1993年,美國(guó)科學(xué)家Mulis眾望所歸地獲得了諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng),他所取得的成就是發(fā)明了PCR技術(shù)。PCR,中文譯為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),其實(shí)是一種DNA的快速擴(kuò)增技術(shù),其擴(kuò)增效率之高就象核裂變的“鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”那樣。PCR技術(shù)通過兩個(gè)短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用,可以在3個(gè)小時(shí)內(nèi)把特定的DNA量提高1000萬倍。這種技術(shù)一問世,立刻引起了分子生物學(xué)研究的一場(chǎng)**,人們利用這種轟動(dòng)全世界的技術(shù)很快就把微觀領(lǐng)域的生物學(xué)研究地往前推了一步??梢赃@么說,PCR技術(shù)使分子生物學(xué)研究一下子獲得了突破,而且隨著PCR技術(shù)的日趨完善,PCR在人類社會(huì)生活中的應(yīng)用也越來越。比如說在“DNA指紋”中我們提到,科學(xué)家們只需要一根頭發(fā)甚至一個(gè)細(xì)胞就可以完成DNA指紋的鑒定工作,這里實(shí)際上就要采用PCR技術(shù),因?yàn)橐粋€(gè)細(xì)胞中的DNA含量實(shí)在太少了,人們根本不可能檢測(cè)到它的指紋;有了PCR技術(shù)就好辦了,通過PCR技術(shù)把這個(gè)細(xì)胞中的DN斷擴(kuò)增1000萬倍,這樣DNA量就足夠作指紋鑒定了。再比如,在醫(yī)院里檢驗(yàn)血液中的某種病毒,有時(shí)病毒量極少(例如病毒攜帶者),通過傳統(tǒng)的檢查方法費(fèi)力又費(fèi)時(shí),這時(shí)PCR技術(shù)也許就可以幫上忙。可以先選定這種病毒DNA上的一段DNA,設(shè)計(jì)合適的引物DNA。 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種用于放大擴(kuò)增特定DNA的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制.上海力康基因擴(kuò)增PCR儀價(jià)格便宜
它能降解特異性熒光記探針,因此使得間接的檢測(cè)PCR產(chǎn)物成為可能。(2)此后熒光雙標(biāo)記探針的運(yùn)用使在一密閉的反應(yīng)管中能實(shí)時(shí)地監(jiān)測(cè)反應(yīng)全過程。這兩個(gè)發(fā)現(xiàn)的結(jié)合以及相應(yīng)的儀器和試劑的商品化發(fā)展導(dǎo)致real-timeQ-PCR方法在研究工作中的運(yùn)用。PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)方式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)方式生成模板,從而進(jìn)入平臺(tái)期。在傳統(tǒng)的PCR中,常用凝膠電泳分離并用熒光染色來檢測(cè)PCR反應(yīng)的終擴(kuò)增產(chǎn)物,因此用此終點(diǎn)法對(duì)PCR產(chǎn)物定量存在不可靠之處。在real-timeQ-PCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)和連續(xù)地分析擴(kuò)增相關(guān)的熒光信號(hào),隨著反應(yīng)時(shí)間的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)的變化可以繪制成一條曲線。在PCR反應(yīng)早期,產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數(shù)期、線性期和終的平臺(tái)期,因此可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點(diǎn)上來檢測(cè)PCR產(chǎn)物的量,并且由此來推斷模板初的含量。為了便于對(duì)所檢測(cè)樣本進(jìn)行比較,在real-timeQ-PCR反應(yīng)的指數(shù)期,首先需設(shè)定一定熒光信號(hào)的域值,一般這個(gè)域值(threshold)是以PCR反應(yīng)的前15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)作為熒光本底信號(hào)(baseline)。 上海國(guó)產(chǎn)PCR儀廠家直銷價(jià)實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀主要應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等。
