常見(jiàn)的SNP既可以出現(xiàn)在基因編碼區(qū),也可以出現(xiàn)在非編碼區(qū),雖然發(fā)生在編碼區(qū)的概率相對(duì)較小,但會(huì)影響基因的功能,導(dǎo)致生物性狀改變,在遺傳性疾病的研究中具有非常重要的意義。SNP作為第三代遺傳標(biāo)記,其分布密度高,遍布于整個(gè)動(dòng)物和人類基因組中;與功能基因具有高度關(guān)聯(lián)性;突變率低,遺傳穩(wěn)定性強(qiáng);檢測(cè)通量高便于自動(dòng)化分析。某些SNP位點(diǎn)并不直接與疾病基因的表達(dá)相關(guān)聯(lián),但因?yàn)樗c某些致病基因相鄰,所以成為重要的遺傳標(biāo)記。根據(jù)高同源區(qū)段位點(diǎn)數(shù)量,提供多重長(zhǎng)片段巢式PCR-LDR SNP分型和多重長(zhǎng)片段巢式PCR-NGS SNP分型兩種解決方案。安徽高同源區(qū)段分型
高通量二代測(cè)序法SNP基因分型——你有我有,你沒(méi)有我也有:上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司通過(guò)自主研發(fā)的高重PCR技術(shù),擴(kuò)增引物經(jīng)修飾及優(yōu)化,克服了傳統(tǒng)多重PCR擴(kuò)增效率不均一問(wèn)題,95%以上擴(kuò)增子的測(cè)序深度在平均測(cè)序深度的0.2X范圍,保證測(cè)序通量的有效利用?;诔咧豍CR技術(shù)平臺(tái)的高通量二代SNP分型服務(wù),適用于多種遺傳學(xué)研究領(lǐng)域,如疾病與基因的關(guān)聯(lián)分析,臨床分子診斷研究,QTL定位及分子育種等大規(guī)模多位點(diǎn)大樣本的SNP分析。上海同源SNP分型報(bào)告SNP分型評(píng)估下來(lái)好多個(gè)有同源區(qū)段怎么辦?翼和生物多重長(zhǎng)片段巢式PCR技術(shù)中高通量分型方案解決技術(shù)難題。
1. SNP數(shù)量多,分布比較常見(jiàn)。據(jù)估計(jì),人類基因組中每1000個(gè)核苷酸就有一個(gè)SNP,人類30億堿基***有300萬(wàn)以上的SNPs.SNP 遍布于整個(gè)人類基因組中,根據(jù)SNP在基因中的位置,可分為基因編碼區(qū)SNPs(Coding-region SNPs,cSNPs)、基因周邊SNPs(Perigenic SNPs,pSNPs)以及基因間SNPs(Intergenic SNPs,iSNPs)等三類。2、 SNP適于快速、規(guī)?;Y查。組成DNA的堿基雖然有4種,但SNP一般只有兩種堿基組成,所以它是一種二態(tài)的標(biāo)記,即二等位基因(biallelic)。 由于SNP的二態(tài)性,非此即彼,在基因組篩選中SNPs往往只需+/-的分析,而不用分析片段的長(zhǎng)度,這就利于發(fā)展自動(dòng)化技術(shù)篩選或檢測(cè)SNPs.3、SNP等位基因頻率的容易估計(jì)。采用混和樣本估算等位基因的頻率是種高效快速的策略。該策略的原理是:首先選擇參考樣本制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后將待測(cè)的混和樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較,根據(jù)所得信號(hào)的比例確定混和樣本中各種等位基因的頻率。4、易于基因分型。SNPs的二態(tài)性,也有利于對(duì)其進(jìn)行基因分型。
