2014):."Broad-spectrumtherapeuticsuppressionofmetastaticmelanomathroughnuclearhormonereceptoractivation."Cell5(2014):."Pyrimid
在食品衛(wèi)生領(lǐng)域由于ATP生物發(fā)光技術(shù)無需培養(yǎng)過程,操作簡便、靈敏度高,數(shù)分鐘內(nèi)可得到結(jié)果,具有其它微生物檢測方法無法比擬的優(yōu)勢,是目前檢測微生物更快的方法。熒光素是更受歡迎的多功能生物熒光底物之一。在螢火蟲和幾種其它甲蟲中發(fā)現(xiàn)了螢火蟲熒光酶/熒光素。通...
在細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞凍存是**關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一,尤其在細(xì)胞***、細(xì)胞存儲中對細(xì)胞凍存更有特殊要求,下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分,細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降...
重懸細(xì)胞,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。無血清凍存液注意事項:1、請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進行凍存。2、...
luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示:,在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),生成氧化熒光素(oxyluciferin),分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象。但是該底物熒光素以前大多依賴進口,產(chǎn)品價格昂貴。而且由于該產(chǎn)品容易降解、受潮影...
有些則不需要。降溫盒須恢復(fù)室溫后再使用。根據(jù)普諾賽實驗室細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗,使用程序凍存盒凍存效果良好,沒有凍存盒的同學(xué)可以參照下文方法二和方法三。操作步驟步驟1:配制程序凍存液,放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷步驟2:離心收集對數(shù)生長期的細(xì)胞(貼壁細(xì)胞消化下來離...
這是一種小分子(19kDa)單體酶,具有獨特的底物,其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍。這種新型的報告基因有著***的應(yīng)用前景,為進一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常...
不含血清及動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全成分明確,批次間差異小既適用于一般細(xì)胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞的凍存無需程序降溫,可直接放置-80℃冰箱長期凍存,操作簡單可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,省時...
無需繁瑣費時的程序凍存步驟或價格高昂的程序降溫儀,可直接重懸細(xì)胞后置于-80℃,次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個凍存過程,節(jié)省大量的時間和精力。產(chǎn)品特點:1)即用型細(xì)胞凍存液,隨用隨取,2-8℃穩(wěn)定保存1年以上;2)無需繁瑣的程序凍存步驟或昂貴的程序降溫儀,直接...
凍存成功的兩大必要條件細(xì)胞的生長狀態(tài)按照標(biāo)準(zhǔn)凍存程序操作為什凍存細(xì)胞需要加入保護劑在不附加任何保護劑下直接凍存細(xì)胞時,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細(xì)胞死亡。如向培...
螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶,螢火蟲發(fā)光的腹部或海洋的藍色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世。在生物化學(xué)和分子生物...
常須將培養(yǎng)物進行冷凍保存,并在需要的時候重新復(fù)蘇和培養(yǎng)。目前,細(xì)胞凍存**常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護局的緩慢冷凍法保存細(xì)胞。無血清非程序細(xì)胞凍存液,添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑可防止或延緩細(xì)胞在凍存過程中的沉降,防止細(xì)胞互相擠壓,影響細(xì)胞凍...
酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名FLUORESCEINSODIUM等級:BS物性數(shù)據(jù)編輯播報1.性狀:未確定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相對蒸...
LAR)Promega公司推出的第一種螢光素酶檢測試劑LuciferaseAssaySystem(LAR),為靈敏、非放射性的報告基因檢測拉開了序幕。LAR與螢火蟲螢光素酶(luc)報告基因一起,為研究人員開始了解基因表達調(diào)控因子提供了首要的工具。[1...
這是一種小分子(19kDa)單體酶,具有獨特的底物,其靈敏度比已具備高靈敏度的螢火蟲或海腎螢光素酶系統(tǒng)高約100倍。這種新型的報告基因有著***的應(yīng)用前景,為進一步的技術(shù)開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。[1]2015NanoBRET?技術(shù)NanoLuc?的小體積和非常...
所以非程序降溫凍存方法便應(yīng)運而生,它能極大簡化凍存流程,細(xì)胞可直接置于-80°C冰箱完成凍存過程,更為簡便高效。03細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的比較好時間細(xì)胞在體外生長期間,通常分為三個階段:潛伏期、指數(shù)生長期和平臺期。潛伏期通常是細(xì)胞剛剛傳代,此時細(xì)胞開始貼附基...
