細(xì)胞凍存的基本原理：細(xì)胞代謝過(guò)程需要各種蛋白酶的參與，而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時(shí)會(huì)集體不工作，低溫貯藏的目的是通過(guò)較低溫使細(xì)胞代謝活動(dòng)近乎停止。細(xì)胞因此進(jìn)入休眠狀態(tài)，使細(xì)胞“不會(huì)老”，所以可以長(zhǎng)期保存。因?yàn)閮鋈谶^(guò)程對(duì)所有細(xì)胞和組織都是有一定傷害的，因...

所含化學(xué)成分明確，無(wú)動(dòng)物源性成分，可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存并長(zhǎng)期在-80℃冰箱保存，保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷，適用于大多數(shù)常規(guī)細(xì)胞。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細(xì)胞及干細(xì)胞**凍存液，可進(jìn)一步提高原代細(xì)胞和干細(xì)胞凍存效率。產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)1、省去繁瑣的降溫...

鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式，為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片，以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞，...

鼠尾膠原：鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1、制備鼠尾膠原（兩個(gè)同學(xué)一組操...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10PBS，使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。B．含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如...

外泌體的提取分離：1、超濾離心。由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質(zhì)，利用不同截留相對(duì)分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡(jiǎn)單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法。2、磁珠免疫...

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過(guò)夜。在無(wú)菌條...

除了讓細(xì)胞更好貼上去，鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠，這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長(zhǎng)環(huán)境，讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長(zhǎng)。當(dāng)然，除了這些，耗子尾汁還能做到很多事情，只需要打開(kāi)網(wǎng)站——知網(wǎng)，輸入鼠尾膠原蛋白就能看到，例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺...

膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一，不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸，有脯氨酸和羥脯氨酸。...

外泌體（Exosomes）是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及...

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接...

無(wú)血清細(xì)胞凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞），大部分的干細(xì)胞，凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存。不含動(dòng)物源性蛋白，不含血清成分，可有效減少各類(lèi)細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分，提高細(xì)胞...

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)...

RNA提取真正需要注意的要點(diǎn)：你的植物組織樣本采樣、保存正常嗎？組織裂解充分了嗎？組織起始量是否過(guò)大？起始量過(guò)大的話(huà)，他們得帶進(jìn)去多少RNase呀，導(dǎo)致裂解液不能充分壓制內(nèi)源性的RNase，失敗就在預(yù)料之中！你的細(xì)胞活性好嗎？細(xì)胞都到衰亡期了，你提什么RNA呀...

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下，其腱性組織被水解成膠凍狀溶液，從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上，可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(，其生物力學(xué)強(qiáng)度極差，一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-...

細(xì)胞凍存秘籍：細(xì)胞凍存對(duì)于大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞，通常每分鐘下降-1至-3℃?？刂评鋮s過(guò)程的較好方法是使用程序降溫系統(tǒng)。如果沒(méi)有程序降溫系統(tǒng)，可以使用程序降溫盒，然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過(guò)夜。雖然這種方法適用于許多細(xì)胞系，但不能提供可控的，均勻的或可重復(fù)的...

細(xì)胞凍存時(shí)間和操作步驟：1、首先我們需要凍存培養(yǎng)液，通常細(xì)胞凍存液含10%的DMSO，或者是甘油、10-20%的小牛血清；、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，并且還需要用PBS進(jìn)行清洗，需要注意在這里要丟棄掉舊的細(xì)胞凍存液；3.去除PBS，加入適量的胰蛋白酶，以覆蓋住培養(yǎng)皿表...

核糖核酸（縮寫(xiě)為RNA，即RibonucleicAcid），存在于生物細(xì)胞以及部分病菌、類(lèi)病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長(zhǎng)鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種，即A（腺嘌呤）、G（鳥(niǎo)嘌呤）、C...

外泌體可通過(guò)流式、WB（檢測(cè)指標(biāo)有CD9,CD63,CD81）、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測(cè)，普遍應(yīng)用于藥物載體、疾病診斷marker、精細(xì)醫(yī)療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小，樣本含量低，提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾...

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異。止血材料是常見(jiàn)的醫(yī)療器械產(chǎn)品。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點(diǎn)；同時(shí)還存在著容易與傷口粘附不易去除，導(dǎo)致傷口潰爛，或者因?yàn)檎掣?..

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過(guò)一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物，多角度進(jìn)行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡(jiǎn)稱(chēng)TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡(jiǎn)稱(chēng)NTA，該方法能...

外泌體的提取方法：1、色譜法。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對(duì)關(guān)系而對(duì)溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔，只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過(guò)色譜柱，首先被流動(dòng)相洗脫出來(lái)；小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞，在柱中受到更強(qiáng)地滯留...

無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液保存條件：儲(chǔ)存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起，為期2年。3個(gè)月以上沒(méi)有使用凍存液計(jì)劃時(shí)，盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過(guò)程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低，推薦將產(chǎn)品分裝成小管后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無(wú)血...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：通過(guò)醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞。也可用于制備三維膠，模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境，使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。1，在使用鼠膠原蛋白型包被...

RNA提取：預(yù)備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無(wú)菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品，如沒(méi)有開(kāi)封使用過(guò)，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙...

外泌體，是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn)，但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物。然而較近幾年，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸，能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞...

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無(wú)需耗時(shí)的超速離心，過(guò)濾或特殊注射器；無(wú)需沉淀試劑，也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng)；無(wú)需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白；...

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無(wú)需耗時(shí)的超速離心，過(guò)濾或特殊注射器；無(wú)需沉淀試劑，也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng)；無(wú)需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白；...

無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白，能減少各類(lèi)病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，也適用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色：1.高安全性，...

外泌體的提取方法，先用含無(wú)外泌體血清的培養(yǎng)基對(duì)人脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)，這樣可使干細(xì)胞處于正常生長(zhǎng)狀態(tài)，不會(huì)被克制生長(zhǎng)增殖，其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體，然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理、再...