白介素6是一種細胞因子,已被證實為B細胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細胞急性蛋白合成的誘導和基于和白介素3協(xié)同作用的生長刺激等,也備受關注. 并且已證實白介素-6與病理學存在穩(wěn)定的相關關系.例如,報道多種疾病的生長因子為白介素-6, 骨髓瘤細胞能合成白介素-6并表達白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測小鼠血清和細胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測范圍 10.94的 700 pg/mL 預期用途。有此測定需用稀釋...
小鼠島樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測試劑盒樣品收集:1.血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內(nèi)試管。2.血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,它的體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。試劑盒是...
小鼠硫氧還蛋白還原酶TrxR試劑盒:1.試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免針眼與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。Elisa生物試驗是一種敏感性很高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已應用在免疫學檢驗的各領域中。在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水。江山粒細胞集落刺激...
化學小分子由于其分子量小,免疫原性差,同系物多等特征,使得免疫檢測試劑盒的開發(fā)難度往往比較大,好的小分子免疫檢測試劑盒更是難以獲得。武漢云克隆科技股份有限公司,從成立之初就將小分子檢測試劑盒作為自己的特色項目進行開發(fā),先后對小分子改造和偶聯(lián)技術、小分子免疫技術以及同系物篩選技術等做了近10年的開發(fā)和積累,在小分子改造、免疫,以及抗體制備方面形成了具有自己特色的技術體系。全球有名生化試劑搜索網(wǎng)站CiteAb頒發(fā)的“很好的ELISA試劑盒供應商”云克隆 SCI引用文獻突破20000+篇。杭州昊鑫生物科技股份有限公司是云克隆浙江省一級代理,公司備有大量**產(chǎn)品。牛胃蛋白酶原A(PGA)ELISA試劑...
ELISA檢測試劑盒的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性的話。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結(jié)果,使...
elisa試劑盒在食品安全檢測中的應用食品中物質(zhì)的測定病菌物質(zhì)是其產(chǎn)生菌在適合產(chǎn)毒的條件下所產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。黃曲霉物質(zhì)是一種致毒性和致病毒性很強的病菌物質(zhì),各國都嚴格限制其在食品中的含量。它是一組化學結(jié)構類似的化合物,目前已分離鑒定出12種。1977年首先采用了elisa試劑盒法來檢測黃曲霉物質(zhì),可以利用小分子黃曲霉物質(zhì)B1結(jié)合蛋白質(zhì)免疫動物得到抗黃曲霉物質(zhì)B1的免疫球蛋白(抗體),并合成了酶標黃曲霉物質(zhì)B1結(jié)合物,建立了直接競爭elisa試劑盒法檢測黃曲霉物質(zhì)B1隨后,美國、英國等國學者分別改進了直接法并建立了間接競爭elisa試劑盒法。黃曲霉物質(zhì)的檢測采用間接競爭法。牛胃蛋白酶原A(P...
小鼠島樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測試劑盒樣品收集:1.血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內(nèi)試管。2.血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,它的體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄??鼓齽┩?..
小鼠島樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測試劑盒樣品收集:1.血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內(nèi)試管。2.血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,它的體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。elis...
elisa試劑盒在食品安全檢測中的應用食品中物質(zhì)的測定病菌物質(zhì)是其產(chǎn)生菌在適合產(chǎn)毒的條件下所產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。黃曲霉物質(zhì)是一種致毒性和致病毒性很強的病菌物質(zhì),各國都嚴格限制其在食品中的含量。它是一組化學結(jié)構類似的化合物,目前已分離鑒定出12種。1977年首先采用了elisa試劑盒法來檢測黃曲霉物質(zhì),可以利用小分子黃曲霉物質(zhì)B1結(jié)合蛋白質(zhì)免疫動物得到抗黃曲霉物質(zhì)B1的免疫球蛋白(抗體),并合成了酶標黃曲霉物質(zhì)B1結(jié)合物,建立了直接競爭elisa試劑盒法檢測黃曲霉物質(zhì)B1隨后,美國、英國等國學者分別改進了直接法并建立了間接競爭elisa試劑盒法。黃曲霉物質(zhì)的檢測采用間接競爭法。elisa試劑盒具...
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法:例如:ELISA檢測試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領域的長足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種敏感性非常高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已應用在免疫學檢驗的各領域中。elisa試劑盒濃縮方式:氮氣吹干除雜,壓縮空氣吹干除雜。龍泉鐵蛋白(FE)檢測試劑盒(酶聯(lián)...