本發(fā)明的目的在于提供一種細(xì)胞凍存液,使凍存培養(yǎng)后的細(xì)胞具有成活率高的優(yōu)點,同時滿足凍存液成分簡單、成本低等要求。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案得以實現(xiàn)上述目的。***方面,本發(fā)明提供了一種細(xì)胞凍存液,所述細(xì)胞凍存液的成分如下:將上述組分加入到工業(yè)用水中,用于...
經(jīng)HE染色后觀察細(xì)胞的病理形態(tài)學(xué)。活題動物成像技術(shù)是近期發(fā)展起來的一種新型穩(wěn)定可靠,是檢測動物體內(nèi)分子及細(xì)胞事件的影像檢測技術(shù),強有力手段。利用生物發(fā)光成像(BLI)可以對活題病灶的大小進行無損傷直觀準(zhǔn)確檢測。我們有自己的獨自有機合成實驗室,可以生產(chǎn)合...
DMSO)、甘油、乙二醇、丙二醇、甲醇、乙醇、丙醇、和甲酰胺等。這類保護劑能夠在細(xì)胞冷凍懸液完全凝固之前,穿過細(xì)胞膜滲透到細(xì)胞內(nèi),在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度,降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,從而保護細(xì)胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷。同時,細(xì)胞內(nèi)水分也...
可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性。c.驗證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用,將該序列(通常為啟動子區(qū)域)插入報告基因載體,同時在實驗細(xì)胞***轉(zhuǎn)過表達該轉(zhuǎn)錄因子,可分析轉(zhuǎn)錄因子過表達是否提高熒光素酶活性。d.可以分析信號通路是否***,將該信號通路的...
但是顯然已經(jīng)不能適應(yīng)現(xiàn)今細(xì)胞***的應(yīng)用場景。隨著細(xì)胞***以及細(xì)胞儲存產(chǎn)業(yè)發(fā)展,細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。凍存要求發(fā)生改變,因為凍存細(xì)胞要進行臨床應(yīng)用,所以凍存液成分由原來血清變?yōu)闊o血清,無動物源成分,凍存液中使用的所有原料均應(yīng)符合臨床或...
無蛋白(2)方便:即取即用,無需配制(3)簡潔:無需程序降溫,一步實現(xiàn)細(xì)胞凍存。(4)高效:可一步實現(xiàn)細(xì)胞凍存,細(xì)胞復(fù)活率高,活力強。二、組織凍存試劑1.組織保存液產(chǎn)品概述:用于保存、運輸和細(xì)胞樣品。所有成分對細(xì)胞組織497c364a-6562-42a...
分析純)或無色新鮮甘油步驟(一)細(xì)胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。3.去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;4.離心1000r...
經(jīng)HE染色后觀察細(xì)胞的病理形態(tài)學(xué)?;铑}動物成像技術(shù)是近期發(fā)展起來的一種新型穩(wěn)定可靠,是檢測動物體內(nèi)分子及細(xì)胞事件的影像檢測技術(shù),強有力手段。利用生物發(fā)光成像(BLI)可以對活題病灶的大小進行無損傷直觀準(zhǔn)確檢測。我們有自己的獨自有機合成實驗室,可以生產(chǎn)合...
無蛋白(2)方便:即取即用,無需配制(3)簡潔:無需程序降溫,一步實現(xiàn)細(xì)胞凍存。(4)高效:可一步實現(xiàn)細(xì)胞凍存,細(xì)胞復(fù)活率高,活力強。二、組織凍存試劑1.組織保存液產(chǎn)品概述:用于保存、運輸和細(xì)胞樣品。所有成分對細(xì)胞組織497c364a-6562-42a...
這一過程需要在15min之內(nèi)完成,同時需要不斷進行混合,使得細(xì)胞凍存液能夠在細(xì)胞懸液中均勻分布。隨后,將充分混勻的細(xì)胞溶液分裝至,進行程序性降溫至-80℃后轉(zhuǎn)至液氮中儲存。從液氮系統(tǒng)中取出凍存的充質(zhì)干細(xì)胞樣品,等待1~2min使殘余液氮揮發(fā)之后,迅速放...
操作時切勿使水浸沒凍存管口,以免造成細(xì)胞污染);2)待細(xì)胞凍存管中凍存液完全融化后,立即逐滴加入少量細(xì)胞完全培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞進行混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有8~10mL該細(xì)胞完全培養(yǎng)基的試管中,輕輕混合均勻;1000r/min離心5m...
其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,而鈣離子的存在常???..
白蛋白等從而更好地保護細(xì)胞。有人親測10%血清凍存細(xì)胞,結(jié)果證明是可以的,但高血清比例的凍存液更有助于提高細(xì)胞活力,此外嬌貴的細(xì)胞可以適當(dāng)提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。...
短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-...