PCR基因擴(kuò)增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機(jī)體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,其根本變化在于遺傳物質(zhì)。地中海貧血(Thalassemia)是一種遺傳性慢性溶血性貧血病,是世界上常見且發(fā)病比高的一種單基因遺傳病。在兩廣、貴州、四川等地發(fā)病率較高,在廣西等地高達(dá)15%。地中海貧血是由于基因突變?cè)斐芍榈鞍椎牟黄胶猓菇Y(jié)構(gòu)正常的肽鏈合成量減少甚至沒有合成表現(xiàn)為溶血性貧血。接受累基因種類分為α、β、γ等,其中以α、β地貧為常見,危害了大。珠蛋白基因簇位于人6號(hào)染色短臂上,有兩個(gè)重復(fù)基因基因位于α1、α2、兩個(gè)α基因及其旁側(cè)序列有很大的同源性,易出現(xiàn)染色體不等交換,導(dǎo)致α基因缺失-α地貧。α地貧基因部分缺失有α1基因部分缺失、α2基因缺失、α1及α2基因同時(shí)缺失及非缺失型地貧??梢詰?yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增α1、α2基因從而檢測(cè)這些基因是否缺失、突變等,從而對(duì)α型地中海貧血作出診斷。β地中海貧血基因缺陷主要表現(xiàn)為基因序列中單一核苷酸的突變,或少數(shù)堿基的缺失、插入,使正常β珠蛋白肽鏈合成減注或缺失。應(yīng)用位點(diǎn)特異性寡核苷探針(Aso)進(jìn)行PCR產(chǎn)物斑點(diǎn)雜交即可對(duì)其作出診斷。
熒光定量PCR儀因操作方便、運(yùn)行速度快、實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,受到越來越多的分子生物學(xué)研究者青睞。在實(shí)驗(yàn)技術(shù)成熟的現(xiàn)今,難得不是實(shí)驗(yàn)技術(shù)上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實(shí)驗(yàn)室成員的意見、分析實(shí)驗(yàn)室目前乃至將來的需求、平衡實(shí)驗(yàn)室的預(yù)算,更要詳細(xì)研究各種極富誘惑力的宣傳資料。面對(duì)各種不同性能的產(chǎn)品,您又該如何選擇呢?首先建議大家走出認(rèn)識(shí)熒光定量PCR的兩個(gè)誤區(qū):誤區(qū)一:儀器通道越多越好隨著PCR技術(shù)的成熟運(yùn)用,多重?cái)U(kuò)增越來越熱鬧,熒光定量PCR儀也不能幸免。在使用有些廠家5通道的熒光定量?jī)x時(shí),為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確性和準(zhǔn)確性都要在實(shí)驗(yàn)中使用ROX(一種熒光染料)或Referencedye,這些熒光染料都必須單獨(dú)使用一個(gè)檢測(cè)通道。這樣以來,真正能檢測(cè)多重PCR熒光信號(hào)的有效通道只有4個(gè),而且使用校正染料可能會(huì)增加后期的使用成本??紤]多重?zé)晒舛縋CR的通道數(shù)的時(shí)候也應(yīng)該從實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況出發(fā),多重PCR并非人人適用、人人可用,因?yàn)樗箤?shí)驗(yàn)復(fù)雜化了。誤區(qū)二:real-timePCR儀無需梯度功能對(duì)于使用染料法的定量PCR反應(yīng),雖然有各種各樣的PCR引物設(shè)計(jì)軟件或者經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算熔解溫度(Tm值),但運(yùn)用的公式不同、引物序列不同。PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物.
