胎牛血清給細(xì)胞提供的益處主要體現(xiàn)在6個(gè)方面:1、提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然元素或天然的生長(zhǎng)因子。2、提供天然的結(jié)合蛋白,能識(shí)別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和元素等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并對(duì)細(xì)胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多個(gè)鈣離子結(jié)合位點(diǎn),因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。3、天然含有粘附蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,促進(jìn)細(xì)胞的附著、鋪展。4、提供消毒功能。這主要通過(guò)血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結(jié)合來(lái)完成的。如金屬硫蛋白,對(duì)多種重金屬有高度親和性,并可清理細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境中的氧自由基(·O),具有很強(qiáng)的抗氧化活性,可防止細(xì)胞衰老。5、提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。6、提供蛋白酶抑制劑,使細(xì)胞免受蛋白酶的損傷。因此在細(xì)胞消化時(shí),常用含血清的培養(yǎng)液終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。胎牛血清的免疫球蛋白含量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于新生牛血清,胎牛的血清相對(duì)來(lái)說(shuō)比較純。培養(yǎng)基生產(chǎn)商家
胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別:組份與比例不同,雖然胎牛血清與新生牛血清的成分并不存在很大的差別,可是諸如促細(xì)胞生長(zhǎng)因子和促貼附因子等組份并不相同,而且兩者之間的元素以及其他活性物質(zhì)的比例也不同。胎牛血里的生長(zhǎng)因子適合牛體內(nèi)各種細(xì)胞生長(zhǎng),通常在8個(gè)月胎齡后慢慢消失。另外,胎牛血清的免疫球蛋白含量要遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于新生牛血清,胎牛的血清相對(duì)來(lái)說(shuō)比較純,所以培養(yǎng)細(xì)胞的效果會(huì)更佳。用途與用法不同,由于胎牛血清與新生牛血清存在細(xì)微差異,因此它們的用途與用法也不盡相同。樂(lè)清食蟹猴血清真正的胎牛血清凝血功容易破裂。
細(xì)胞培養(yǎng)中胎牛血清的重要作用:許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細(xì)胞培養(yǎng),在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,血清無(wú)疑成為影響實(shí)驗(yàn)成功與否的重要因素,而在眾多血清之中,牛血清是更為常用的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量更大的天然培養(yǎng)基,其中含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)成分,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物,而且血清的組成及含量通常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì),多肽類,元素類,其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。
活性炭處理胎牛血清的應(yīng)用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌元素相關(guān)的細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)。同時(shí)活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種元素和生長(zhǎng)因子,減少了影響細(xì)胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無(wú)菌過(guò)濾內(nèi)有害元素≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)更高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分更少。胎牛血清可以起到緩解酸堿度的作用,目前這方面的作用已經(jīng)得到了證實(shí)。
血清是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常用的生物試劑,市面上有很多種類的血清,現(xiàn)在就來(lái)給大家介紹其中的一款——透析胎牛血清。透析胎牛血清是采用透析的方法,過(guò)濾去除10KDa以下的小分子(如氨基酸、核苷:次黃嘌呤和胸腺核苷等、膽固醇等),而保留血清中的大分子成分,因而可用于一些特定的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),比如:需要避免細(xì)胞培養(yǎng)基中一些小分子干擾的實(shí)驗(yàn)。使用放射性標(biāo)記小分子,對(duì)生物合成過(guò)程進(jìn)行監(jiān)測(cè),以研究蛋白質(zhì)等大分子的生化性質(zhì)、合成、加工、細(xì)胞內(nèi)傳送、分泌和降解過(guò)程。這時(shí),常將細(xì)胞放在含有充足養(yǎng)分和放射性標(biāo)記氨基酸(如35S標(biāo)記的蛋氨酸或半胱氨酸)的培養(yǎng)液中進(jìn)行標(biāo)記。為避免外源未標(biāo)記的氨基酸的干擾,這時(shí)所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基礎(chǔ)培養(yǎng)基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。胎牛血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、元素、無(wú)機(jī)物等。培養(yǎng)基生產(chǎn)商家
胎牛血清蛋白和脂類含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。培養(yǎng)基生產(chǎn)商家
胎牛血清使用中的常見(jiàn)問(wèn)題:血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里(一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的血清?國(guó)內(nèi)一致認(rèn)為HYCLONE的血清是更好的,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,國(guó)外一般認(rèn)為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,但是總的來(lái)說(shuō)這兩種價(jià)格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國(guó)產(chǎn)的就夠用了。此外,由于國(guó)內(nèi)HYCLONE,GIBCO并沒(méi)有生產(chǎn)線,我們只能從代理商那里買,而代理商又魚(yú)龍混雜,所以買到假貨的可能性也很大。培養(yǎng)基生產(chǎn)商家
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