進口的胎牛血清:過濾分裝前很少會反復凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因為絕大多數(shù)是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,好的血清應是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。1、如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質變性,若棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明采集血液的牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白,標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高,反之,數(shù)值越低。胎牛血清可以使細胞傳代時,將剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能夠起到保護細胞不受到傷害的作用。南通哺乳動物細胞生長培養(yǎng)基
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。優(yōu)級胎牛血清 Fetal Bovine Serum(Characterized)哪家好胎牛血清有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到消毒作用。
血清中出現(xiàn)沉淀的原因很多:反復的凍融會使血清脂蛋白發(fā)生變性造成渾濁,可通過分裝成單次用量減少凍融來盡量避免此種情況。血清是在低溫環(huán)境下迅速加工以保持其生長特性,血清中遺留的一些纖維蛋白原在解凍時會轉化成纖維蛋白。過量的纖維蛋白在血清中呈現(xiàn)為可見的絮狀物質,可通過400xg離心移除。不建議通過過濾血清來移除絮狀物質,因為濾器可能堵塞,或者意外截留到重要的蛋白質。牛血清產(chǎn)品檢測項目包括內有害元素、細菌、菌體、霉菌、支原體和噬菌體檢測嗎?胎牛血清采用非常嚴謹?shù)臉藴蕶z測過這些相關微生物的污染,具體可以參加每批次的CoA。什么是γ輻照的血清(胎牛血清)?γ輻照的血清通過暴露于放射性60Co產(chǎn)生的25-40kGy劑量的γ射線來滅活病毒和其他外來微生物(比如支原體)。γ輻照處理不影響血清的理化性質或細胞培養(yǎng)性能。
血清解凍后為何會有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之。去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g,1-2分鐘稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。雖然胎牛血清與新生牛血清的成分并不存在很大的差別,可是諸如促細胞生長因子和促貼附因子等組份并不相同。
胎牛血清是一種天然產(chǎn)物,原產(chǎn)地牛源的生長環(huán)境和健康狀況對于血清的產(chǎn)量和品質都有著重要影響。當產(chǎn)地的氣候、環(huán)境等因素發(fā)生變化時,牛只數(shù)量的減少會直接影響血清產(chǎn)量,例如近年來澳洲爆發(fā)的森林火災、千年難遇洪水、藍舌病病情等,對當?shù)匦竽廉a(chǎn)業(yè)造成了深遠影響。隨全球科研領域不斷發(fā)展,血清需求量日益增加,合規(guī)血源變得愈發(fā)珍稀,高等血清更是一貨難求。受此國際市場環(huán)境的巨大沖擊,近期澳大利亞、新西蘭和南美烏拉圭進口胎牛血清的原料價格持續(xù)高漲。胎牛血清勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。優(yōu)級胎牛血清 Fetal Bovine Serum(Characterized)哪家好
胎牛血清經(jīng)過細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞培養(yǎng)驗證。南通哺乳動物細胞生長培養(yǎng)基
使用胎牛血清的注意事項:注意解凍的方法,再高質量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外更好采用分步解凍的方式解凍血清,即先利用冰箱或冷庫將其溶解滿幾天,之后在室溫下全溶后再進行分裝。胎牛血清的滅活,一般是用水浴加熱的方式來加熱已經(jīng)完全解凍的血清,那么需要注意的是,加熱的過程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做,是為了能夠讓血清中的補體成分去活化。不過胎牛血清的滅活并不是強制的要求,客戶可以自行選擇是否進行滅火處理。南通哺乳動物細胞生長培養(yǎng)基
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