單顆粒冷凍電鏡技術(shù)二維圖像分析——顆粒圖像的匹配與分類(lèi)：二維顆粒圖像的分類(lèi)是獲取三維結(jié)構(gòu)過(guò)程的第一步。對(duì)二維圖像的分析包括兩部分：顆粒圖像的匹配和顆粒圖像的分類(lèi)。匹配的過(guò)程通常會(huì)對(duì)顆粒圖像應(yīng)用一些變換操作，通過(guò)關(guān)聯(lián)函數(shù)去判斷不同顆粒圖像之間的相似程度。圖像匹配...

冷凍電子顯微鏡技術(shù)步驟之圖像采集：冷凍的樣品通過(guò)專(zhuān)門(mén)的設(shè)備一冷凍輸送器轉(zhuǎn)移到電鏡的樣品室。在照相之前，必須觀察樣品中的水是否處于玻璃態(tài)，如果不是則應(yīng)重新制備樣品。由于生物樣品對(duì)高能電子的輻射敏感，照相時(shí)必須使用較小曝光技術(shù)。經(jīng)過(guò)透射電子顯微鏡中一系列復(fù)雜的過(guò)程...

單顆粒冷凍電鏡技術(shù)二維圖像分析——顆粒圖像的匹配與分類(lèi)：二維顆粒圖像的分類(lèi)是獲取三維結(jié)構(gòu)過(guò)程的第一步。對(duì)二維圖像的分析包括兩部分：顆粒圖像的匹配和顆粒圖像的分類(lèi)。匹配的過(guò)程通常會(huì)對(duì)顆粒圖像應(yīng)用一些變換操作，通過(guò)關(guān)聯(lián)函數(shù)去判斷不同顆粒圖像之間的相似程度。圖像匹配...

冷凍電子顯微鏡技術(shù)中單顆粒重構(gòu)技術(shù)：該技術(shù)也叫做單顆粒分析，主要適用于結(jié)構(gòu)具有全同性的生物大分子的結(jié)構(gòu)解析，蛋白質(zhì)的分子量通常要求在100KD以上，在顆粒數(shù)目足夠多的情況下，理論上其分辨率可以達(dá)到原子水平。該方法的圖像處理和三維重構(gòu)計(jì)算過(guò)程如下:從原始的電鏡照...

冷凍電鏡技術(shù)原理之電子斷層掃描成像技術(shù)：通過(guò)在顯微鏡內(nèi)傾轉(zhuǎn)樣品從而收集樣品多角度的電子顯微圖像并對(duì)這些電子顯微圖像根據(jù)傾轉(zhuǎn)幾何關(guān)系進(jìn)行重構(gòu)的方法稱(chēng)為電子斷層掃描成像技術(shù)。該方法主要應(yīng)用于細(xì)胞及亞細(xì)胞器，以及沒(méi)有固定結(jié)構(gòu)的生物大分子復(fù)合物(分子量范圍為800kD...

冷凍電子顯微技術(shù)學(xué)解析生物大分子及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的中心是透射電子顯微鏡成像,包括樣品制備、圖像采集、圖像處理及三維重構(gòu)等幾個(gè)基本步驟。三維重構(gòu)：數(shù)據(jù)處理的較終目的是為了獲得生物樣品的三維質(zhì)量密度圖，由二維圖像推知三維結(jié)構(gòu)的方法即三維重構(gòu)。其理論原理是在1968年由D...

血清中絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?1.將冷凍保存的血清取出后，置4℃冰箱靜止過(guò)夜；2.待血清融化后，上下顛倒，輕輕混勻，繼續(xù)4℃2-3小時(shí)；3.輕輕吸取上層血清，分裝，余底下50ml左右；4.低速離心5分鐘，去掉沉淀。若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該怎么處...

