培養(yǎng)基成分均勻性保障措施:制備后培養(yǎng)基出現(xiàn)沉淀或濃度分層,主要與混合工藝相關(guān)。對于高粘度溶液,建議采用漸進式升溫策略:40℃預(yù)混30分鐘后再升至滅菌溫度。磁力攪拌設(shè)備需注意:當(dāng)液體粘度>500cP時,應(yīng)更換為錨式攪拌槳并降低轉(zhuǎn)速至80-100rpm。自動化設(shè)備應(yīng)驗證"脈沖攪拌"功能的有效性(即每5分鐘反向旋轉(zhuǎn)10秒)。關(guān)鍵質(zhì)量控制點包括:pH值探頭每月用標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn);導(dǎo)電率儀需定期去除電極鉑黑層;天平稱量模塊應(yīng)避免振動干擾,每年由計量部門檢定。門鎖采用氣動密封,需壓力降至-10kPa后方可手動開啟。安徽自動攪拌培養(yǎng)基制備儀
固體斜面培養(yǎng)基配制:培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正:因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進行PH的初步調(diào)正.培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備儀報價可連接電腦導(dǎo)出數(shù)據(jù),便于實驗記錄分析。
培養(yǎng)基的使用:1.瓊脂培養(yǎng)基的融化:將培養(yǎng)基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經(jīng)過高壓滅菌的培養(yǎng)基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養(yǎng)基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發(fā)生破裂。融化后的培養(yǎng)基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養(yǎng)基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內(nèi)培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養(yǎng)基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養(yǎng)基,應(yīng)根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),縮短融化后放置的時間。
培養(yǎng)基制備儀:培養(yǎng)基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個步驟:用水、稱量、溶解復(fù)水、滅菌、pH測定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經(jīng)消毒過后的無菌水。2、培養(yǎng)基進行復(fù)水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長。3、容器的體積須大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍,預(yù)防出現(xiàn)溢出情況。4、在對培養(yǎng)基進行加熱時,若培養(yǎng)基內(nèi)含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進行攪拌防止出現(xiàn)培養(yǎng)基結(jié)底炭化從而造成成分損害。部分培養(yǎng)基則需要使用沸水進行加熱,預(yù)防發(fā)生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養(yǎng)基進行再融化時應(yīng)使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應(yīng)棄去。6、而當(dāng)對培養(yǎng)基實施滅菌時,需嚴(yán)格按照說明規(guī)范操作。但是也不能盲目按照說明的時間進行,需結(jié)合實際情況,合理調(diào)節(jié)滅菌時間,防止出現(xiàn)培養(yǎng)基滅菌過度而造成的成分變性。
實時監(jiān)控功能讓制備過程更透明可控。
培養(yǎng)基的制備:正確制備培養(yǎng)基時微生物檢驗的較基礎(chǔ)步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應(yīng)遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關(guān)數(shù)據(jù),如質(zhì)量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時,應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,記錄所有細節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。
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培養(yǎng)基制備儀是現(xiàn)代化實驗室的重要工具之一。安徽自動攪拌培養(yǎng)基制備儀
配制培養(yǎng)基需要哪些制備:(1)稱出規(guī)定數(shù)量的瓊脂和蔗糖,加水直到培養(yǎng)基較終容積的34,加熱溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養(yǎng)基(不加瓊脂)時無需加熱。(2)按需要加入一定量的各種貯存母液,包括生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要,培養(yǎng)基中所需的維生素,可在高壓滅菌之后通過減壓過濾裝置或微孔過濾器滅菌后再加入。(3)蒸餾水定容。充分混合后調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,一般以5.66.0為好。(4)培養(yǎng)基分裝,分裝量一般以占培養(yǎng)容器的1514為宜。之后在24h內(nèi)完成高壓滅菌,也可以高壓滅菌后再進行培養(yǎng)基的無菌分裝,室溫下存放備用。暫時不用的培養(yǎng)基應(yīng)放置于10攝氏度下保存,而含有生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)基在45攝氏度保存更佳。
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