二代測序法主要通過PCR的方法，對目標(biāo)SNP位點(diǎn)進(jìn)行特異性捕獲。為了提**型的通量，目前多采用多重PCR的方法同時對多個位點(diǎn)進(jìn)行捕獲（可同時對1-100位點(diǎn)進(jìn)行分型）。由于二代測序通量是足夠滿足數(shù)百數(shù)千樣本的同時測序，因此需要對不同的樣本添加***的樣本標(biāo)簽（Barcode），從而在后續(xù)數(shù)據(jù)分析過程中，能夠進(jìn)行樣本拆分。因此在多重PCR完成***輪多SNP位點(diǎn)捕獲后，需要進(jìn)行第二輪PCR，在***輪PCR產(chǎn)物的基礎(chǔ)上，添加樣本樣本標(biāo)簽及測序接頭等序列。通過PCR條件優(yōu)化，目前亦可實(shí)現(xiàn)一次反應(yīng)，兩輪PCR接力完成的效果。**近翼和生物推出了多重長PCR捕獲建庫的方案，有效解決了高同源區(qū)段SNP/序列分析的難題。高同源區(qū)段SNP分型分析
Hi-SNP 結(jié)合多重 PCR 技術(shù)和高通量測序技術(shù)，對需要檢測的位點(diǎn)設(shè)計特異性引物，在單管內(nèi)進(jìn)行多重 PCR 擴(kuò)增，不同的樣本以不同的 Barcode 引物區(qū)分?；旌蠘颖竞螅?Ion Proton/illumina 主流測序平臺上， 對擴(kuò)增子進(jìn)行高通量測序。測序結(jié)果使用生物信息學(xué)方法，區(qū)分不同的樣本，**終獲得每個位點(diǎn)的 SNP 信 息。高通量測序能一次對幾百萬條 DNA 分子進(jìn)行序列測定，相比其他的 SNP 檢測技術(shù)，基于高通量測序的 SNP 分型具有更準(zhǔn)確、更靈敏的特點(diǎn)。上海翼和生物。河南分型報告翼和生物推出了多重長PCR捕獲建庫的方案，有效解決了高同源區(qū)段SNP/序列分析的難題。
1. SNP數(shù)量多，分布比較常見。據(jù)估計，人類基因組中每1000個核苷酸就有一個SNP，人類30億堿基***有300萬以上的SNPs.SNP 遍布于整個人類基因組中，根據(jù)SNP在基因中的位置，可分為基因編碼區(qū)SNPs（Coding-region SNPs，cSNPs）、基因周邊SNPs（Perigenic SNPs，pSNPs）以及基因間SNPs（Intergenic SNPs，iSNPs）等三類。2、 SNP適于快速、規(guī)模化篩查。組成DNA的堿基雖然有4種，但SNP一般只有兩種堿基組成，所以它是一種二態(tài)的標(biāo)記，即二等位基因（biallelic）。 由于SNP的二態(tài)性，非此即彼，在基因組篩選中SNPs往往只需+/-的分析，而不用分析片段的長度，這就利于發(fā)展自動化技術(shù)篩選或檢測SNPs.3、SNP等位基因頻率的容易估計。采用混和樣本估算等位基因的頻率是種高效快速的策略。該策略的原理是：首先選擇參考樣本制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后將待測的混和樣本與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，根據(jù)所得信號的比例確定混和樣本中各種等位基因的頻率。4、易于基因分型。SNPs的二態(tài)性，也有利于對其進(jìn)行基因分型。
SNP 全稱 Single Nucleotide Polymorphism，即單核苷酸多態(tài)性，是指在基因組上單個核苷酸的變異，包括 轉(zhuǎn)換，顛換，插入和缺失，形成的遺傳標(biāo)記，其數(shù)量很多，多態(tài)性豐富，有些 SNP 位點(diǎn)直接影響基因功 能，從而導(dǎo)致生物性狀改變。SNP 是研究人類家族和動植物品系遺傳變異的重要依據(jù)，因此被***用于群體遺傳學(xué)研究和疾病相關(guān) 基因的研究。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是上海市遺傳學(xué)會理事單位，是上海市高新技術(shù)企業(yè)，至今已有十六年歷史，專注于為國內(nèi)科研工作者和生物醫(yī)藥企業(yè)提供各類分子遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)（高同源區(qū)段SNP分型）和質(zhì)控試劑盒。多態(tài)性是一個群體概念，多態(tài)性指這個差異占群體的1%以上。否則就叫突變（小于1%）。
