電子探針分析是指以聚焦的高速電子來激發(fā)出試樣表面組成元素的特征X射線,對(duì)微區(qū)成分進(jìn)行定性或定量分析的一種材料物理試驗(yàn),又稱電子探針X射線顯微分析。電子探針分析的原理是:以動(dòng)能為10~30千電子伏的細(xì)聚焦電子束轟擊試樣表面,擊出表面組成元素的原子內(nèi)層電子,使原子電離,此時(shí)外層電子迅速填補(bǔ)空位而釋放能量,從而產(chǎn)生特征X射線。電子探針的功能主要是進(jìn)行微區(qū)成分分析。它是在電子光學(xué)和X射線光譜學(xué)原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種高效率分析儀器。其原理是用細(xì)聚焦電子束入射樣品表面,激發(fā)出樣品元素的特征x射線,分析特征X射線的波長(或特征能量)即可知道樣品中所含元素的種類(定性分析),分析X射線的強(qiáng)度,則可知道樣品...
②隨機(jī)引物法。隨機(jī)引物是指含有各種可能排列順序的寡聚核苷酸片斷的混合物,因此它可以與任意核苷酸序列雜交,起到聚合酶反應(yīng)的引物作用。將待標(biāo)記的DNA探針片斷變性后與隨機(jī)引物一起雜交,然后以此雜交的寡聚核苷酸為引物,在大腸桿菌DNA聚合酶I大斷段(KlenowFragment)催化下,合成與探針DNA互補(bǔ)的DNA鏈,當(dāng)在反應(yīng)體系中含有a-32P-dNTP時(shí),即形成放射性同位素標(biāo)記的DNA探針。具有上述優(yōu)點(diǎn),可代替缺口平移法。此外大小、單雙DNA均可標(biāo)記,標(biāo)記均勻,標(biāo)記率高,但也不能標(biāo)記環(huán)狀DNA。隨機(jī)引物法標(biāo)記探針一般長400~600bp。背散射電子圖像系統(tǒng)。普陀區(qū)特制探針按需定制是將探針卡上的探...
缺口平移法是**常用的探針標(biāo)記法,反應(yīng)體系的主要成分有DNA酶I(DNase I)、大腸桿菌DNA聚合酶I(DNA polymerase I)、三種三磷酸脫氧核糖核苷酸、一種同位素標(biāo)記的核苷酸(如dATP、dTTP、dCTP,”P—dGTP),其原理如圖1。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶I在探針DNA雙鏈分子上隨機(jī)切開若干個(gè)缺口(不是切斷DNA或?qū)⑵浣到猓?,然后再借助于DNA聚合酶I的5 '→3'的外切酶活性,切去5’末端的核苷酸;同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚合酶活性,使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核苷酸補(bǔ)入缺口.DNA聚合酶I的這兩種活性的交替作用,使缺口不斷向3’的方向移動(dòng),DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)...
③末端標(biāo)記法(又叫尾標(biāo))。利用末端轉(zhuǎn)移酶可進(jìn)行“尾標(biāo)”,尾標(biāo)適用于寡核苷酸探針標(biāo)記,寡核苷酸探針多用于核酸“點(diǎn)”突變的檢測,該探針可用核酸合成儀人工合成,克隆出的探針一般較長,特異性好,標(biāo)記量大,雜交的檢出信號(hào)強(qiáng)。探針合成的注意事項(xiàng)①合成探針的長短,一般在20~50個(gè)核苷酸之間。合成過長成本高,且易出現(xiàn)聚合酶合成錯(cuò)誤,雜交時(shí)間長,合成太短則特異性下降。②堿基組成G-C應(yīng)含40%~60%,一種堿基連續(xù)重復(fù)不超過4個(gè),以免非特異性雜交產(chǎn)生。③探針自身序列內(nèi)應(yīng)無互補(bǔ)區(qū)域,以免產(chǎn)生“發(fā)夾”結(jié)構(gòu),影響雜交??傊?,一個(gè)好的探針**終要在實(shí)踐中才能加以確認(rèn)。計(jì)算時(shí)應(yīng)用布拉格方程:nλ=2dsinθ。靜安區(qū)品...
