性和對(duì)酵母的毒性。
酵母雙雜交文庫(kù)：植物從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)到生殖生長(zhǎng)時(shí)相的不可逆轉(zhuǎn)變，是植物生命周期中的一個(gè)關(guān)鍵階段，是植物生存和繁殖至為關(guān)鍵的重要事件。在開(kāi)始繁殖之前，許多多年生木本植物經(jīng)歷了一個(gè)相當(dāng)漫長(zhǎng)的幼年時(shí)期。與模式植物（如擬南芥）相比，針葉樹(shù)通常具有非常長(zhǎng)的生命周期。盡管在模式植物開(kāi)花時(shí)間控制研究上取得相當(dāng)大的進(jìn)展，但對(duì)多年生樹(shù)木，特別是針葉樹(shù)年齡信號(hào)的調(diào)控機(jī)制仍知之甚少。因此，深入研究林木年齡信號(hào)對(duì)生殖發(fā)育過(guò)程的影響具有重要的理論和實(shí)踐意義。酵母雜交案例專(zhuān)業(yè)的碩博團(tuán)隊(duì)。山東技術(shù)酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
專(zhuān)業(yè)酵母文庫(kù)構(gòu)建和篩選公司進(jìn)口試劑。青海運(yùn)用酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
通過(guò)酵母雙雜篩選實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步研究AaWRKY9蛋白功能，結(jié)果篩選到了與AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白，并通過(guò)Y2H、BiFC、CoIP等進(jìn)行了驗(yàn)證確認(rèn)。JAZs是JA介導(dǎo)的植物相應(yīng)中的負(fù)向調(diào)控因子，在毛狀體和老葉中高表達(dá)，在芽尖和嫩葉中表達(dá)量低。為確認(rèn)AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促進(jìn)青蒿素積累過(guò)程中的轉(zhuǎn)錄***功能，通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)AaWRKY9與AaJAZ9共表達(dá)時(shí)，其轉(zhuǎn)錄活性被抑制，而使用MeJA處理后，這種抑制作用被抵消，且AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性增強(qiáng)，反向驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。說(shuō)明JA可以通過(guò)降解JAZ9，提高AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性，促進(jìn)青蒿素生物合成。青海運(yùn)用酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司坐落在聯(lián)航路1188號(hào)25幢，是一家專(zhuān)業(yè)的檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)。（依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目，經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)，具體經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目以相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn)）一般項(xiàng)目：生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā)，醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品（除危險(xiǎn)品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品）的研發(fā)、銷(xiāo)售，儀器儀表的銷(xiāo)售，并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)，會(huì)務(wù)服務(wù)，企業(yè)管理咨詢。公司。公司目前擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)員工，為員工提供廣闊的發(fā)展平臺(tái)與成長(zhǎng)空間，為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù)，深受員工與客戶好評(píng)。公司以誠(chéng)信為本，業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋科研服務(wù)，科研檢測(cè)，學(xué)術(shù)研究，技術(shù)咨詢，我們本著對(duì)客戶負(fù)責(zé)，對(duì)員工負(fù)責(zé)，更是對(duì)公司發(fā)展負(fù)責(zé)的態(tài)度，爭(zhēng)取做到讓每位客戶滿意。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德，樹(shù)立了良好的科研服務(wù)，科研檢測(cè)，學(xué)術(shù)研究，技術(shù)咨詢形象，贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可。