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LDR連接酶檢測(cè)法優(yōu)點(diǎn)是適用于任何多態(tài)性位點(diǎn),基于雜交反應(yīng)和連接反應(yīng),分型結(jié)果準(zhǔn)確,可進(jìn)行多重反應(yīng),性價(jià)比較高,且實(shí)驗(yàn)靈活。但是相比TaqMan和直接測(cè)序法的單一位點(diǎn)檢測(cè)而言,LDR法可以實(shí)現(xiàn)多位點(diǎn)的同時(shí)檢測(cè),提高檢測(cè)通量,因此前期需要一定時(shí)間構(gòu)建多重分型方案。因此該方法非常適合相同分型方案,連續(xù)樣本的分型需求,提高實(shí)驗(yàn)通量的同時(shí)降低分型單價(jià)。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總部在上海,2011年無(wú)錫成立分公司無(wú)錫翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司對(duì)于候選SNP的遴選,有很多種考慮,總的趨勢(shì)和出發(fā)點(diǎn)是能夠涵蓋的SNP越多越好。河南STR/SSR基因SNP分型公司
片段長(zhǎng)度多態(tài)性(限制性內(nèi)切酶)法——RFLP(RestrictionFragmentLengthPolymorphism)法的基本原理是通過(guò)PCR擴(kuò)增目的片段DNA,擴(kuò)增產(chǎn)物再用特異性內(nèi)切酶酶切成不同大小的片段,直接通過(guò)凝膠電泳分辨基因型。不同等位基因的限制性酶切位點(diǎn)分布不同,產(chǎn)生不同長(zhǎng)度的DN*段條帶。上海翼和**團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價(jià)比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。微信公眾號(hào):上海翼和生物浙江STR/SSR基因SNP分型在經(jīng)濟(jì)作物育種領(lǐng)域,檢測(cè)SNP可實(shí)現(xiàn)對(duì)所需性狀的早期選擇。
目前市場(chǎng)上有多個(gè)廠家提供HRM分析的儀器,包括IdahoTechnology、Corbett(QIAGEN)、Roche等,有些是HRM的儀器,有些則是附帶HRM功能的定量PCR儀。HRM的發(fā)明者—美國(guó)猶他大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Wittwer實(shí)驗(yàn)室曾評(píng)估了市場(chǎng)上多臺(tái)儀器在基因分型和突變掃描上的性能1。他們發(fā)現(xiàn),對(duì)于大部分儀器的準(zhǔn)確基因分型來(lái)說(shuō),主要限制在于平板上的空間溫度差異(Tm的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.020-0.264°C)。其它差異如數(shù)據(jù)密度、信噪比和熔解速率,也會(huì)影響雜合體的掃描。經(jīng)過(guò)比較發(fā)現(xiàn),空氣加熱型儀器以及樣品溫度單獨(dú)控制的儀器有著更低的Tm標(biāo)準(zhǔn)偏差(0.018-0.065),而加熱塊型儀器則在0.092-0.274。
二代測(cè)序法主要通過(guò)PCR的方法,對(duì)目標(biāo)SNP位點(diǎn)進(jìn)行特異性捕獲。為了提型的通量,目前多采用多重PCR的方法同時(shí)對(duì)多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行捕獲(可同時(shí)對(duì)1-100位點(diǎn)進(jìn)行分型)。由于二代測(cè)序通量是足夠滿足數(shù)百數(shù)千樣本的同時(shí)測(cè)序,因此需要對(duì)不同的樣本添加的樣本標(biāo)簽(Barcode),從而在后續(xù)數(shù)據(jù)分析過(guò)程中,能夠進(jìn)行樣本拆分。因此在多重PCR完成輪多SNP位點(diǎn)捕獲后,需要進(jìn)行第二輪PCR,在輪PCR產(chǎn)物的基礎(chǔ)上,添加樣本樣本標(biāo)簽及測(cè)序接頭等序列。通過(guò)PCR條件優(yōu)化,目前亦可實(shí)現(xiàn)一次反應(yīng),兩輪PCR接力完成的效果。一次研究的SNP大概有十幾個(gè)到幾十個(gè),這是比較早期的做法。
高通量二代測(cè)序法SNP基因分型——你有我有,你沒有我也有:上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司通過(guò)自主研發(fā)的高重PCR技術(shù),擴(kuò)增引物經(jīng)修飾及優(yōu)化,克服了傳統(tǒng)多重PCR擴(kuò)增效率不均一問(wèn)題,95%以上擴(kuò)增子的測(cè)序深度在平均測(cè)序深度的0.2X范圍,保證測(cè)序通量的有效利用。基于超高重PCR技術(shù)平臺(tái)的高通量二代SNP分型服務(wù),適用于多種遺傳學(xué)研究領(lǐng)域,如疾病與基因的關(guān)聯(lián)分析,臨床分子診斷研究,QTL定位及分子育種等大規(guī)模多位點(diǎn)大樣本的SNP分析。SNP在基礎(chǔ)研究領(lǐng)域發(fā)揮著巨大作用。上海微衛(wèi)星標(biāo)記strSNP分型報(bào)告
美國(guó)學(xué)者Eric S. Lander于1996年正式提出單核苷酸多態(tài)性(SNP)為第三代分子標(biāo)記.河南STR/SSR基因SNP分型公司
競(jìng)爭(zhēng)性等位基因特異性PCR法——KASP(KompetitiveAlleleSpecificPCR),是英國(guó)LGC(**化學(xué)家實(shí)驗(yàn)室)公司所開發(fā)的技術(shù),被比較常見用于少位點(diǎn),多樣本的SNP分型中,與TaqMan熒光探針法有一定相似性。KASP基于引物末端堿基的特異匹配來(lái)對(duì)SNP分型以及檢測(cè)InDels(Insertions and Deletions,插入和缺失)。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司,微信公眾號(hào):上海翼和生物。 總公司地址位于:上海市松江區(qū)龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號(hào)502、508 ,此外,無(wú)錫設(shè)有分公司河南STR/SSR基因SNP分型公司
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司專注技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā),發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大。目前我公司在職員工以90后為主,是一個(gè)有活力有能力有創(chuàng)新精神的團(tuán)隊(duì)。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營(yíng)宗旨,深受客戶好評(píng)。公司力求給客戶提供全數(shù)良好服務(wù),我們相信誠(chéng)實(shí)正直、開拓進(jìn)取地為公司發(fā)展做正確的事情,將為公司和個(gè)人帶來(lái)共同的利益和進(jìn)步。經(jīng)過(guò)幾年的發(fā)展,已成為細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)行業(yè)出名企業(yè)。