TaqMan熒光探針是一種寡核苷酸探針,熒光基團連接在探針的5’末端,而淬滅劑則在3’末端。在PCR反應(yīng)體系中加入2種不同熒光標(biāo)記的探針,它們可以分別與2個等位基因完全配對。正常情況下,由于探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團緊鄰在一起,熒光被淬滅。隨著PCR有效的進行,與模板完全配對的探針逐步被TaqDNA聚合酶5’——3’外切酶活性切割,致使探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團分離,淬滅效應(yīng)解除,報告熒光基團被***,檢測到熒光信號,相反,如果模板不能完全配對的探針(**另一種等位基因)不能被有效切割,因此檢測不到熒光信號,從而實現(xiàn)SNP位點的分型檢測。翼和生物推出了多重長PCR捕獲建庫的方案,有效解決了高同源區(qū)段SNP/序列分析的難題。安徽SNP基因分型公司
SNP全稱Single Nucleotide Polymorphism,即單核苷酸多態(tài)性,是指在基因組DNA序列中由于單個核苷酸(A,T,C和G)的突變引起的多態(tài)性。一個SNP表示基因組某個位點有一個核苷酸的變化,源于單個堿基的轉(zhuǎn)換,顛換,插入和缺失。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是上海市遺傳學(xué)會理事單位,是上海市高新技術(shù)企業(yè),至今已有十六年歷史,專注于為國內(nèi)科研工作者和生物醫(yī)藥企業(yè)提供各類分子遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)(高同源區(qū)段SNP分型)和質(zhì)控試劑盒。浙江高同源區(qū)段SNP分型多重長片段PCR,同時擴增10個以上長片段,長片段區(qū)間內(nèi)覆蓋多個SNP位點,通過這種方法高效捕獲特異性序列。
理論上講,SNP既可能是二等位多態(tài)性,也可能是3個或4個等位多態(tài)性,但實際上,后兩者非常少見,幾乎可以忽略。因此,通常所說的SNP都是二等位多態(tài)性的。這種變異可能是轉(zhuǎn)換(C T,在其互補鏈上則為G A),也可能是顛換(C A,G T,C G,A T)。轉(zhuǎn)換的發(fā)生率總是明顯高于其它幾種變異,具有轉(zhuǎn)換型變異的SNP約占2/3,其它幾種變異的發(fā)生幾率相似。Wang等的研究也證明了這一點。轉(zhuǎn)換的幾率之所以高,可能是因為CpG二核苷酸上的胞嘧啶殘基是人類基因組中,易發(fā)生突變的位點,其中大多數(shù)是甲基化的,可自發(fā)地脫去氨基而形成胸腺嘧啶。在基因組DNA中,任何堿基均有可能發(fā)生變異,因此SNP既有可能在基因序列內(nèi),也有可能在基因以外的非編碼序列上??偟膩碚f,位于編碼區(qū)內(nèi)的SNP(coding SNP,cSNP)比較少,因為在外顯子內(nèi),其變異率*及周圍序列的1/5.但它在遺傳性疾病研究中卻具有重要意義,因此cSNP的研究更受關(guān)注。
TaqMan熒光探針法優(yōu)點是操作簡單,準(zhǔn)確性高(閉管進行,減少污染),判讀也很方便,認(rèn)可度高;適合多樣本,少位點。但是其也有不可忽視的限制性,如探針合成耗時較長,價格昂貴,為了保證探針的穩(wěn)定質(zhì)量,一般大家會選擇A公司合成。TaqMan熒光探針法一般為只有幾個位點時適用,并且對樣本的質(zhì)量要求較高,除了樣本無降解外,要需要濃度盡可能的一致。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司,地址:上海市松江區(qū)龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號502SNPs是英文Single nucleotide polymorphisms的縮寫。
目前市場上有多個廠家提供HRM分析的儀器,包括Idaho Technology、Corbett(QIAGEN)、Roche等,有些是**HRM的儀器,有些則是附帶HRM功能的定量PCR儀。HRM的發(fā)明者—美國猶他大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Wittwer實驗室曾評估了市場上多臺儀器在基因分型和突變掃描上的性能1。他們發(fā)現(xiàn),對于大部分儀器的準(zhǔn)確基因分型來說,主要限制在于平板上的空間溫度差異(Tm的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.020-0.264°C)。其它差異如數(shù)據(jù)密度、信噪比和熔解速率,也會影響雜合體的掃描。經(jīng)過比較發(fā)現(xiàn),空氣加熱型儀器以及樣品溫度單獨控制的儀器有著更低的Tm標(biāo)準(zhǔn)偏差(0.018-0.065),而加熱塊型儀器則在0.092-0.274。高同源區(qū)段在多倍體物種中,又細分為橫向同源和部分同源。天津同源SNP分型哪里好
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所謂同源序列,簡單地說,是指從某一共同祖先經(jīng)趨異進化而形成的不同序列。必須指出,相似性(similarity)和同源性(homology)是兩個完全不同的概念。相似性是指序列比對過程中用來描述檢測序列和目標(biāo)序列之間香通DNA堿基或氨基酸殘基順序所占比例的高低。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是上海市遺傳學(xué)會理事單位,至今已有十六年歷史,專注于為國內(nèi)科研工作者和生物醫(yī)藥企業(yè)提供各類分子遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和質(zhì)控試劑盒?;谧灾髦R產(chǎn)權(quán)的多重PCR技術(shù),翼和生物研發(fā)和改良了適用于熒光定量PCR、一代測序和二代高通量測序平臺的多種檢測技術(shù)和產(chǎn)品,逐步形成了在細胞組織和動物模型質(zhì)控、大健康檢測和科學(xué)研究3大板塊產(chǎn)品布局。安徽SNP基因分型公司
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司擁有第三方檢測服務(wù);生物專業(yè)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù);健康衰老評估;大健康檢測;遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù);生物醫(yī)藥行業(yè)質(zhì)控檢測技術(shù)技術(shù)服務(wù);小鼠遺傳品系鑒定;轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定;細胞點突變檢測;細胞端粒長度和端粒酶活性檢測。等多項業(yè)務(wù),主營業(yè)務(wù)涵蓋細胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)。目前我公司在職員工以90后為主,是一個有活力有能力有創(chuàng)新精神的團隊。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:細胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營宗旨,深受客戶好評。一直以來公司堅持以客戶為中心、細胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)市場為導(dǎo)向,重信譽,保質(zhì)量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。