胎牛血清對(duì)細(xì)胞貼壁中的作用：在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，大部分來(lái)自實(shí)體組織感官的細(xì)胞會(huì)貼壁。它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)時(shí)，也是與其他細(xì)胞或者細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合的，貼壁對(duì)維持細(xì)胞的良好形態(tài)和促進(jìn)細(xì)胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細(xì)胞，其增殖率也較高。人的造血干細(xì)胞培養(yǎng)，更是需要...

胎牛血清制備：用止血鉗夾住血管，切開(kāi)1厘米左右的切口進(jìn)行插管，插好管后打開(kāi)血管的止血鉗，讓牛血順采的血管流入另一個(gè)潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌（180℃2小時(shí)）后，按無(wú)菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口，于采的血前半小時(shí)放入3...

胎牛血清對(duì)細(xì)胞貼壁中的作用：在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，大部分來(lái)自實(shí)體組織感官的細(xì)胞會(huì)貼壁。它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)時(shí)，也是與其他細(xì)胞或者細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合的，貼壁對(duì)維持細(xì)胞的良好形態(tài)和促進(jìn)細(xì)胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細(xì)胞，其增殖率也較高。人的造血干細(xì)胞培養(yǎng)，更是需要...

如何區(qū)別真假胎牛血清：1、血紅蛋白，標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl，顏色越紅，數(shù)值越高，反之，數(shù)值越低。2、pH，國(guó)產(chǎn)血清，大多高于7.5，進(jìn)口胎牛血清，大多低于7.5，具體原因未知，可能和牛齡有關(guān)，這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。3、微生物。包括細(xì)菌、霉菌、支原體...

胎牛血清中沉淀物該如何處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但較普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。所有胎牛...

胎牛血清：解凍胎牛血清時(shí)，請(qǐng)按照規(guī)定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。請(qǐng)勿將胎牛血清置于37℃太久。若...

胎牛血清：胎牛血清初次解凍后，應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝，分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清，應(yīng)在一周內(nèi)用完。為保證細(xì)胞培養(yǎng)的較佳效果，血清和培養(yǎng)基的配置，應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液，應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免反復(fù)凍融，避免在4°C或更高溫度儲(chǔ)...

胎牛血清：胎牛血清參與細(xì)胞培養(yǎng)，是細(xì)胞生長(zhǎng)天然的培養(yǎng)基，它為細(xì)胞提供生長(zhǎng)因子、結(jié)合蛋白、脂質(zhì)、礦物質(zhì)、黏附和鋪展因子等來(lái)促進(jìn)體外細(xì)胞培養(yǎng)。透析胎牛血清主要用于可能需要關(guān)注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個(gè)領(lǐng)域：蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細(xì)胞通訊以及報(bào)告基因細(xì)胞...

選購(gòu)FBS應(yīng)考慮哪些標(biāo)準(zhǔn)？產(chǎn)品檢測(cè)，每款FBS在生產(chǎn)上市之前，必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè)。質(zhì)控環(huán)節(jié)必不可少，以確保上市的血清符合規(guī)定合乎規(guī)格，而血清產(chǎn)品分析證書(shū)（COA）就是FBS質(zhì)控的重要體現(xiàn)。在COA中，常規(guī)的檢測(cè)指標(biāo)包括內(nèi)的毒性、總蛋白、細(xì)菌、病毒等，另外總...

用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法：包括以下步驟：采集懷孕母牛的胎牛血液獲得血漿，具體步驟如下：采用含有體積含量4-6%葡萄糖的注射液、含有質(zhì)量含量0.2-0.6%檸檬酸鈉的水溶液進(jìn)行混合，將上述兩者混合后的混合液A置入取血容器內(nèi)充分滋潤(rùn)容器內(nèi)壁；將胎牛血...

為什么要熱滅活胎牛血清?胎牛血清加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。開(kāi)啟的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，開(kāi)啟淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞，昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活胎牛血清。為什么儲(chǔ)存在冰箱中的胎牛血清會(huì)出現(xiàn)少量沉...

