血清是細胞培養(yǎng)過程中常用的生物試劑,市面上有很多種類的血清,現(xiàn)在就來給大家介紹其中的一款——透析胎牛血清。透析胎牛血清是采用透析的方法,過濾去除10KDa以下的小分子(如氨基酸、核苷:次黃嘌呤和胸腺核苷等、膽固醇等),而保留血清中的大分子成分,因而可用于一些特定的細胞實驗,比如:需要避免細胞培養(yǎng)基中一些小分子干擾的實驗。使用放射性標記小分子,對生物合成過程進行監(jiān)測,以研究蛋白質等大分子的生化性質、合成、加工、細胞內傳送、分泌和降解過程。這時,常將細胞放在含有充足養(yǎng)分和放射性標記氨基酸(如35S標記的蛋氨酸或半胱氨酸)的培養(yǎng)液中進行標記。為避免外源未標記的氨基酸的干擾,這時所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基礎培養(yǎng)基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。由于胎牛血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間。江蘇食蟹猴血清
胎牛血清特點:采集方法:通過密閉系統(tǒng)收集法保證血清質量,保證低內有害元素、低血紅蛋白過濾方法:通常采用3個連續(xù)的100nm孔徑的過濾器過濾檢測體系:每批產品均經過嚴格的細菌、支原體、病毒、內有害元素、血紅蛋白等檢測。胎牛血清功能及作用:牛血清是細胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必需的營養(yǎng)成分,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的元素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他元素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到消毒作用。海門DMEM 培養(yǎng)基(高糖,無酚紅)胎牛血清可以起到緩解酸堿度的作用,目前這方面的作用已經得到了證實。
血清中出現(xiàn)沉淀的原因很多:反復的凍融會使血清脂蛋白發(fā)生變性造成渾濁,可通過分裝成單次用量減少凍融來盡量避免此種情況。血清是在低溫環(huán)境下迅速加工以保持其生長特性,血清中遺留的一些纖維蛋白原在解凍時會轉化成纖維蛋白。過量的纖維蛋白在血清中呈現(xiàn)為可見的絮狀物質,可通過400xg離心移除。不建議通過過濾血清來移除絮狀物質,因為濾器可能堵塞,或者意外截留到重要的蛋白質。牛血清產品檢測項目包括內有害元素、細菌、菌體、霉菌、支原體和噬菌體檢測嗎?胎牛血清采用非常嚴謹?shù)臉藴蕶z測過這些相關微生物的污染,具體可以參加每批次的CoA。什么是γ輻照的血清(胎牛血清)?γ輻照的血清通過暴露于放射性60Co產生的25-40kGy劑量的γ射線來滅活病毒和其他外來微生物(比如支原體)。γ輻照處理不影響血清的理化性質或細胞培養(yǎng)性能。
我們都知道干細胞是十分脆弱的,培養(yǎng)干細胞大多使用胎牛血清來完成實驗。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質更高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分更少。優(yōu)良的胎牛血清不僅為細胞提供細胞生產提供不可替代的營養(yǎng)成分,也會讓細胞培養(yǎng)實驗更輕松。提供細胞生長所需的天然元素或天然的生長因子。提供天然的結合蛋白,能識別氨基酸、脂質、金屬離子和元素等,能結合并調節(jié)它們的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多個鈣離子結合位點,因而能調節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。胎牛血清嚴格QC標準進行微生物、有害元素、血紅蛋白、IgG含量等多項檢測。
胎牛血清(FBS)用作真核細胞體外細胞培養(yǎng)的生長補充劑。動物血清(牛血清和非牛血清)都用于細胞培養(yǎng),其中使用更普遍的是胎牛血清(FBS)。FBS含有生長因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細胞培養(yǎng)應用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質,電解質,脂質,碳水化合物,元素,酶和其他未定義的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對于支持細胞生長都是必需的。制造環(huán)境中的學術和工業(yè)研究人員以及科學家都在其細胞培養(yǎng)基中使用胎牛血清(FBS)進行調查,包括生物技術研究/生產,疫苗制造,克隆和動物診斷。胎牛血清是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。丹陽RPMI 1640 Medium (含雙抗)
胎牛血清含有豐富的細胞生長必需的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng)。江蘇食蟹猴血清
血清和血漿均來自全血,通過離心去除包括紅細胞在內的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于,凝血蛋白存在于血漿中,但已從血清中去除。血漿一般是通過在離心前向血液中加入抗凝劑來制備的,但不會去除凝血蛋白。通過在離心前使血液凝固或通過普遍/漸進離心來制備血清。因此,與凝血相關的纖維蛋白原和蛋白質不存在于血清中。在人類中,以下22種蛋白質占血清和血漿總蛋白質含量的99%:白蛋白、總IgG、轉鐵蛋白、纖維蛋白原、總IgA、α-2-巨球蛋白、總IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3補體、結合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、載脂蛋白-B、載脂蛋白-A1、脂蛋白(a)、因子H、銅藍蛋白、C4補體、補體因子B、前白蛋白、C9補體、C1q補體和C8補體。剩下的1%包括數(shù)百種蛋白質。更豐富的血清蛋白白蛋白,濃度為50mg/ml,約占總蛋白質量的一半。江蘇食蟹猴血清
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