斑馬魚(zebrafish)是一種用于生物學(xué)研究的模式生物。它們在多種方面都被用于研究,包含發(fā)育、遺傳、生理和行為等。其間一個常用的研究辦法是運用多孔板試驗,它可以用來測驗斑馬魚幼魚的行為和認(rèn)知才能。多孔板試驗是一種基于水迷宮的試驗,通常由一個容器、一個多孔板和一些食物組成。試驗的過程中,斑馬魚幼魚被放置在容器中,并被要求經(jīng)過多孔板來取得食物獎賞。試驗的目的是測驗斑馬魚幼魚的學(xué)習(xí)和記憶才能,以及其對環(huán)境的認(rèn)知才能。斑馬魚實驗在中藥抗ancer研究中發(fā)揮重要作用,幫助篩選新的醫(yī)療靶點和潛在醫(yī)療藥物。山西斑馬魚實驗文獻(xiàn)
當(dāng)各種內(nèi)源性和外源性DNA損害因子誘發(fā)細(xì)胞DNA鏈斷裂時,其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞,在細(xì)胞裂解液作用下,細(xì)胞膜、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞,細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、RNA以及其他成分均擴散到細(xì)胞裂解液中,而核DNA因為分子量太大只能留在原位。在中性條件下,DNA可進入凝膠發(fā)生搬遷,而在堿性電解質(zhì)的作用下,DNA發(fā)生解螺旋,損害的DNA斷鏈及片段被釋放出來。因為這些DNA的分子量小且堿變性為單鏈,所以在電泳過程中帶負(fù)電荷的DNA會離開核DNA向正極搬遷構(gòu)成“彗星”狀圖像,而未受損害的DNA部分保持球形。DNA受損越嚴(yán)重,發(fā)生的斷鏈和斷片越多,長度也越小,在相同的電泳條件下搬遷的DNA量就愈多,搬遷的距離就愈長。通過測定DNA搬遷部分的光密度或搬遷長度就可以測定單個細(xì)胞DNA損害程度,然后確認(rèn)受試物的作用劑量與DNA損害效應(yīng)的聯(lián)系。彗星試驗檢測低濃度基因毒物具有高靈敏性,研究的細(xì)胞不需處于有絲分裂期。一起,這種技術(shù)只需要少數(shù)細(xì)胞。四川斑馬魚實驗公司你不知道的水中小白鼠:斑馬魚,正在默默為科學(xué)試驗奉獻(xiàn)!
斑馬魚的皮膚結(jié)構(gòu)和功用與人類高度類似,含有基底層、棘層、顆粒層、通明層和表皮角質(zhì)細(xì)胞層。因而,業(yè)內(nèi)普遍認(rèn)為以斑馬魚胚胎為試驗基礎(chǔ)的結(jié)果,在一般情況下適用于人體,可對化妝品功效宣稱進行檢測評價,例如抗氧化、抗糖基化、抗老、淡斑亮膚等等。依據(jù)已存案成功的案例顯示,若不包含前期準(zhǔn)備的時間,只是上樣檢測到出具結(jié)果,斑馬魚檢測的周期要比其他檢測方式周期更短且本錢更低。另外,依據(jù)歐盟動物保護法,出生5天以內(nèi)的斑馬魚胚胎和幼魚不屬于動物,能夠代替哺乳動物測試,契合3R(代替、減少、優(yōu)化)原則。因而,斑馬魚檢測在動物福利層面也契合了年代潮流。
Openfieldtest(曠場試驗)為了探究運動和自發(fā)活動,我們描繪了魚的行為當(dāng)它們在Plexiglasopen-fieldapparatus(裝置、設(shè)備、儀器)中自在探究時(直徑20厘米;高10厘米)(圖1a)。魚別離轉(zhuǎn)移到魚缸中10分鐘;8分鐘內(nèi)的軌道由頂部視圖攝像機記錄下來進行分析。在試驗過程中,測量了受試者在中心和邊緣區(qū)域花費的時刻、移動的總間隔(cm)和平均速度(cm/s)。2、Noveltanktest(新型水槽測驗)本發(fā)明公開了一種通明的1.5升梯形水槽檢測裝置(15.2×27.9×22.5×7.2cm;高×上底×下底×寬)(圖1c)。魚在早上(9:00)或晚上(21:00)被放在這個水槽里10分鐘。8分鐘記錄他們的行為軌道。為了進行軌道分析,新型水槽實際上被分為三個水平段(上、中、下)。斑馬魚胚胎發(fā)育透明,便于觀察和研究,是斑馬魚實驗的一大優(yōu)勢。
在藥物代謝動力學(xué)研究方面,斑馬魚幼魚展現(xiàn)出獨特優(yōu)勢。其肝臟代謝酶(如CYP3A65)與人類CYP3A4同源性達(dá)76%,且腸道屏障功能尚未完全建立,使得藥物吸收、分布、代謝過程可視化。瑞士諾華公司通過LC-MS/MS技術(shù)檢測斑馬魚幼魚體內(nèi)藥物濃度,發(fā)現(xiàn)某新型kang生素的生物利用度較傳統(tǒng)模型預(yù)測值高18%,該差異源于斑馬魚腸道中特異性轉(zhuǎn)運蛋白的表達(dá)差異。這一發(fā)現(xiàn)促使藥物劑型設(shè)計優(yōu)化,使候選藥物在II期臨床試驗中的療效提升30%。斑馬魚在中藥毒性研究中的應(yīng)用日益寬泛。中國中醫(yī)科學(xué)院團隊通過斑馬魚胚胎熱休克蛋白(Hsp70)啟動子驅(qū)動熒光報告基因,構(gòu)建了中藥肝毒性的實時監(jiān)測系統(tǒng)。實驗顯示,含馬兜鈴酸的中藥復(fù)方可使斑馬魚胚胎肝臟區(qū)域熒光強度在24小時內(nèi)增加5倍,而傳統(tǒng)生化檢測需72小時才能達(dá)到相同靈敏度。該技術(shù)已應(yīng)用于中藥材質(zhì)量控制,成功識別出多批次含微量腎毒性成分的飲片,為中藥國際化提供了科學(xué)依據(jù)。斑馬魚幼魚孔板實驗需嚴(yán)格控制溫度、光照及水質(zhì),確保實驗數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。陜西斑馬魚實驗用途
斑馬魚實驗遵循 3R 原則,優(yōu)化實驗設(shè)計減少動物使用數(shù)量。山西斑馬魚實驗文獻(xiàn)
斑馬魚在衰老研究中的應(yīng)用亦取得重大突破。新加坡國立大學(xué)團隊通過連續(xù)多代斑馬魚繁殖實驗,發(fā)現(xiàn)子代胚胎的DNA甲基化水平與親代年齡呈正相關(guān),且這種表觀遺傳記憶可通過飲食干預(yù)部分逆轉(zhuǎn)。通過構(gòu)建端粒酶突變斑馬魚品系,發(fā)現(xiàn)端??s短導(dǎo)致干細(xì)胞功能衰退,進而引發(fā)多organ衰老表型。更關(guān)鍵的是,通過補充NAD+前體(NMN),可使突變體斑馬魚的壽命延長20%,并改善其運動能力和認(rèn)知功能。這些發(fā)現(xiàn)為開發(fā)抑衰老藥物提供了跨物種驗證模型。山西斑馬魚實驗文獻(xiàn)