相信大家都聽(tīng)過(guò)或已經(jīng)接觸過(guò)一些常用的分型方法,如片段長(zhǎng)度多態(tài)性(限制性內(nèi)切酶)法,直接測(cè)序法,Taqman熒光探針?lè)ǎ琇DR連接酶檢測(cè)反應(yīng)法,競(jìng)爭(zhēng)性等位基因特異性PCR法(KASP),二代測(cè)序法等,小E就針對(duì)以上幾種常用分型方法為大家做一個(gè)介紹和總結(jié)。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限上海翼和專家團(tuán)隊(duì)富有開(kāi)創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價(jià)比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。多重長(zhǎng)片段PCR,同時(shí)擴(kuò)增10個(gè)以上長(zhǎng)片段,長(zhǎng)片段區(qū)間內(nèi)覆蓋多個(gè)SNP位點(diǎn),通過(guò)這種方法高效捕獲特異性序列。
TaqMan熒光探針是一種寡核苷酸探針,熒光基團(tuán)連接在探針的5’末端,而淬滅劑則在3’末端。在PCR反應(yīng)體系中加入2種不同熒光標(biāo)記的探針,它們可以分別與2個(gè)等位基因完全配對(duì)。正常情況下,由于探針5’端熒光基團(tuán)和3’端淬滅基團(tuán)緊鄰在一起,熒光被淬滅。隨著PCR有效的進(jìn)行,與模板完全配對(duì)的探針逐步被TaqDNA聚合酶5’——3’外切酶活性切割,致使探針5’端熒光基團(tuán)和3’端淬滅基團(tuán)分離,淬滅效應(yīng)解除,報(bào)告熒光基團(tuán)被***,檢測(cè)到熒光信號(hào),相反,如果模板不能完全配對(duì)的探針(**另一種等位基因)不能被有效切割,因此檢測(cè)不到熒光信號(hào),從而實(shí)現(xiàn)SNP位點(diǎn)的分型檢測(cè)。高同源區(qū)段是二倍體和多倍體都存在的,由于多倍體染色體加倍,所以高同源區(qū)段在多倍體中更是普遍現(xiàn)象。天津高同源分型送樣要求
**近翼和生物推出了多重長(zhǎng)PCR捕獲建庫(kù)的方案,有效解決了高同源區(qū)段SNP/序列分析的難題。安徽高同源區(qū)段分型
異源同源基因(xenologousgene)是由于基因在不同物種間的橫向轉(zhuǎn)移(horizontaltransfer)而產(chǎn)生的。異源同源基因在原核生物中研究比較多。**近研究表明,異源同源基因的原位取代xenolo—gousgenedisplacementinsitu)是細(xì)菌進(jìn)化的強(qiáng)大推動(dòng)力。另外,在比較真核基因組和原核生物基因組時(shí)發(fā)現(xiàn),小部分脊椎動(dòng)物基因在細(xì)菌中有同源序列,而在其他真核生物中卻沒(méi)有發(fā)現(xiàn)同源序列。一種解釋認(rèn)為,這些基因從細(xì)菌直接水平地轉(zhuǎn)移到脊椎動(dòng)物的祖先,也是異源同源基因;另外一種解釋則認(rèn)為,是由于其他的真核生物丟失了這些基因。安徽高同源區(qū)段分型
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總部位于龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號(hào)502,是一家第三方檢測(cè)服務(wù);生物專業(yè)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù);健康衰老評(píng)估;大健康檢測(cè);遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù);生物醫(yī)藥行業(yè)質(zhì)控檢測(cè)技術(shù)技術(shù)服務(wù);小鼠遺傳品系鑒定;轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定;細(xì)胞點(diǎn)突變檢測(cè);細(xì)胞端粒長(zhǎng)度和端粒酶活性檢測(cè)。的公司。翼和生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)。翼和生物始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念,影響并帶動(dòng)團(tuán)隊(duì)取得成功。翼和生物始終關(guān)注醫(yī)藥健康市場(chǎng),以敏銳的市場(chǎng)洞察力,實(shí)現(xiàn)與客戶的成長(zhǎng)共贏。