小鼠末端補體復合體試劑盒操作步驟:1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品比較終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒之后棄去,如此重復5次,拍干。elis...
雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應:...
關于elisa試劑盒溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:要保證在設定的溫度下有足夠的反應時間。一般來說,加完樣本和/或反應試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,其孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達到37℃,從而適當延長板條在溫箱中的放置時間。公司...
良好的elisa試劑盒板應該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯elisa試劑盒板由于原料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大,因此,每一批號的elisa試劑盒板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被elisa試劑盒板各孔,洗滌后每孔內(nèi)加入適當稀釋度的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后,分別測每孔溶液的吸光度??刂品磻獥l件,使其各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。計算全部讀數(shù)的平均值。所有單個讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應小于10%。與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯...
黃曲霉有害元素試劑盒主要是用來檢測黃曲霉的一種經(jīng)濟、快捷的檢測初篩工具,現(xiàn)在當前市面上主要有黃曲霉有害元素B1試劑盒、黃曲霉有害元素M1試劑盒、黃曲霉有害元素總量試劑盒,中國試劑盒網(wǎng)是專業(yè)的酶聯(lián)免疫試劑盒集中展示平臺,集中匯聚了各種菌體有害元素試劑盒、藥物殘留試劑盒、微生物檢測試劑盒、獸藥殘留試劑盒等產(chǎn)品。GB2761-2011中規(guī)定:食品中黃曲霉有害元素B1在玉米、玉米面、玉米制品、花生及制品、花生油與玉米油中的限量標準為20μg/kg,在稻谷、糙米、大米、食用油脂(花生油及玉米油除外)中為10μg/kg,在其他糧食、豆類、堅果及制品、以糧食為主要原料的調(diào)味品中為5μg/kg,在嬰兒食品中為...
這里來說說檢測試劑盒。對于大部分人來說,免疫組化或免疫印跡等的操作方法還是過于復雜。而且實驗過程中部分樣品需要變性處理,人為的把有空間結(jié)構和有活性的蛋白變成線性和失去或部分失去活性的蛋白,再通過抗體去結(jié)合,它的好處在于只要是有目的蛋白存在,不管是有活力或無活力的形式,都是可以通過抗體識別出來的。那么有沒有一種更簡單易于操作的方法,并且可以在蛋白天然活性狀態(tài)下直接檢測的而不需對樣本進行預處理呢?酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和化學發(fā)光免疫分析(CLIA)就是這樣的能識別天然蛋白操作簡單的近代免疫學檢測方法。用酶標儀在450nm波長處測OD值,小鼠酸脫氫酶α(PDHa)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒濃度。...
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結(jié)果,使測定方法達到很...
elisa試劑盒試劑盒用于盛放檢測化學成分、藥物殘留、病毒種類等化學試劑的盒子。一般的醫(yī)院、制藥企業(yè)使用。完整的elisa試劑盒試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);(5)結(jié)合物及標本的稀釋液;(6)洗滌液,在板式elisa試劑盒中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;(7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的較為終體積而異,在板式elisa試劑盒中一般采用3mol/L。小鼠酸脫氫酶試劑盒實...
elisa試劑盒的好壞會直接影響實驗的結(jié)果,所以購買時一定要仔細了解清楚,那具體是那些因素會導致elisa試劑盒變質(zhì)呢?接下來跟隨elsa試劑盒—起來了解—下。方法影響:elisa測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、競爭抑制法,其中競爭抑制法因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結(jié)果重復性較差,質(zhì)量較難控制。操作因素:elisa操作步驟復雜,操作不當將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。對于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,防止反復凍融造成試劑的失效。儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊...
大鼠ELISA試劑盒的作用及若干特點:肽基脯氨酰順反異構酶(PPI)ELISA試劑盒可用作ELISA測定的標本十分普遍,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。肽基脯氨酰順反異構酶(PPI)ELISA試劑盒有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些分泌物)。肽基脯氨酰順反異構酶(PPI)ELISA試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。ELISA試劑盒檢測范圍:人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動物細胞因子、植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、hormone內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與...
