浙江CAR-T整合位點(diǎn)CRO

從基礎(chǔ)設(shè)施的角度來看，必須盡一切努力增加存儲(chǔ)單元內(nèi)溫度的安全性和穩(wěn)定性。例如，液氮（LN2）罐，無論是自動(dòng)的還是手動(dòng)的，都應(yīng)通過真空絕緣管道進(jìn)料，以確保在需要時(shí)立即輸送 LN2。風(fēng)險(xiǎn)應(yīng)對計(jì)劃也同樣需要，包括備用 LN2 供應(yīng)、待命的工作人員和資格認(rèn)證服務(wù)。監(jiān)管要求：格局正在發(fā)生變化從質(zhì)量和監(jiān)管角度來看，可重復(fù)性、再現(xiàn)性、可擴(kuò)展性和可比性都已成為非常現(xiàn)實(shí)的挑戰(zhàn)。細(xì)胞和基因zhiliao的法規(guī)性壁壘和區(qū)域補(bǔ)償差異限制了其全球擴(kuò)張。整合位點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，推薦唯可生物，實(shí)驗(yàn)實(shí)力強(qiáng)，專業(yè)性高，檢測效率高，結(jié)果準(zhǔn)確率高。浙江CAR-T整合位點(diǎn)CRO

應(yīng)用場景：單克隆抗體藥物輔助篩選；致xingbing毒整合位點(diǎn)檢測與整合偏好性分析等；WGS不適用于轉(zhuǎn)染之后未經(jīng)過傳代培養(yǎng)和表型篩選的細(xì)胞系。豐富的項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)?zāi)壳?，唯可已與國內(nèi)外多家免疫zhiliao研究前沿企業(yè)開展合作，采用該方法對高度異質(zhì)性的CAR-T細(xì)胞進(jìn)行整合位點(diǎn)檢測與細(xì)胞安全性評估，具有較為豐富的項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn)。一般HBV插入到基因組中形成下圖結(jié)構(gòu)。使用三代測序，靶向插入?yún)^(qū)域的測序reads可分為Readsgroup1（HBV插入?yún)^(qū)域測通）和Readsgroup2（reads部分比對染色體，部分比對HBV插入?yún)^(qū)域）。基于三代數(shù)據(jù)比對后bam文件的IGV圖，判斷變異類型，推斷斷點(diǎn)類型和插入序列。北京慢病毒載體整合位點(diǎn)技術(shù)含有完整的外源DNA全部整合結(jié)構(gòu)、插入位點(diǎn)旁側(cè)序列和受體基因組在整合位點(diǎn)附近重排結(jié)構(gòu)的CCS reads。

靶細(xì)胞群的轉(zhuǎn)化可能性，這可能與細(xì)胞的分化狀態(tài)、增殖潛力、體外培養(yǎng)條件和體內(nèi)植入環(huán)境等有關(guān)?；谝延锌茖W(xué)經(jīng)驗(yàn)和既往非臨床/臨床研究結(jié)果，如果認(rèn)為基因修飾細(xì)胞所采用的載體系統(tǒng)可將外源基因整合到細(xì)胞基因組中并可在體內(nèi)長期存續(xù)，需綜合分析以上風(fēng)險(xiǎn)因素，評估潛在的插入突變、致瘤/致性風(fēng)險(xiǎn)。非臨床研究，應(yīng)采用具有代表性的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)行基因整合位點(diǎn)分析，分析細(xì)胞的克隆組成以及在關(guān)注基因（如liu相關(guān)調(diào)控基因）附近有無優(yōu)先整合跡象，含有關(guān)注整合位點(diǎn)的細(xì)胞有無優(yōu)先異常增殖。

長期隨訪的觀察時(shí)間長期隨訪的持續(xù)時(shí)間應(yīng)確保足以觀察到受試者因產(chǎn)品特性、暴露情況（生物分布和給藥途徑）等導(dǎo)致的風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)不短于遲發(fā)性不良反應(yīng)的預(yù)期發(fā)生時(shí)間。一般而言，針對不同類型的基因zhiliao產(chǎn)品建議如下：?具有基因組整合活性的載體（例如γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒載體）和轉(zhuǎn)座子元件建議觀察不短于15年。?可以產(chǎn)生持續(xù)ganran、或有潛伏再jihuo風(fēng)險(xiǎn)的細(xì)菌或病毒載體（如單純皰疹病毒）建議觀察15年或至數(shù)據(jù)表明不再存在任何風(fēng)險(xiǎn)（ganran或再jihuo）。整合位點(diǎn)分析，推薦唯可生物，實(shí)驗(yàn)實(shí)力強(qiáng)，專業(yè)性高，檢測效率高，結(jié)果準(zhǔn)確率高。

f如果RCT設(shè)計(jì)不可行，申請人可能在確證性臨床試驗(yàn)中采用單臂試驗(yàn)（singlearmtrial,SAT）。在這種情況下，申請人應(yīng)解釋無法開展RCT試驗(yàn)的理由并提供相應(yīng)研究證據(jù)，并有必要利用回顧性數(shù)據(jù)、前瞻性真實(shí)世界研究、薈萃分析或流行病學(xué)調(diào)查等數(shù)據(jù)及探索性研究結(jié)果，對受試人群、主要終點(diǎn)和預(yù)期臨床療效等研究要素進(jìn)行合理說明。RCT確證性試驗(yàn)應(yīng)在可行的情況下盡量保持盲法。對于很多免疫細(xì)胞zhiliao產(chǎn)品，由于研究者或醫(yī)務(wù)人員參與細(xì)胞的采集并配合操作給藥過程，可能難以對研究者設(shè)盲，這種情況下有必要采用其它方法降低試驗(yàn)的偏倚，例如對受試者設(shè)盲。如果盲法不可行，如SAT，應(yīng)設(shè)立不受研究者影響的單獨(dú)審評委員會(huì)（independentreviewcommittee，IRC），對臨床終點(diǎn)進(jìn)行判讀并作為主要終點(diǎn)的判定標(biāo)準(zhǔn)，或?qū)ρ芯空咴u估的結(jié)果進(jìn)行敏感性分析。慢病毒載體在CAR-T細(xì)胞中的整合位點(diǎn)分析方法及引物。病毒整合位點(diǎn)技術(shù)

CAR-T慢病毒整合位點(diǎn)檢測淺析。浙江CAR-T整合位點(diǎn)CRO

國內(nèi)外基因zhiliao產(chǎn)品開展的非臨床研究、長期隨訪獲得的臨床經(jīng)驗(yàn)以及基因組整合位點(diǎn)分析方法的明顯改進(jìn)，都有助于更好地理解整合性基因zhiliao載體相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)。通常認(rèn)為，很多能夠介導(dǎo)外源基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞核的載體（如逆轉(zhuǎn)錄病毒載體、轉(zhuǎn)座子元件和基因編輯產(chǎn)品等）有基因組整合潛力，需要通過長期隨訪觀察遲發(fā)性不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)；根據(jù)目前的認(rèn)識(shí)和研究數(shù)據(jù)，質(zhì)粒、痘病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒（AAV）等載體的基因zhiliao產(chǎn)品整合風(fēng)險(xiǎn)較低，國際上開展的臨床試驗(yàn)中也表現(xiàn)出較低的遲發(fā)性不良反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。浙江CAR-T整合位點(diǎn)CRO