進(jìn)行分子突變需要大量的探針拷貝,后者一般是通過分子克?。╩olecular cloning)獲得的??寺∈侵赣脽o性繁殖方法獲得同一個(gè)體、細(xì)胞或分子的大量復(fù)制品。當(dāng)制備基因組DNA探針前,應(yīng)先制備基因組文庫,即把基因組DNA打斷,或用限制性酶作不完全水解,得到許多大小不等的隨機(jī)片段,將這些片段體外重組到運(yùn)載體(噬菌體、質(zhì)粒等)中去,再將后者轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞如大腸肝菌,這時(shí)在固體培養(yǎng)基上可以得到許多攜帶有不同DNA片段的克隆噬菌斑,通過原位雜交,從中可篩出含有目的基因片段的克隆,然后通過細(xì)胞擴(kuò)增,制備出大量的探針。當(dāng)某一X射線光子進(jìn)入計(jì)數(shù)管后,管內(nèi)氣體電離,并在電場作用下產(chǎn)生電脈沖信號(hào)。青浦區(qū)品...
體外轉(zhuǎn)錄技術(shù)不斷完善,已相繼建立了單向和雙向體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。該系統(tǒng)主要基于一類新型載體pSP和pGEM,這類載體在多克隆位點(diǎn)兩側(cè)分別帶有SP6啟動(dòng)子和T7啟動(dòng)子,在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可以進(jìn)行RNA轉(zhuǎn)錄,如果在多克隆位點(diǎn)接頭中插入了外源DNA片段,則可以此DNA兩條鏈中的一條為模板轉(zhuǎn)錄生成RNA。這種體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)效率很高,在1h內(nèi)可合成近10μg的RNA產(chǎn)生,只要在底物中加入適量的放射性或生物素標(biāo)記的NTP,則所合成的RNA可得到高效標(biāo)記。該方法能有效地控制探針的長度并可提高標(biāo)記物的利用率。掃描電子探針儀是美國于1960年制成,不僅能對(duì)試樣作點(diǎn)或微區(qū)分析,而且能對(duì)樣品表面微...
電子探針是運(yùn)用電子所形成的探測針(細(xì)電子束)作為X射線的激發(fā)源來進(jìn)行顯微X射線光譜分析的儀器。分析對(duì)象是固體物質(zhì)表面細(xì)小顆?;蛭⑿^(qū)域,**小范圍直徑為1μm。電子探針可測量的化學(xué)成分的元素范圍一般從原子序數(shù)12(Mg)至92(U),原子序數(shù)大于22的元素可在空氣通路的X射線光譜儀上進(jìn)行測量。電子探針的靈敏度低于X射線熒光光譜儀,原因是電子探針X射線的本底值高于后者,但電子探針的***感量比其他儀器都高。此外,后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線背散射照相、******照相。能兼作透射電鏡、能進(jìn)行電子衍射、能作電子熒光觀察等。X射線譜儀。測量各種元素產(chǎn)生的X射線波長和強(qiáng)度,并以此對(duì)微小體積中所含元素進(jìn)行...
電子探針又稱微區(qū)X射線光譜分析儀、X射線顯微分析儀。其原理是利用聚焦的高能電子束轟擊固體表面,使被轟擊的元素激發(fā)出特征X射線,按其波長及強(qiáng)度對(duì)固體表面微區(qū)進(jìn)行定性及定量化學(xué)分析。主要用來分析固體物質(zhì)表面的細(xì)小顆?;蛭⑿^(qū)域,**小范圍直徑為1μm左右。分析元素從原子序數(shù)3(鋰)至92(鈾)。***感量可達(dá)10-14至10-15g。近年形成了掃描電鏡-顯微分析儀的聯(lián)合裝置,可在觀察微區(qū)形貌的同時(shí)逐點(diǎn)分析試樣的化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)。廣泛應(yīng)用于地質(zhì)、冶金材料、水泥熟料研究等部門。如圖《電子探針示意圖》所示。(1)電子光學(xué)系統(tǒng)。電子束直徑0.1~1μm,電子束穿透深度1~3μm。奉賢區(qū)挑選探針維修價(jià)格在不損...