基因的直系同源、旁系同源或異源同源關(guān)系[1]。祖先物種通過兩次物種分化形成ABC三個物種；伴隨物種分化而進(jìn)行的兩次基因重復(fù)共形成A1、B1、B2、C1、C2、C3等6個基因。顯然，C2與C3互為直系同源；B1與C1互為旁系同源；AB1與其他6個基因互為異源同源。然而，B1和B2、B2和C1又是什么關(guān)系呢?在這個問題上曾引起爭議。B1和B2、B2和C1的分離是由于***次基因重復(fù)而產(chǎn)生的，套用定義，可得出B1和B2、B2和C1互為旁系同源。同理，B1和C2/C3、C1和C2/C3也互為旁系同源。類似的，根據(jù)直系同源基因的定義，B2和C2/C3、A1和所有B基因及C基因互為直系同源。SNP是人類可遺傳的變異中比較常見的一種。占所有已知多態(tài)性的90%以上。山東高同源分型
多重長片段巢式PCR技術(shù)，可以高效特異性捕獲高同源區(qū)段序列，將高同源區(qū)段問題轉(zhuǎn)換為常規(guī)SNP位點(diǎn)。高同源區(qū)段SNP分型分析
在研究親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的物種時，物種分化和基因重復(fù)的嵌套發(fā)生使研究具有很大的復(fù)雜性和困難度。這時，籠統(tǒng)的劃分直系同源和旁系同源關(guān)系并不足以解決問題，我們需要一個更為精確的分類。為了區(qū)別于B1和C1的簡單的直向同源關(guān)系，把B2和C2/C3的同源稱為“共生直向同源”co—ortholog)或“橫向同源基因家族譜系特異性擴(kuò)充”(1ineage—specificexpansionofparalogousfamily)。為了區(qū)分C2和C3、B1和C2/C3這兩種同源關(guān)系，可以根據(jù)物種分化和基因重復(fù)的發(fā)生的先后次序，把旁系同源基因又分為內(nèi)旁系同源基因（inparalog）和外旁系同源基因（outparalog）。在物種分化之后產(chǎn)生旁系同源基因的稱“內(nèi)旁系同源基因”；在物種分化之前產(chǎn)生橫旁系同源基因的稱“外旁系同源基因”。“內(nèi)旁系同源基因”和“外旁系同源基因”只是一種相對的劃分，取決于所研究的系統(tǒng)和選作標(biāo)準(zhǔn)的某特定分化事件。若以第二次物種分化為準(zhǔn)線，則C2和C3的分離發(fā)生在物種分化之后，因此它們互為內(nèi)旁系同源基因；B1和C2/C3的分離發(fā)生在物種分化之前，因此B1和C2/C3互為外旁系同源基因。高同源區(qū)段SNP分型分析
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是一家第三方檢測服務(wù)；生物專業(yè)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)；健康衰老評估；大健康檢測；遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)；生物醫(yī)藥行業(yè)質(zhì)控檢測技術(shù)技術(shù)服務(wù)；小鼠遺傳品系鑒定；轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定；細(xì)胞點(diǎn)突變檢測；細(xì)胞端粒長度和端粒酶活性檢測。的公司，致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠實(shí)可信的企業(yè)。翼和生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控，大健康檢測，生物技術(shù)服務(wù)。翼和生物不斷開拓創(chuàng)新，追求出色，以技術(shù)為先導(dǎo)，以產(chǎn)品為平臺，以應(yīng)用為重點(diǎn)，以服務(wù)為保證，不斷為客戶創(chuàng)造更高價值，提供更優(yōu)服務(wù)。翼和生物始終關(guān)注自身，在風(fēng)云變化的時代，對自身的建設(shè)毫不懈怠，高度的專注與執(zhí)著使翼和生物在行業(yè)的從容而自信。