泰興RPMI 1640培養(yǎng)基(無(wú)硝酸鈣)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-10-12

胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清營(yíng)養(yǎng)成分完全而豐富,代謝產(chǎn)物極少,微生物傳染的可能性更小,品質(zhì)更高,是組織細(xì)胞培養(yǎng)和病毒增殖時(shí)的重要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲),更常使用的胎牛血清(澳洲)濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,在實(shí)驗(yàn)中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲),要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清(澳洲)濃度。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。泰興RPMI 1640培養(yǎng)基(無(wú)硝酸鈣)

什么是優(yōu)良的胎牛血清?外觀,好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無(wú)沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說(shuō)明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說(shuō)明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象??偟鞍缀?,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說(shuō)明采集血液的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。血紅蛋白,標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。pH,國(guó)產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。泰興RPMI 1640培養(yǎng)基(無(wú)硝酸鈣)胎牛血清,是胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物。

胎牛血清的生產(chǎn)和質(zhì)控也是影響產(chǎn)品品質(zhì)的重要因素。胎牛血清生產(chǎn)流程可分為原料采集、原料加工及冷鏈運(yùn)輸三個(gè)重要環(huán)節(jié)。生產(chǎn)過(guò)程中的每一步,如血源采集、加工、過(guò)濾、輻照處理、包裝、質(zhì)檢和物流等,都必須遵循行業(yè)高標(biāo)準(zhǔn),以確保產(chǎn)品的優(yōu)異品質(zhì)。一個(gè)符合業(yè)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)的血清生產(chǎn)流程是這樣的:在嚴(yán)格規(guī)范的健康與檢疫監(jiān)控下,懷孕母牛從牧場(chǎng)運(yùn)輸?shù)酵涝讏?chǎng),胎牛經(jīng)心臟穿刺取血,得到胎牛血清原料;新生牛和小牛血清則取自出生相應(yīng)天數(shù)的牛血液。按照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),血清生產(chǎn)需經(jīng)過(guò)多級(jí)預(yù)過(guò)濾和三級(jí)0.1μm精過(guò)濾,以去除包括支原體在內(nèi)的各種微生物與雜質(zhì)。生產(chǎn)后的血清需經(jīng)過(guò)嚴(yán)苛的質(zhì)檢環(huán)節(jié),得到合格成品后,保存和運(yùn)輸環(huán)節(jié)也要嚴(yán)格遵循相關(guān)要求。

活性炭處理胎牛血清的應(yīng)用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌元素相關(guān)的細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)。同時(shí)活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種元素和生長(zhǎng)因子,減少了影響細(xì)胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無(wú)菌過(guò)濾內(nèi)有害元素≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)更高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分更少。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛。

血清和血漿均來(lái)自全血,通過(guò)離心去除包括紅細(xì)胞在內(nèi)的成分。血漿和血清之間的區(qū)別在于,凝血蛋白存在于血漿中,但已從血清中去除。血漿一般是通過(guò)在離心前向血液中加入抗凝劑來(lái)制備的,但不會(huì)去除凝血蛋白。通過(guò)在離心前使血液凝固或通過(guò)普遍/漸進(jìn)離心來(lái)制備血清。因此,與凝血相關(guān)的纖維蛋白原和蛋白質(zhì)不存在于血清中。在人類中,以下22種蛋白質(zhì)占血清和血漿總蛋白質(zhì)含量的99%:白蛋白、總IgG、轉(zhuǎn)鐵蛋白、纖維蛋白原、總IgA、α-2-巨球蛋白、總IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3補(bǔ)體、結(jié)合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、載脂蛋白-B、載脂蛋白-A1、脂蛋白(a)、因子H、銅藍(lán)蛋白、C4補(bǔ)體、補(bǔ)體因子B、前白蛋白、C9補(bǔ)體、C1q補(bǔ)體和C8補(bǔ)體。剩下的1%包括數(shù)百種蛋白質(zhì)。更豐富的血清蛋白白蛋白,濃度為50mg/ml,約占總蛋白質(zhì)量的一半。胎牛血清100納米過(guò)濾,過(guò)濾材料符合美國(guó)藥典的生物安全性標(biāo)準(zhǔn)。海門(mén)哺乳動(dòng)物懸浮和貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)基

胎牛血清可以起到緩解酸堿度的作用,目前這方面的作用已經(jīng)得到了證實(shí)。泰興RPMI 1640培養(yǎng)基(無(wú)硝酸鈣)

如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。泰興RPMI 1640培養(yǎng)基(無(wú)硝酸鈣)

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