電子探針又稱微區(qū)X射線光譜分析儀、X射線顯微分析儀。其原理是利用聚焦的高能電子束轟擊固體表面,使被轟擊的元素激發(fā)出特征X射線,按其波長及強(qiáng)度對(duì)固體表面微區(qū)進(jìn)行定性及定量化學(xué)分析。主要用來分析固體物質(zhì)表面的細(xì)小顆粒或微小區(qū)域,**小范圍直徑為1μm左右。分析元素從原子序數(shù)3(鋰)至92(鈾)。***感量可達(dá)10-14至10-15g。近年形成了掃描電鏡-顯微分析儀的聯(lián)合裝置,可在觀察微區(qū)形貌的同時(shí)逐點(diǎn)分析試樣的化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)。廣泛應(yīng)用于地質(zhì)、冶金材料、水泥熟料研究等部門。如圖《電子探針示意圖》所示。可以進(jìn)行點(diǎn)、線掃描(得到層成分分布信息)、面掃描分析(得到成分面分布圖像)。徐匯區(qū)品牌探針銷售廠家禽...
X射線譜儀能譜儀電子束轟擊樣品表面將產(chǎn)生特征X射線,不同的元素有不同的X射線特征波長和能量。通過鑒別其特征波長或特征能量就可以確定所分析的元素。利用特征波長來確定元素的儀器叫做波長色散譜儀(波譜儀),利用特征能量的就稱為能量色散譜儀(能譜儀)。1、波譜儀波譜儀的關(guān)鍵在于怎樣實(shí)現(xiàn)將未知的特征譜線與已知元素Z聯(lián)系起來?為此設(shè)想有一種晶面間距為d的特定晶體(我們稱為分光晶體),當(dāng)不同特征波長λ的X射線照射其上時(shí),如果滿足布拉格條件(2dsinθ=λ)將產(chǎn)生衍射。顯然,對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ*有一個(gè)確定的波長λ滿足衍射條件。利用探針盒子獲取他人手機(jī)號(hào)等隱私信息的行為涉嫌侵犯他人隱私,可能面臨民事侵...
安全**介紹,WiFi探針盒子確實(shí)可以通過技術(shù)手段獲取個(gè)人信息,用戶為避免信息泄露,可以在出門后關(guān)閉手機(jī)連接WiFi的功能,并不要在一些不合規(guī)的APP上提供真實(shí)個(gè)人信息。律師表示,利用探針盒子獲取他人手機(jī)號(hào)等隱私信息的行為涉嫌侵犯他人隱私,可能面臨民事侵權(quán)責(zé)任及治安管理處罰責(zé)任。實(shí)現(xiàn)原理1. WiFi信道掃描工具WiFi探針實(shí)現(xiàn)原理示意圖這種神秘的Wi-Fi探針,實(shí)際是“WiFi信道掃描工具”。市面上的WiFi有2.4G、5G兩個(gè)頻段,每個(gè)頻段有不同的信道劃分,Wi-Fi探針設(shè)備通過在各個(gè)信道被動(dòng)監(jiān)測,采集周圍的數(shù)據(jù)幀內(nèi)容,發(fā)現(xiàn)周邊手機(jī)、筆記本、路由器等無線設(shè)備,從而滿足客流統(tǒng)計(jì)、精細(xì)營銷等需...
細(xì)菌的基因組大小約5×106bp,約含3000個(gè)基因。各種細(xì)菌之間絕大部分DNA是相同的,要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針,通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫的辦法,即將細(xì)菌DNA切成小片段后分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫。然后用多種其它菌種的DNA作探針來篩選,產(chǎn)生雜交信號(hào)的克隆被剔除,***剩下的不與任何其它細(xì)菌雜交的克隆則可能含有該細(xì)菌特異性DNA片段。將此重組質(zhì)粒標(biāo)記后作探針進(jìn)一步鑒定,亦可經(jīng)DNA序列分析鑒定其基因來源和功能。因此要得到一種特異性DNA探針,常常是比較繁瑣的。通過鑒別其特征波長或特征能量就可以確定所分析的元素。虹口區(qū)標(biāo)準(zhǔn)探針現(xiàn)價(jià)利用電子探針分析方法可以探知材料樣品的...
