總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如，從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色，可見(jiàn)許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分)，兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S...

無(wú)血清細(xì)胞凍存：在細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞凍存是較關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細(xì)胞治好、細(xì)胞存儲(chǔ)中對(duì)細(xì)胞凍存更有特殊要求，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對(duì)細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分，細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程...

動(dòng)物細(xì)胞RNA提?。?、懸浮細(xì)胞：可直接離心后棄掉培養(yǎng)基，用無(wú)菌PBS清洗1~2遍后，再用適量PBS懸浮起來(lái)，然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬(wàn)不要完全棄掉液體后，往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液，這樣會(huì)使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè)，從而限制沉...

眾所周知，RNA提取是一項(xiàng)困難的工作。常見(jiàn)的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外，不同的樣品類型有自己獨(dú)特的特性，需要特別注意。例如，微生物(如革蘭氏陽(yáng)性/陰性細(xì)菌、菌類、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬，不易被化學(xué)和酶解。其他樣本類型，如糞便和植物...

細(xì)胞凍存秘籍：1.在倒置相差顯微鏡上每隔幾分鐘檢查酶處理的進(jìn)展情況。一旦細(xì)胞變圓，輕輕敲擊細(xì)胞瓶使其脫離塑料表面。加入5mL含血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基滅活胰酶?？赡苄枰?jiǎng)×业囊埔翰僮鱽?lái)使培養(yǎng)容器底部的剩余細(xì)胞脫落，或?qū)⒓?xì)胞團(tuán)塊分解成單細(xì)胞懸浮液。胰酶的去除或失活對(duì)于冷...

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn)，博取眾家之長(zhǎng)，根據(jù)多年來(lái)市場(chǎng)反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級(jí)和改良得來(lái)。具有操作步驟少，實(shí)驗(yàn)快捷，RNA產(chǎn)量純度高，充分滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要，適用提取樣品普遍等特點(diǎn)。產(chǎn)量：每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不...

DNA和RNA的鑒別染色：利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA。吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定，非固定細(xì)胞核酸，或作溶酶體的一種標(biāo)記。觀察死亡細(xì)胞熒光變色性變化以及區(qū)別分裂細(xì)胞和靜止細(xì)胞群體。雖然測(cè)定DNA和RNA含量時(shí)較難獲得好的重復(fù)性結(jié)果，但該...

植物RNA提取過(guò)程：植物組織成分相對(duì)于動(dòng)物組織來(lái)說(shuō)復(fù)雜多樣，因此其RNA的分離和純化的難度也隨之加大，如果要完美的數(shù)據(jù)結(jié)果，那么提取純度高、完整性好的RNA就成了關(guān)鍵所在。植物RNA的提取一般會(huì)經(jīng)歷以下幾個(gè)過(guò)程：1.破碎細(xì)胞壁。2.裂解細(xì)胞膜。3.雜質(zhì)去除，包...

由歐洲多國(guó)細(xì)胞外囊泡領(lǐng)域的學(xué)者發(fā)起并成立的國(guó)際細(xì)胞外囊泡協(xié)會(huì)（ISEV）于2014年在協(xié)會(huì)會(huì)刊JournalofExtracellularVesicles發(fā)表了一個(gè)指導(dǎo)性意見(jiàn)，也就是我們常說(shuō)的MISEV2014。2018版《指導(dǎo)要求》進(jìn)行了修訂。2018版的《...

植物RNA快速提取試劑盒：是一種單相RNA快速提取試劑盒，可高效裂解堅(jiān)固的植物細(xì)胞并強(qiáng)烈壓制RNA酶活性。細(xì)胞破碎之后，植物多糖立即被PlantRNAtrip獨(dú)特的成分結(jié)合。離心抽提步驟將RNA與滅活的RNA酶、蛋白、基因組DNA污染分離，并清理植物多糖多酚以...

細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn)：1.有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA，與細(xì)胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式。3.提取的RNA，品質(zhì)高，產(chǎn)量多。4.試劑盒不含苯酚，可提取所有RNA（含RNA）。5.純化的RNA可用于任何應(yīng)用，包括RT-PCR，qRT-PC...

無(wú)血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)：簡(jiǎn)單、方便、快捷。1.即用型，無(wú)需現(xiàn)配，可直接使用。2.可孔板原位凍存，可微量?jī)龃?，無(wú)需使用凍存管。3.無(wú)需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡(jiǎn)單。4.不含血清，較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清，批次間差異小。6.無(wú)需...

細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)：1、各種細(xì)胞對(duì)凍存速度的要求也不一樣；上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞耐受性可能大些，骨髓干細(xì)胞－2~－3℃/分鐘合適；胚胎細(xì)胞耐受性較小，不宜太快?？傊谝婚_始時(shí)，下降速度不能超過(guò)－10℃/分鐘。2、用什么防護(hù)劑合適和用量多大，要依細(xì)胞而定，初代培養(yǎng)...

RNA可分為：mRNA：在蛋白分子合成過(guò)程中，作為“信使”分子，將基因組DNA的遺傳信息（即堿基排列順序）傳遞至核糖體，使核糖體能夠以其堿基排列順序摻入互補(bǔ)配對(duì)的tRNA分子，進(jìn)而合成正確的肽鏈，實(shí)現(xiàn)遺傳信息向蛋白質(zhì)分子的轉(zhuǎn)化。tRNA：把氨基酸搬運(yùn)到核糖體上...

