什么是優(yōu)良的胎牛血清?免疫球蛋白,國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出采集血液的時(shí)的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。維生素含量,此外,維生素的使用也是要考慮在內(nèi)的。國內(nèi)外的血清,都不對維生素進(jìn)行測試(無四環(huán)素胎牛血清理外)。其中,由于國外維生素使用較為嚴(yán)格,用量有限,同時(shí)每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以追溯源頭,所以國外胎牛血清不含維生素或者含量極低。但是國內(nèi)由于維生素使用普遍,血清中殘留量很高,導(dǎo)致國產(chǎn)血清質(zhì)量很差,不利于細(xì)胞培養(yǎng)。胎牛血里的生長因子適合牛體內(nèi)各種細(xì)胞生長,通常在8個(gè)月胎齡后慢慢消失。瑞安Biochannel培養(yǎng)基
如何解凍血清?血清應(yīng)該在2-8°C過夜解凍以避免降解,或者在室溫條件下,定期輕輕搖動使組分重懸。解凍的血清在加入細(xì)胞培養(yǎng)基前應(yīng)該混合均勻。由于反復(fù)凍存會嚴(yán)重影響血清品質(zhì),建議將解凍的血清分裝成單次使用量,并凍存于-20°C。如果儲存于2-8°C,應(yīng)該在2-4周使用。溫度超過37°C時(shí)會降解營養(yǎng)成分,破壞血清功能。如果血清收到時(shí)存在部分解凍,還能繼續(xù)使用嗎?血清是干冰包裝運(yùn)輸,到達(dá)時(shí)應(yīng)該是冷凍狀態(tài)。但是,如果由于運(yùn)輸時(shí)間超期導(dǎo)致部分解凍,依然可以繼續(xù)使用。完全解凍后分裝成單次用量進(jìn)行凍存。血清產(chǎn)品的保質(zhì)期是多久?大部分血清產(chǎn)品,在未開封凍存的情況下生產(chǎn)之日起5年,具體可參考瓶身或CoA上的信息。DMEM(高糖)培養(yǎng)基(含雙抗)供應(yīng)報(bào)價(jià)真正的胎牛血清凝血功容易破裂。
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的元素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物;提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他元素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力;有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到消毒作用;是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源;起酸堿度緩沖液作用;提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
胎牛血清(FetalBovineSerum,F(xiàn)BS)是一種取自牛胚胎的血清,常用于配置動物細(xì)胞的培養(yǎng)基。胎牛血清中含有生長因子等蛋白質(zhì),且抗體含量少。細(xì)胞生物學(xué)的研究人員通常會在培養(yǎng)基中加入一定比例的胎牛血清,以幫助維持體外培養(yǎng)(invitro)的細(xì)胞的存活。但胎牛血清的組成復(fù)雜多變,研究人員一般將其視作成分不明的混合物,認(rèn)為其可能增加實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不確定性。如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時(shí)間儲存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。胎牛血清可提供γ射線輻照處理的血清現(xiàn)貨,滅活病毒和其他外來微生物。
胎牛血清保存方法:1、需要長期保存的澳洲牛血清,例如澳洲南美胎牛血清,必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會被破壞,而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)澳洲牛血清有懸浮物,例如澳洲北美胎牛血清中發(fā)現(xiàn)有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。無合格質(zhì)檢的胎牛血清存在支原體、病毒等污染,這對細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果會造成嚴(yán)重不良影響。DMEM(高糖)培養(yǎng)基(含雙抗)供應(yīng)報(bào)價(jià)
胎牛血清是營養(yǎng)和能量來源;生長和粘附因子;肽和類固醇元素;載體蛋白。瑞安Biochannel培養(yǎng)基
為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清?胎兒血清含有較多的生長因子,丙種球蛋白(即抗體)含量較低,非胎兒血清也有。這些很重要,因?yàn)樯L因子促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖,而抗體可以與培養(yǎng)的細(xì)胞結(jié)合。此外,與成人或新生兒相比,胎兒血清中的補(bǔ)體蛋白(補(bǔ)體)含量較低。這些補(bǔ)體具有溶解培養(yǎng)細(xì)胞和干擾免疫測定的不良作用。血清和血漿均來自全血,通過離心去除包括紅細(xì)胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于,凝血蛋白存在于血漿中,但已從血清中去除。血漿一般是通過在離心前向血液中加入抗凝劑來制備的,但不會去除凝血蛋白。通過在離心前使血液凝固或通過普遍/漸進(jìn)離心來制備血清。因此,與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。瑞安Biochannel培養(yǎng)基
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