在不損耗試樣的情況下,電子探針通常能分析直徑和深度不小于1微米范圍內(nèi)、原子序數(shù)4以上的所有元素;但是對(duì)原子序數(shù)小于12的元素,其靈敏度較差。常規(guī)分析的典型檢測相對(duì)靈敏度為萬分之一,在有些情況下可達(dá)十萬分之一。檢測的***靈敏度因元素而異,一般為10-14~10-16克。用這種方法可以方便地進(jìn)行點(diǎn)、線、面上的元素分析,并獲得元素分布的圖象。對(duì)原子序數(shù)高于10、濃度高于10%的元素,定量分析的相對(duì)精度優(yōu)于±2%。電子探針儀是 X射線光譜學(xué)與電子光學(xué)技術(shù)相結(jié)合而產(chǎn)生的。1948年法國的R.卡斯坦制造了***臺(tái)電子探針儀。1958年法國首先制造出商品儀器。電子探針儀與掃描電子顯微鏡在結(jié)構(gòu)上有許多共同處...
電子探針(Electron Probe Microanalysis)是一種利用電子束作用樣品后產(chǎn)生的特征X射線進(jìn)行微區(qū)成分分析的儀器, [1]可以用來分析薄片中礦物微區(qū)的化學(xué)組成。除H、He、Li、Be等幾個(gè)較輕元素外,還有U元素以后的元素以外都可進(jìn)行定性和定量分析。電子探針的大批量是利用經(jīng)過加速和聚焦的極窄的電子束為探針,激發(fā)試樣中某一微小區(qū)域,使其發(fā)出特征X射線,測定該X射線的波長和強(qiáng)度,即可對(duì)該微區(qū)的元素作定性或定量分析。電子探針顯微分析原理及其發(fā)展的初期是建立在X射線光譜分析和電子顯微鏡這兩種技術(shù)基礎(chǔ)上的,該儀器實(shí)質(zhì)上就是這兩種儀器的科學(xué)組合。能兼作透射電鏡、能進(jìn)行電子衍射、能作電子熒...
電子探針儀鏡筒部分的構(gòu)造大體上和掃描電子顯微鏡相同,只是在檢測器部分使用的是X射線譜儀、專門用來檢測X射線的特征波長或特征能量,以此來對(duì)微區(qū)的化學(xué)成分進(jìn)行分析。因此,除專門的電子探針儀外,有相當(dāng)一部分電子探針儀是作為附件安裝在掃描電鏡或透射電鏡鏡筒上,以滿足微區(qū)組織形貌、晶體結(jié)構(gòu)及化學(xué)成分三位一體同位分析的需要 [1]。用波長色散譜儀(或能量色散譜儀)和檢測計(jì)數(shù)系統(tǒng),測量特征X射線的波長(或能量)和強(qiáng)度,即可鑒別元素的種類和濃度。光學(xué)顯微鏡目測系統(tǒng)。用以準(zhǔn)確選擇需要分析的區(qū)域,并作光學(xué)觀察。普陀區(qū)特制探針品牌③末端標(biāo)記法(又叫尾標(biāo))。利用末端轉(zhuǎn)移酶可進(jìn)行“尾標(biāo)”,尾標(biāo)適用于寡核苷酸探針標(biāo)記,寡...
在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄,有時(shí)還存在反向轉(zhuǎn)錄(即生成反義RNA),這種現(xiàn)象往往是外源基因表達(dá)不高的重要原因。另外,在真核系統(tǒng),某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)生反義RNA,參與自身表達(dá)的調(diào)控。在這些情況下,要準(zhǔn)確測定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針,而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測的合適標(biāo)記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補(bǔ)的原理,用特異的基因探針即識(shí)別特異堿基序列的有標(biāo)記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,與被測定的靶序列互補(bǔ),以檢測被測靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù)。探針制備就是將目的基因進(jìn)行標(biāo)記。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2...
(3)X射線強(qiáng)度測量系統(tǒng)。特征X射線,由B系統(tǒng)中的計(jì)數(shù)管接收,并轉(zhuǎn)換成電脈沖,通過脈沖高度分析儀、計(jì)數(shù)率計(jì)、定標(biāo)器、電子電位計(jì)將其強(qiáng)度測量出來。(4)光學(xué)顯微鏡目測系統(tǒng)。用以準(zhǔn)確選擇需要分析的區(qū)域,并作光學(xué)觀察。(5)背散射電子圖像系統(tǒng)。(6)吸收電子圖像系統(tǒng)。(7)特征X射線圖像系統(tǒng)。電子探針的技術(shù)**是利用X射線晶體光學(xué),主要應(yīng)用兩種方法:1)晶體衍射法(X射線光譜法)。利用晶體轉(zhuǎn)到一定角度,來衍射某種波長的X射線,通過讀出晶體不同的衍射角,求出X射線的波長,從而定出樣品所含的元素。1953年前蘇聯(lián)制成了X射線微區(qū)分析儀,以后英、美等國陸續(xù)生產(chǎn)。閔行區(qū)標(biāo)準(zhǔn)探針按需定制DNA探針可以用來診斷...
