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鈣成像技術通常使用熒光染料或報告基因來標記細胞中的鈣離子。當細胞受到外界刺激時,鈣離子會進入細胞內,導致熒光染料或報告基因發(fā)出光信號。通過觀察光信號的強度和分布,可以推斷出鈣離子的濃度和分布情況。鈣成像技術具有以下優(yōu)點:高靈敏度:可以檢測到細胞內微小的鈣離子濃度變化。實時性:可以實時記錄鈣離子濃度的變化過程??臻g分辨率高:可以清晰地觀察到鈣離子在細胞內的分布情況。無創(chuàng)性:可以通過huo體成像技術觀察動物體內的鈣離子變化情況??芍貜托裕嚎梢詫ν蝗后w細胞進行多次成像,以評估不同處理或刺激的影響??傊?,鈣成像技術是一種強大的生物醫(yī)學研究工具,可以幫助科學家們更好地了解細胞生理和病理狀態(tài),為疾病診斷和zhi療提供有力支持。鈣成像技術發(fā)現(xiàn)鈣離子產生各種各樣的胞內信號。寧波神經元鈣成像nVoke
可見光激發(fā)Ca2+熒光探針:與紫外光激發(fā)探針相比,可見光激發(fā)Ca2+探針具有更強的染料吸收性能,對Ca2+變化水平檢測敏感度也更高,能夠降低對活細胞的光毒性和樣品自發(fā)熒光以及光散射的干擾,且無光譜偏移。較常使用的可見光激發(fā)Ca2+熒光探針有Fluo-3,F(xiàn)luo-4,Rhod-2等,同時他們也都是非比率型指示劑。Fluo-3是較常用的可見光激發(fā)Ca2+熒光指示劑之一,是典型的的單波長指示劑,比較大激發(fā)波長為506nm,比較大發(fā)射波長為526nm。它與Ca2+結合之前幾乎無熒光,結合后熒光會增加60至100倍,從而避免了細胞自身的熒光干擾。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488nm左右,發(fā)射波長為525~530nm(圖3)。Fluo-3可以用在激光共聚焦顯微成像或流式細胞儀中。它還有一個升級版本Fluo-4,在相同Ca2+濃度下信號更強。上海細胞鈣離子鈣成像動物行為學功能鈣成像技術是將外源性熒光信號和生理現(xiàn)象耦合起來,通過熒光染料信號的改變反映細。
隨著功能光學成像技術的發(fā)展,神經學家們已經可以研究腦區(qū)和神經元內部的工作情況。功能鈣成像技術就是其中之一,其主要原理是將外源性熒光信號和生理現(xiàn)象耦合起來——通過熒光染料信號的改變反映細胞內游離鈣離子濃度,以此表示細胞的功能狀態(tài)。目前它被廣泛應用于實時監(jiān)測一群相關神經元內鈣離子的變化,從而判斷其功能活動。該技術的出現(xiàn)使得科學家可以親眼目睹神經信號在神經網絡之中時間和空間上的傳遞穿梭。功能光學成像技術的發(fā)展使研究腦區(qū)和神經元的內部工作成為可能。
CaMPARI,一種能夠兼顧全局和微觀的新型鈣成像技術,包含CaMPARI以及CaMPARI2(第二代)。其原理在于,CaMPARI蛋白在正常狀態(tài)下會發(fā)出綠色熒光,而如果對這種蛋白同時使用高濃度鈣離子與紫外光處理,它就會不可逆、長久地轉變成另一種能發(fā)出紅色熒光的構象,即實現(xiàn)將瞬間的神經元活動變成長久的紅色熒光蛋白表達。研究人員通過轉基因技術將這種新型蛋白導入到實驗動物的神經系統(tǒng)中,然后用度的紫外光照射動物的大腦,通過檢查熒光,找到發(fā)紅色熒光的神經元,這些神經元即是在紫外光照射期間活躍的神經元。由于紫外光可以對著整個大腦進行照射,所以理論上,人們可以對全腦進行檢查。鈣離子成像可以用于感知覺,學習記憶,社會性行為等各種各樣的研究中。
鈣離子成像技術(Calciumimaging)是指利用鈣離子指示劑監(jiān)測組織內鈣離子濃度的方法,常用于神經系統(tǒng)的研究,指示神經元內鈣離子的變化,提示神經元活動。其原理在于借助鈣離子濃度與神經元活動之間的嚴格對應關系,利用特殊的熒光染料或者蛋白質熒光探針(鈣離子指示劑,<spanlang=EN-US>Calciumindicator),將神經元中鈣離子的濃度通過熒光強度表現(xiàn)出來,并被顯微鏡捕捉,從而達到監(jiān)測神經元活動的目的。鈣離子在神經元功能中起著重要的作用:它們作為細胞內的信號可觸發(fā)響應,如改變基因表達和突觸囊泡中神經遞質的釋放。由于細胞內有離子泵在各種信號刺激下選擇性地運輸這些離子,胞內鈣濃度是高度動態(tài)的。鈣成像利用鈣離子流的優(yōu)勢,在活神經細胞上直接可視化鈣信號。鈣成像技術的不斷進步,使得人們對神經科學領域有了進一步的拓展。重慶神經元鈣成像價格多少
鈣成像系統(tǒng)支持聯(lián)網,基于網絡的軟件可讓您隨時隨地監(jiān)控數據。寧波神經元鈣成像nVoke
雙光子顯微成像技術是近些年發(fā)展起來的結合了共聚焦激光掃描顯微鏡和雙光子激發(fā)技術的一種新型非線性光學成像方法,采用長波激發(fā),能對組織進行深層次成像。常用的比較好激發(fā)波長大多位于800-900nm,而水、血液和固有組織發(fā)色團對這個波段的光吸收率低,此外散射的激發(fā)光子不能激發(fā)樣品,因此背景第,光損傷小,適用于在體檢測。雙光子熒光成像技術能準確定位細胞內置入的微電極位置,從而觀察胞體、樹突甚至單個樹突棘的活性。研究者可完整的觀察神經組織的gaofen辨熒光圖像,甚至可以分辨神經細胞單個樹突棘中的鈣分布。寧波神經元鈣成像nVoke