細(xì)胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng)：1、凍存細(xì)胞是為了留種，所以要選擇高濃度的細(xì)胞量進(jìn)行凍存。正常情況下，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到1*105/ml時(shí)即可凍存，具體是多少量主要根據(jù)個(gè)人觀察。2、二甲基亞砜（DMSO)因?yàn)榇┩讣?xì)胞的能力較強(qiáng)，因此作為常用的凍存劑，也可以叫做細(xì)胞...

提取RNA的詳細(xì)步驟：首先，將研缽晾干夠，倒入1/3體積的液氮，加入0.2g均質(zhì)的植物材料，充分研磨后轉(zhuǎn)入一個(gè)含有300微升GMT的1.5ml的離心管中，搖勻。然后，加入30微升2mol/lNaAc進(jìn)行搖勻，加入300微升酸酚搖勻，加入100微升的氯仿?lián)u勻。然...

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過(guò)一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物，多角度進(jìn)行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡(jiǎn)稱TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡(jiǎn)稱NTA，該方法能...

rRNA是細(xì)胞內(nèi)的一種基本RNA，與r蛋白一起構(gòu)成蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所—核糖體。隨著rRNA基因序列越來(lái)越了解，其在生物研究中也的得到了更普遍的應(yīng)用，主要表現(xiàn)在生物進(jìn)化研究和分子流行病研究。（1）rRNA在生物進(jìn)化上的研究。rRNA具有高度保守性，且普遍存在于各種...

總RNA提取試劑是一種快速?gòu)慕M織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過(guò)程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性；加入氯仿后離心，RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離，隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于R...

RNA提取試劑的選擇：選擇合適的提取試劑是較重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時(shí)，操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用。對(duì)于動(dòng)物組織、簡(jiǎn)單的植物材料、各種微生物、培養(yǎng)細(xì)胞的totalRNA提取，Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型...

外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）。超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)），純度也受到質(zhì)疑；此外...

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑，內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速裂解細(xì)胞，壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持R...

植物RNA快速提取試劑盒：是一種單相RNA快速提取試劑盒，可高效裂解堅(jiān)固的植物細(xì)胞并強(qiáng)烈壓制RNA酶活性。細(xì)胞破碎之后，植物多糖立即被PlantRNAtrip獨(dú)特的成分結(jié)合。離心抽提步驟將RNA與滅活的RNA酶、蛋白、基因組DNA污染分離，并清理植物多糖多酚以...

酵母RNA的提取方法：濃鹽法。酵母菌外層是厚達(dá)1.2μm的細(xì)胞壁，其化學(xué)成分是葡聚糖（30-40%）和甘露聚糖（30%），此外，脂類8.5-13.5%，蛋白質(zhì)6-8%，還含有幾丁質(zhì)，酵母菌的葡聚糖，分子是為240000道爾頓，是一種分枝聚合物，葡聚糖與甘露糖之...

細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的：細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似，機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成，但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜，內(nèi)部任何的物理?yè)p傷對(duì)于它都是致命的。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中，隨著溫度的降低，細(xì)胞內(nèi)外的水份都會(huì)結(jié)冰，所形成...

RNA快速提取試劑盒：隨著對(duì)小RNA的研究的逐漸深入，小RNA的分離逐漸成為一種需求，百泰克利用雄厚的研發(fā)實(shí)力，開發(fā)出高效快捷的小RNA分離純化試劑盒，對(duì)各種不同來(lái)源的樣品（動(dòng)物、植物、細(xì)胞等）均取得滿意的效果。miRNA提取試劑盒采用自創(chuàng)的結(jié)合洗脫技術(shù)，對(duì)小...

眾所周知，RNA提取是一項(xiàng)困難的工作。常見(jiàn)的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外，不同的樣品類型有自己獨(dú)特的特性，需要特別注意。例如，微生物(如革蘭氏陽(yáng)性/陰性細(xì)菌、菌類、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬，不易被化學(xué)和酶解。其他樣本類型，如糞便和植物...

RNA的全稱是什么？核酸是一個(gè)叫米歇爾的瑞士青年化學(xué)家發(fā)現(xiàn)的，那還是1869年的事，到了1909年，一位美國(guó)生化學(xué)家又發(fā)現(xiàn)核酸中的碳水化合物有兩種核糖分子，因此核酸也有兩種，一種叫脫氧核糖酸，英文縮寫就是DNA，另一種是核糖核酸，英文縮寫是RNA。DNA一般只...

細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)：1.為保持細(xì)胞較大存活率，一般都采用慢凍存融的方法。2.凍存物距液氮面越近溫度越低。標(biāo)準(zhǔn)的低凍速度為－1℃~12℃/分鐘，當(dāng)溫度下降達(dá)－25℃時(shí)，下降速度可增至－5~－10℃/分鐘，到－100℃時(shí)則可迅速凍入液氮中。因此要適當(dāng)掌握凍存物下降...

以前在另一家實(shí)驗(yàn)室的時(shí)候，凍存細(xì)胞根本就沒(méi)有講究這些標(biāo)準(zhǔn)操作。凍存的細(xì)胞有293T、PT67、C2C12、MEF(鼠胚胎成纖維細(xì)胞）、HelaS3、HelaD、U2OS、HKC、RK3E、ECO、H292、HSY、COS7、SupT1等。將細(xì)胞酶消化后直接參與...