血凝素與生物素有非常高的親和性,當(dāng)血凝素標(biāo)記上過氧化物酶或堿性磷酸酶,經(jīng)雜交反應(yīng)**終形成探針-生物素-血凝素酶復(fù)合物(ABC法),酶催化底物顯色,觀察結(jié)果。ABC法底物顯色生成不溶物,以便觀測結(jié)果。酶標(biāo)記法復(fù)雜、重復(fù)性差,成本高,但便于運(yùn)輸、保存,靈敏度與放射物標(biāo)記法相當(dāng)。探針標(biāo)記方法①缺口平移標(biāo)記法。利用的是DNA聚合酶I能修復(fù)DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機(jī)切出切口,然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´端核苷酸,同時(shí)在3´端修復(fù)加入被標(biāo)記核苷酸,切口平行推移。缺口平移法快速、簡便、成本相對(duì)較低、比活性相對(duì)較高、標(biāo)記均勻,多用于大分子DNA標(biāo)記,(...
DNA探針根據(jù)其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應(yīng)的基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄獲得mRNA,再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20~50個(gè)堿基的與基因序列互補(bǔ)的DNA片段,稱為寡核苷酸探針。 [1]基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細(xì)菌為例,細(xì)菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個(gè)基因。要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針,通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫的辦法,即將細(xì)菌DN...
細(xì)菌的基因組大小約5×106bp,約含3000個(gè)基因。各種細(xì)菌之間絕大部分DNA是相同的,要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針,通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫的辦法,即將細(xì)菌DNA切成小片段后分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫。然后用多種其它菌種的DNA作探針來篩選,產(chǎn)生雜交信號(hào)的克隆被剔除,***剩下的不與任何其它細(xì)菌雜交的克隆則可能含有該細(xì)菌特異性DNA片段。將此重組質(zhì)粒標(biāo)記后作探針進(jìn)一步鑒定,亦可經(jīng)DNA序列分析鑒定其基因來源和功能。因此要得到一種特異性DNA探針,常常是比較繁瑣的。后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線背散射照相、照相。虹口區(qū)挑選探針按需定制為了制備cDNA 探針,首先需分離純化相應(yīng)...
該系統(tǒng)為電子探針分析提供具有足夠高的入射能量,足夠大的束流和在樣品表面轟擊殿處束斑直徑近可能小的電子束,作為X射線的激發(fā)源。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個(gè)聚光鏡的結(jié)構(gòu)。 為了提高X射線的信號(hào)強(qiáng)度,電子探針必須采用較掃描電鏡更高的入射電子束流(在10-9-10-7A范圍),常用的加速電壓為10-30 KV,束斑直徑約為0.5μm。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學(xué)顯微鏡。它的作用是選擇和確定分析點(diǎn)。其方法是,先利用能發(fā)出熒光的材料(如ZrO2)置于電子束轟擊下,這是就能觀察到電子束轟擊點(diǎn)的位置,通過樣品移動(dòng)裝置把它調(diào)到光學(xué)顯微鏡目鏡十字線交叉點(diǎn)上,這樣就能保證電子束正好...
2)X射線能譜分析法。無須分析晶體,而直接將探測器接收的訊號(hào)加以放大,進(jìn)行脈沖幅度分析,通過選擇不同的脈沖幅度來確定入射x射線的能量,從而區(qū)分不同的特征X射線。計(jì)算時(shí)應(yīng)用布拉格方程:nλ=2dsinθ。 [2]1、能進(jìn)行微區(qū)分析??煞治鰯?shù)個(gè)μm3內(nèi)元素的成分。2、能進(jìn)行現(xiàn)場分析。無需把分析對(duì)象從樣品中取出,可直接對(duì)大塊試樣中的微小區(qū)域進(jìn)行分析。把電子顯微鏡和電子探針結(jié)合,可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素成分聯(lián)系起來。3、分析范圍廣。Z>4其中,波譜:Be~U,能譜:Na~U。能進(jìn)行現(xiàn)場分析。無需把分析對(duì)象從樣品中取出,可直接對(duì)大塊試樣中的微小區(qū)域進(jìn)行分析。青浦區(qū)質(zhì)量探針按需定制這樣我們可以...
