二代測(cè)序法主要通過(guò)PCR的方法，對(duì)目標(biāo)SNP位點(diǎn)進(jìn)行特異性捕獲。為了提**型的通量，目前多采用多重PCR的方法同時(shí)對(duì)多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行捕獲（可同時(shí)對(duì)1-100位點(diǎn)進(jìn)行分型）。由于二代測(cè)序通量是足夠滿足數(shù)百數(shù)千樣本的同時(shí)測(cè)序，因此需要對(duì)不同的樣本添加***的樣本標(biāo)簽（Barcode），從而在后續(xù)數(shù)據(jù)分析過(guò)程中，能夠進(jìn)行樣本拆分。因此在多重PCR完成***輪多SNP位點(diǎn)捕獲后，需要進(jìn)行第二輪PCR，在***輪PCR產(chǎn)物的基礎(chǔ)上，添加樣本樣本標(biāo)簽及測(cè)序接頭等序列。通過(guò)PCR條件優(yōu)化，目前亦可實(shí)現(xiàn)一次反應(yīng)，兩輪PCR接力完成的效果。翼和生物推出了多重長(zhǎng)PCR捕獲建庫(kù)的方案，有效解決了高同源區(qū)段SNP/序列分析的難題。南京高同源區(qū)段SNP分型準(zhǔn)確度高
上海翼和多倍體擴(kuò)增子測(cè)序SNP分型，結(jié)合多重PCR技術(shù)和高通量測(cè)序技術(shù)，對(duì)需要檢測(cè)的位點(diǎn)設(shè)計(jì)特異性引物，在單管內(nèi)進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增，不同的樣本以不同的Barcode引物區(qū)分，對(duì)擴(kuò)增子進(jìn)行高通量測(cè)序。測(cè)序結(jié)果使用生物信息學(xué)方法，區(qū)分不同的樣本。并且將多倍體的不同基因組進(jìn)行拆分后，對(duì)測(cè)序短序列進(jìn)行精細(xì)reads mapping，剔除HSV和PSV干擾，**終獲得每個(gè)位點(diǎn)準(zhǔn)確的分型信息。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是上海市遺傳學(xué)會(huì)理事單位，是上海市高新技術(shù)企業(yè)。上海高同源區(qū)段分型哪個(gè)公司做高同源區(qū)段在多倍體物種中，又細(xì)分為橫向同源和部分同源。
TaqMan熒光探針是一種寡核苷酸探針，熒光基團(tuán)連接在探針的5’末端，而淬滅劑則在3’末端。在PCR反應(yīng)體系中加入2種不同熒光標(biāo)記的探針，它們可以分別與2個(gè)等位基因完全配對(duì)。正常情況下，由于探針5’端熒光基團(tuán)和3’端淬滅基團(tuán)緊鄰在一起，熒光被淬滅。隨著PCR有效的進(jìn)行，與模板完全配對(duì)的探針逐步被TaqDNA聚合酶5’——3’外切酶活性切割，致使探針5’端熒光基團(tuán)和3’端淬滅基團(tuán)分離，淬滅效應(yīng)解除，報(bào)告熒光基團(tuán)被***，檢測(cè)到熒光信號(hào)，相反，如果模板不能完全配對(duì)的探針（**另一種等位基因）不能被有效切割，因此檢測(cè)不到熒光信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)SNP位點(diǎn)的分型檢測(cè)。
隨著二代測(cè)序技術(shù)的普及，相比Sanger測(cè)序，二代測(cè)序雖然降低了測(cè)序讀長(zhǎng)，但是**增加的測(cè)序通量同時(shí)大幅降低測(cè)序成本。利用二代測(cè)序進(jìn)行SNP分型，不僅測(cè)序讀長(zhǎng)滿足分型需求，并且可以同時(shí)對(duì)數(shù)十?dāng)?shù)百個(gè)位點(diǎn)，上千樣本進(jìn)行分型。二代測(cè)序結(jié)果判斷準(zhǔn)確直觀，相比RFLP，Taqman，LDR等方法都通過(guò)間接結(jié)果來(lái)進(jìn)行分型結(jié)果的判定，直接測(cè)序或二代測(cè)序法分型能都直接看到位點(diǎn)具體序列情況，SNP位點(diǎn)判斷更加直觀。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是上海市遺傳學(xué)會(huì)理事單位，是上海市高新技術(shù)企業(yè)，至今已有十六年歷史。現(xiàn)階段，異源多倍體物種的全基因組重測(cè)序已經(jīng)可以通過(guò)各式各樣的生信算法，SNP的質(zhì)量也越來(lái)越好了。