如何區(qū)別真假胎牛血清：沉淀，很多血清客戶(hù)，會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀，從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題，這是沒(méi)有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多，和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國(guó)產(chǎn)的血清，大多來(lái)自北方，由于價(jià)格低廉，保存環(huán)...

胎牛血清：胎牛血清初次解凍后，應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝，分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清，應(yīng)在一周內(nèi)用完。為保證細(xì)胞培養(yǎng)的較佳效果，血清和培養(yǎng)基的配置，應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液，應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免反復(fù)凍融，避免在4°C或更高溫度儲(chǔ)...

胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)證明，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活胎牛血清，對(duì)于大多數(shù)的細(xì)胞而言都是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或完全沒(méi)有任何作用，甚至可能因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，從而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成...

如何區(qū)別真假胎牛血清：沉淀，很多血清客戶(hù)，會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀，從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題，這是沒(méi)有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生，對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多，和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國(guó)產(chǎn)的血清，大多來(lái)自北方，由于價(jià)格低廉，保存環(huán)...

胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)證明，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活胎牛血清，對(duì)于大多數(shù)的細(xì)胞而言都是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或完全沒(méi)有任何作用，甚至可能因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，從而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成...

細(xì)胞培養(yǎng)用到的胎牛血清需要滅活嗎：細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清是不可或缺重要培養(yǎng)基，胎牛血清中含有諸多細(xì)胞生長(zhǎng)因子，維生素，氨基酸等物質(zhì)。我們常會(huì)看到胎牛血清的標(biāo)注上有對(duì)產(chǎn)品滅活也有沒(méi)有滅活的，胎牛血清為什么不需要熱滅活便可以使用。事實(shí)上，熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等...

如何區(qū)別真假胎牛血清：外觀，拿到血清，較先接觸的是血清外觀，對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來(lái)說(shuō)，外觀的判斷尤為重要，顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl，實(shí)際上，血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無(wú)直接影響，...

如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，應(yīng)該如何去除？胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因，但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后，也會(huì)存在于胎牛血清中，這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物，并不影響胎牛血清本...

胎牛血清(FBS)是來(lái)自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分，不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子，但含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)至關(guān)重要的營(yíng)養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長(zhǎng)因子對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的維持和生長(zhǎng)至關(guān)重要。FBS還含有多種小分子，如氨基酸、糖、脂質(zhì)和Ho...

胎牛血清：胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)超過(guò)半個(gè)世紀(jì)了，20世紀(jì)50年代末TheodorePuck在細(xì)胞和組織培養(yǎng)中初次加入胎牛血清（FBS）來(lái)刺激細(xì)胞生長(zhǎng)。后來(lái)人們發(fā)現(xiàn)，由于胎牛未進(jìn)食過(guò)母乳，所以IgG的含量極低，不會(huì)阻礙細(xì)胞生長(zhǎng)，而且胎牛血清中含有豐富的促進(jìn)細(xì)胞...

選購(gòu)胎牛血清：為了保證胎牛血清產(chǎn)品的均一性和穩(wěn)定性，胎牛血清生產(chǎn)需遵循相關(guān)規(guī)定進(jìn)行操作。一般來(lái)說(shuō)，胎牛血清制備需經(jīng)過(guò)以下幾個(gè)步驟：采集，離心，分離，無(wú)菌過(guò)濾，用來(lái)制作血清的牛血，是通過(guò)采集多頭牛的血液混合而成的，因此，想要在同一批次得到大批量品質(zhì)穩(wěn)定的血清，獲...

胎牛血清的生產(chǎn)工藝：透析胎牛血清，顧名思義，需經(jīng)過(guò)透析。它是在4°C下用特定的透析膜對(duì)血清在0.15MNaCl中透析。由于該透析膜只允許10kDa以下的小分子穿過(guò)，在滲透壓的作用下，這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化...