電子探針分析是指以聚焦的高速電子來激發(fā)出試樣表面組成元素的特征X射線,對(duì)微區(qū)成分進(jìn)行定性或定量分析的一種材料物理試驗(yàn),又稱電子探針X射線顯微分析。電子探針分析的原理是:以動(dòng)能為10~30千電子伏的細(xì)聚焦電子束轟擊試樣表面,擊出表面組成元素的原子內(nèi)層電子,使原子電離,此時(shí)外層電子迅速填補(bǔ)空位而釋放能量,從而產(chǎn)生特征X射線。電子探針的功能主要是進(jìn)行微區(qū)成分分析。它是在電子光學(xué)和X射線光譜學(xué)原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種高效率分析儀器。其原理是用細(xì)聚焦電子束入射樣品表面,激發(fā)出樣品元素的特征x射線,分析特征X射線的波長(或特征能量)即可知道樣品中所含元素的種類(定性分析),分析X射線的強(qiáng)度,則可知道樣品...
***臺(tái)電子探針是法國制成的,是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜儀組合而成。1953年前蘇聯(lián)制成了X射線微區(qū)分析儀,以后英、美等國陸續(xù)生產(chǎn)。***臺(tái)掃描電子探針儀是美國于1960年制成,不僅能對(duì)試樣作點(diǎn)或微區(qū)分析,而且能對(duì)樣品表面微區(qū)進(jìn)行掃描。原子序數(shù)12至22的元素要在真空下進(jìn)行成分測定,原子序數(shù)12以內(nèi)的元素需要增添一些特殊設(shè)備才能分析。原子序數(shù)50以上的元素用L系X射線光譜進(jìn)行分析,原子序數(shù)50以下的元素也可以分析,如Sn(50)可用K系x射線光譜進(jìn)行分析。 [2]分析范圍廣。Z>4其中,波譜:Be~U,能譜:Na~U。金山區(qū)品牌探針商家細(xì)菌的基因組大小約5×106bp,約含3000...
DNA探針是**常用的核酸探針,指長度在幾百堿基對(duì)以上的雙鏈DNA或單鏈DNA探針?,F(xiàn)已獲得DNA探針數(shù)量很多,有細(xì)菌、病毒、原蟲、***、動(dòng)物和人類細(xì)胞DNA探針。這類探針多為某一基因的全部或部分序列,或某一非編碼序列。這些DNA片段須是特異的,如細(xì)菌的毒力因子基因探針和人類Alu探針。這些DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。以細(xì)菌為例,分子雜交技術(shù)用于細(xì)菌的分類和菌種鑒定比之G+C百分比值要準(zhǔn)確的多,是細(xì)菌分類學(xué)的一個(gè)發(fā)展方向。加之分子雜交技術(shù)的高敏感性,分子雜交在臨床微生物診斷上具有廣闊的前景。電子探針可以對(duì)試樣中微小區(qū)域(微米級(jí))的化學(xué)組成進(jìn)行定性或定量分析。普陀區(qū)挑選探針...
用此探針在DNA文庫中篩選,陽性克隆即是目標(biāo)蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細(xì)胞和原核細(xì)胞DNA組織有所不同。真核基因中含有非編碼的內(nèi)含子序列,而原核則沒有。因此,真核基因組DNA探針用于檢測基因表達(dá)時(shí)雜交效率要明顯低于cDNA探針。DNA探針(包括cDNA探針)的主要優(yōu)點(diǎn)有下面三點(diǎn):①這類探針多克隆在質(zhì)粒載體中,可以無限繁殖,取之不盡,制備方法簡便。②DNA探針不易降解(相對(duì)RNA而言),一般能有效抑制DNA酶活性。③DNA探針的標(biāo)記方法較成熟,有多種方法可供選擇,如缺口平移,隨機(jī)引物法,PCR標(biāo)記法等,能用于同位素和非同位素標(biāo)記。對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ有一個(gè)確定的波長λ滿足衍射條件。青...