3).無創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細(xì)胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及。而有效的無創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以100%的檢測(cè)出HBB基因突變[3],可以說是相當(dāng)厲害了。Nacia數(shù)字PCRNaica數(shù)字PCR系統(tǒng)——簡(jiǎn)便、快速地完成3通道檢測(cè)Naica數(shù)字PCR系統(tǒng)是法國(guó)Stilla公司開發(fā)的下一代核酸定量技術(shù)。使用cutting-edge微流體創(chuàng)新型芯片——Sapphire芯片作為數(shù)字PCR過程的耗材。樣品通過毛細(xì)通道網(wǎng)格以30,000個(gè)微滴的形式進(jìn)入2D芯片中,可稱作Crystal微滴。Naica數(shù)字PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)在芯片上實(shí)現(xiàn)。對(duì)微滴成像用以檢測(cè)包含擴(kuò)增片段的微滴。一步是對(duì)陽性微滴計(jì)數(shù)從而得到的核酸數(shù)量。Naica數(shù)字PCR,結(jié)合了強(qiáng)大的圖像分析技術(shù)和直觀可視的檢測(cè)功能,從而達(dá)到了數(shù)字PCR定量的置信水平,獲得的數(shù)據(jù)真實(shí)可信。 PCR的三個(gè)反應(yīng)(變性-退火-延伸)0步驟反復(fù)進(jìn)行,使DNA擴(kuò)增量呈指數(shù)上升。國(guó)產(chǎn)品牌PCR儀廠家供應(yīng)
而核酸檢測(cè)方法中,PCR儀無疑是本次臨床檢測(cè)的關(guān)鍵利器。上海力康基因擴(kuò)增PCR儀價(jià)格便宜
力康GM05智能梯度基因擴(kuò)增儀(控溫儀)性能特點(diǎn):高清晰超大7寸液晶顯示屏-可選鍍金/鍍銀模塊,提高熱傳導(dǎo)效率,使實(shí)驗(yàn)更高效;方便靈活的模塊更換裝置,輕松更換模塊;熱蓋旋鈕無級(jí)可調(diào),適用各型號(hào)試管;樣品座工作區(qū)域全密閉設(shè)計(jì),可確保低溫保存干燥清潔;可任意角度定位熱蓋;具備斷電記憶功能;環(huán)境溫度自動(dòng)讀取,自動(dòng)修正溫控誤差;支持用戶實(shí)驗(yàn)預(yù)約設(shè)定,鬧鐘提醒功能;支持程序搜索功能,支持常用程序優(yōu)先選擇功能;支持多重嵌套循環(huán);支持梯度PCR、TouchdownPCR、LongPCR設(shè)定;可外接移動(dòng)硬盤和鼠標(biāo),支持觸摸和鼠標(biāo)操作;可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程故障判斷;具有TM值計(jì)算功能,可更好地幫助用戶進(jìn)行引物設(shè)計(jì);可單獨(dú)配備PC機(jī)操作軟件,PC機(jī)與主機(jī)可分別各自控制,并實(shí)現(xiàn)一機(jī)多控。上海力康基因擴(kuò)增PCR儀價(jià)格便宜
力新儀器(上海)有限公司是一家三類:6815注射穿刺器械,6821醫(yī)用電子儀器設(shè)備(不含植入類重點(diǎn)監(jiān)管),6822醫(yī)用光學(xué)器具、儀器及內(nèi)窺鏡設(shè)備(不含植入類重點(diǎn)監(jiān)管),6823醫(yī)用超聲儀器及有關(guān)設(shè)備,6824醫(yī)用激光儀器設(shè)備,6825醫(yī)用高頻儀器設(shè)備,6826物理***及康復(fù)設(shè)備,6828醫(yī)用磁共振設(shè)備,6830醫(yī)用x射線設(shè)備,6832醫(yī)用高能射線設(shè)備,6833醫(yī)用核素設(shè)備,6845體外循環(huán)及血液處理 設(shè)備,6854手術(shù)室、急救室、診療室設(shè)備及器具,6858醫(yī)用冷療、低溫、冷藏設(shè)備及器具,6864醫(yī)用衛(wèi)生材料及敷料,6866醫(yī)用高分子材料及制品(不含重點(diǎn)監(jiān)管),6870軟件,6877介入器材(不含重點(diǎn)監(jiān)管)***的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠(chéng)實(shí)可信的企業(yè)。公司自創(chuàng)立以來,投身于數(shù)字化手術(shù)室,實(shí)驗(yàn)室儀器,新生兒科設(shè)備,ICU重癥產(chǎn)品,是醫(yī)藥健康的主力軍。力新儀器致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對(duì)用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗(yàn)。力新儀器始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時(shí)代,對(duì)自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使力新儀器在行業(yè)的從容而自信。