安全性:1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反...
elisa試劑盒封閉(blocking)是繼包被之后用高濃度的無關蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。抗原或抗體包被時所用的濃度較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的空隙,封閉就是讓大量不相關的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥在elisa試劑盒其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。封閉的手續(xù)與包被相類似。較為常用的封閉劑是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封閉劑的。脫脂奶粉也是一種良好的封閉劑,其比較大的特點是價廉,可以高濃度使用(5%)。elisa測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法。金華脂聯(lián)素(ADPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)小鼠磷脂酰絲氨酸(P...
人粒細胞集落刺激因子受體(GCSFR)檢測試劑盒說明]:1.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。請勿提前將酶標板從包裝袋里拿出。2.由于操作者不熟練、操作失誤或讀數(shù)儀程序選用錯誤等有可能會導致錯誤結(jié)果的產(chǎn)生。請使用者使用該產(chǎn)品前仔細閱讀說明書,調(diào)試使用配備有450±10nm濾光片的酶標儀,且該酶標儀測量范圍在0.001-3.000O.D.或之上。3.同一使用者在使用同一產(chǎn)品時,如不同時間訂購,也可能會因不同批次的少量差異產(chǎn)生不同結(jié)果,因此建議使用者在每次使用前均進4.試劑盒在出廠前均經(jīng)過嚴格檢測,但由于運輸條件及各實驗室條件差異,可能會造成實驗結(jié)果...
小鼠酸脫氫酶(PDH)ELISA試劑盒注意事項:1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。2.洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。4.底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。8.任何反應的試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中...
蔬菜農(nóng)藥殘留已成為我國人民膳食的主要食品安全問題,也是影響我國農(nóng)產(chǎn)品出口的一個重要因素。常用的農(nóng)藥殘留檢測方法如薄層層析法和氣相色譜法已不適應目前的檢是要求,而elisa試劑盒法在農(nóng)藥的檢測方面已得到了初步應用和發(fā)展。農(nóng)藥屬于小分子物質(zhì),它是一種半抗原,無免疫原性。檢測時首先要根據(jù)農(nóng)藥的結(jié)構適擇合成路線,人工合成抗原,然后免疫小鼠,利用雜交瘤技術則可制備出針對農(nóng)藥小分子的McAh。由于McAh可以大量產(chǎn)生,且McAb來自統(tǒng)一細胞,質(zhì)地均勻,易于標準化管理,比較容易制備試劑盒??捎胑lisa試劑盒檢測的農(nóng)藥殘留種類包括:有機磷農(nóng)藥、除蟲菊酯類農(nóng)藥、有機氯類農(nóng)藥。全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜...
人淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)elisa檢測試劑盒注意事項:1.試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用之后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免針眼與更后一孔之見的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復性;一般加樣時間控制在10分鐘內(nèi),如果樣本數(shù)量過多,可使用多道移液器。3.孵育:樣品要在密閉的容器內(nèi)進行孵育,嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。4.洗滌:洗滌過程中反應孔中的殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,同時要消除板底殘留的液體和手指痕跡,避免影響后的酶標儀讀數(shù)。在吹樣本積時,針頭應在液面上空,避免與樣本...
elisa試劑盒試劑盒用于盛放檢測化學成分、藥物殘留、病毒種類等化學試劑的盒子。一般的醫(yī)院、制藥企業(yè)使用。完整的elisa試劑盒試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);(5)結(jié)合物及標本的稀釋液;(6)洗滌液,在板式elisa試劑盒中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;(7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的較為終體積而異,在板式elisa試劑盒中一般采用3mol/L。依次加入生物素化的抗...
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不只適用于臨床標本的檢查,而且由于一日之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不只可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大, 可概括四個方面:1、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉...
間接elisa試劑盒法檢測血清抗體包被:將抗原按照所需的濃度用PBS(pH=7.2±0.1)或1×碳酸鹽緩沖液(pH=9.6)稀釋,100ul/孔加入到96孔elisa試劑盒板中,4℃孵育過夜后使用洗板機用洗液PBS'T洗5次,甩干板上殘余液體。封閉:每孔加入200ul封閉液,室溫孵育1h,用同樣方法洗板。加一抗:每孔加入100ul稀釋好的待檢血清,室溫孵育1h,用同樣方法洗板。加二抗:每孔加入100ul已經(jīng)稀釋好的二抗,室溫孵育1h,用同樣方法洗板。加底物:將新配好的TMB緩沖液以100ul/孔加入到elisa試劑盒板中,室溫條件下孵育15min。終止:每孔加入50ul3MH2SO4,輕輕的...
安全性:1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反...