③末端標(biāo)記法(又叫尾標(biāo))。利用末端轉(zhuǎn)移酶可進(jìn)行“尾標(biāo)”,尾標(biāo)適用于寡核苷酸探針標(biāo)記,寡核苷酸探針多用于核酸“點(diǎn)”突變的檢測,該探針可用核酸合成儀人工合成,克隆出的探針一般較長,特異性好,標(biāo)記量大,雜交的檢出信號(hào)強(qiáng)。探針合成的注意事項(xiàng)①合成探針的長短,一般在20~50個(gè)核苷酸之間。合成過長成本高,且易出現(xiàn)聚合酶合成錯(cuò)誤,雜交時(shí)間長,合成太短則特異性下降。②堿基組成G-C應(yīng)含40%~60%,一種堿基連續(xù)重復(fù)不超過4個(gè),以免非特異性雜交產(chǎn)生。③探針自身序列內(nèi)應(yīng)無互補(bǔ)區(qū)域,以免產(chǎn)生“發(fā)夾”結(jié)構(gòu),影響雜交。總之,一個(gè)好的探針**終要在實(shí)踐中才能加以確認(rèn)。分析元素從原子序數(shù)3(鋰)至92(鈾)。感量可達(dá)1...
值得一提的是,通過改變外源基因的插入方向或選用不同的RNA聚合酶,可以控制RNA的轉(zhuǎn)錄方向,即以哪條DNA鏈以模板轉(zhuǎn)錄RNA。這種可以得到同義RNA探針(與mRNA同序列)和反義RNA探針(與mRNA互補(bǔ)),反義RNA又稱cRNA,除可用于反義核酸研究外,還可用于檢測mRNA的表達(dá)水平。在這種情況下,因?yàn)樘结樅桶行蛄芯鶠閱捂?,所以雜交的效率要比DNA-DNA雜交高幾個(gè)數(shù)量級(jí)。RNA探針除可用于檢測DNA和mRNA外,還有一個(gè)重要用途,在研究基因表達(dá)時(shí),常常需要觀察該基因的轉(zhuǎn)錄狀況?!癢i-Fi信道掃描工具”處于被動(dòng)監(jiān)測模式,無需用戶主動(dòng)連接某個(gè)WiFi,需打開手機(jī)WiFi功能時(shí)即可捕獲。青浦區(qū)...
電子探針是運(yùn)用電子所形成的探測針(細(xì)電子束)作為X射線的激發(fā)源來進(jìn)行顯微X射線光譜分析的儀器。分析對(duì)象是固體物質(zhì)表面細(xì)小顆?;蛭⑿^(qū)域,**小范圍直徑為1μm。電子探針可測量的化學(xué)成分的元素范圍一般從原子序數(shù)12(Mg)至92(U),原子序數(shù)大于22的元素可在空氣通路的X射線光譜儀上進(jìn)行測量。電子探針的靈敏度低于X射線熒光光譜儀,原因是電子探針X射線的本底值高于后者,但電子探針的***感量比其他儀器都高。此外,后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線背散射照相、******照相。能兼作透射電鏡、能進(jìn)行電子衍射、能作電子熒光觀察等。不隨意安裝非正規(guī)商家應(yīng)用App、及各類廣告插件App,使用正規(guī)合法App是保護(hù)...
特異性探針有三種形式——cDNA、RNA、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針。RNA探針用途很廣,也容易獲得,但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途。cDNA探針的獲得是,將特定的基因片段裝載到質(zhì)?;蚴删w中,經(jīng)過擴(kuò)增、酶切、純化等復(fù)雜的步驟,才能得到一定長度的cDNA探針。這一過程比較復(fù)雜,有相應(yīng)條件的實(shí)驗(yàn)室才能做到。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下,由核酸合成儀來完成,可廉價(jià)獲得大量的此類探針。質(zhì)量也相對(duì)來說更為穩(wěn)定。由于cDNA探針長度通常為數(shù)百至數(shù)千個(gè)堿基,所以有良好的信號(hào)放大作用,但其滲透性比較差。寡核苷酸探針一般為十?dāng)?shù)個(gè)至數(shù)十個(gè)堿基,滲透性強(qiáng),但信號(hào)放大作用則較差,合成的多相...