所謂同源序列，簡(jiǎn)單地說(shuō)，是指從某一共同祖先經(jīng)趨異進(jìn)化而形成的不同序列。必須指出，相似性（similarity)和同源性（homology）是兩個(gè)完全不同的概念。相似性是指序列比對(duì)過(guò)程中用來(lái)描述檢測(cè)序列和目標(biāo)序列之間香通DNA堿基或氨基酸殘基順序所占比例的高低。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是上海市遺傳學(xué)會(huì)理事單位，至今已有十六年歷史，專注于為國(guó)內(nèi)科研工作者和生物醫(yī)藥企業(yè)提供各類分子遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和質(zhì)控試劑盒?；谧灾髦R(shí)產(chǎn)權(quán)的多重PCR技術(shù)，翼和生物研發(fā)和改良了適用于熒光定量PCR、一代測(cè)序和二代高通量測(cè)序平臺(tái)的多種檢測(cè)技術(shù)和產(chǎn)品，逐步形成了在細(xì)胞組織和動(dòng)物模型質(zhì)控、大健康檢測(cè)和科學(xué)研究3大板塊產(chǎn)品布局。.多重長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增特異性序列，其產(chǎn)物可以作為后續(xù)SNP分型的模板。上海同源序列SNP分型分析
多重長(zhǎng)片段PCR，同時(shí)擴(kuò)增10個(gè)以上長(zhǎng)片段，長(zhǎng)片段區(qū)間內(nèi)覆蓋多個(gè)SNP位點(diǎn)，通過(guò)這種方法高效捕獲特異性序列。南京高同源區(qū)段SNP分型準(zhǔn)確度高
將待檢測(cè)片段（包含待測(cè)SNP位點(diǎn)）進(jìn)行PCR擴(kuò)增并直接進(jìn)行測(cè)序是SNP檢測(cè)方法中，準(zhǔn)確的一種，堪稱SNP分型的“金標(biāo)準(zhǔn)”。獲得測(cè)序峰圖，純和位點(diǎn)為單峰，而雜合位點(diǎn)則為套峰，因此通過(guò)查看測(cè)序峰圖很容易將基因型區(qū)分開(kāi)來(lái)。直接測(cè)序法不僅可用于對(duì)已知位點(diǎn)的檢測(cè)，還可用于發(fā)現(xiàn)未知的SNP位點(diǎn)。直接測(cè)序法的優(yōu)點(diǎn)是結(jié)果準(zhǔn)確，能發(fā)現(xiàn)未知位點(diǎn)，但是其缺點(diǎn)是通量低，成本高。因此直接測(cè)序法適用于少位點(diǎn)，少樣本的分型規(guī)模，當(dāng)然土豪實(shí)驗(yàn)室除外！所以這種方法也很難在商業(yè)化大規(guī)模的分型實(shí)驗(yàn)中得到推廣。南京高同源區(qū)段SNP分型準(zhǔn)確度高
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司主要經(jīng)營(yíng)范圍是醫(yī)藥健康，擁有一支專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和良好的市場(chǎng)口碑。公司業(yè)務(wù)分為細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控，大健康檢測(cè)，生物技術(shù)服務(wù)等，目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn)，為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力，努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí)，遵守行業(yè)規(guī)范，植根于醫(yī)藥健康行業(yè)的發(fā)展。翼和生物立足于全國(guó)市場(chǎng)，依托強(qiáng)大的研發(fā)實(shí)力，融合前沿的技術(shù)理念，飛快響應(yīng)客戶的變化需求。