TaqMan熒光探針是一種寡核苷酸探針,熒光基團連接在探針的5’末端,而淬滅劑則在3’末端。在PCR反應(yīng)體系中加入2種不同熒光標(biāo)記的探針,它們可以分別與2個等位基因完全配對。正常情況下,由于探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團緊鄰在一起,熒光被淬滅。隨著PCR有效的進行,與模板完全配對的探針逐步被TaqDNA聚合酶5’——3’外切酶活性切割,致使探針5’端熒光基團和3’端淬滅基團分離,淬滅效應(yīng)解除,報告熒光基團被***,檢測到熒光信號,相反,如果模板不能完全配對的探針(**另一種等位基因)不能被有效切割,因此檢測不到熒光信號,從而實現(xiàn)SNP位點的分型檢測。多重PCR是將多個目標(biāo)區(qū)段/目標(biāo)SNP位點的在1個PCR管中同時擴增,獲得多個目標(biāo)片段的技術(shù)。高同源序列分型機構(gòu)
隨著二代測序技術(shù)的普及,相比Sanger測序,以降低測序讀長的前提,**增加的測序通量同時大幅降低測序成本。利用二代測序進行SNP分型,不僅測序讀長滿足分型需求,可以同時對數(shù)十?dāng)?shù)百個位點,上千樣本進行分型。該方法相比直接測序法,除了保留測序法的優(yōu)點外,彌補了其通量不足的限制,二代測序分型法也正在快速在領(lǐng)域內(nèi)推廣。上海翼和生物提供高同源SNP分型服務(wù),無錫分公司(無錫翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司)地址:無錫市濱湖區(qū)梅梁西路138號七號樓一樓。浙江同源區(qū)段SNP分型公司但是當(dāng)位點數(shù)和樣本量都比較大的時候,長片段PCR增加成本,工作量也非常龐大了。
多倍體是指含有3套或3套以上完整染色體組的生物體。很多重要的農(nóng)作物和動物都是多倍體,例如:小麥、油菜、棉花、花生、***、甘蔗、家蠶、蠑螈、果蠅、蛙等。多倍體物種基因組復(fù)雜,給遺傳學(xué)研究帶來了很大挑戰(zhàn)。在SNP分型、目標(biāo)區(qū)間重測序和分子克隆等過程中,特異性擴增的難度增大,非特異性擴增容易擴增出多個亞基因組間的同源區(qū)段。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是上海市遺傳學(xué)會理事單位,是上海市高新技術(shù)企業(yè),至今已有十六年歷史。
Hi-SNP結(jié)合多重PCR技術(shù)和高通量測序技術(shù),對需要檢測的位點設(shè)計特異性引物,在單管內(nèi)進行多重PCR擴增,不同的樣本以不同的Barcode引物區(qū)分。混合樣本后,在Ion Proton/Ion Torrent平臺上,對擴增子進行高通量測序。測序結(jié)果使用生物信息學(xué)方法,區(qū)分不同的樣本,,終獲得每個位點的SNP信息。高通量測序能一次對幾百萬條DNA分子進行序列測定,相比其他的SNP檢測技術(shù),基于高通量測序的SNP分型具有更準(zhǔn)確、更靈敏的特點。上海翼和生物提供高同源區(qū)段SNP分型服務(wù)。
翼和生物利用自主研發(fā)的多重長片段CPR技術(shù),結(jié)合巢式PCR技術(shù),解決高同源區(qū)段SNP/序列分析難題。
基因的直系同源、旁系同源或異源同源關(guān)系[1]。祖先物種通過兩次物種分化形成ABC三個物種;伴隨物種分化而進行的兩次基因重復(fù)共形成A1、B1、B2、C1、C2、C3等6個基因。顯然,C2與C3互為直系同源;B1與C1互為旁系同源;AB1與其他6個基因互為異源同源。然而,B1和B2、B2和C1又是什么關(guān)系呢?在這個問題上曾引起爭議。B1和B2、B2和C1的分離是由于***次基因重復(fù)而產(chǎn)生的,套用定義,可得出B1和B2、B2和C1互為旁系同源。同理,B1和C2/C3、C1和C2/C3也互為旁系同源。類似的,根據(jù)直系同源基因的定義,B2和C2/C3、A1和所有B基因及C基因互為直系同源。在植物基因組研究中,大量的多倍體植物基因組中同樣存在大量的高同源序列。北京高同源序列分型報告
多態(tài)性是一個群體概念,多態(tài)性指這個差異占群體的1%以上。否則就叫突變(小于1%)。高同源序列分型機構(gòu)
理論上講,SNP既可能是二等位多態(tài)性,也可能是3個或4個等位多態(tài)性,但實際上,后兩者非常少見,幾乎可以忽略。通常所說的SNP都是二等位多態(tài)性的。這種變異可能是轉(zhuǎn)換(C T,在其互補鏈上則為GA),也可能是顛換(CA,GT,CG,AT)。轉(zhuǎn)換的發(fā)生率總是明顯高于其它幾種變異,具有轉(zhuǎn)換型變異的SNP約占2/3。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是上海市遺傳學(xué)會理事單位,是上海市高新技術(shù)企業(yè),至今已有十六年歷史,專注于為國內(nèi)科研工作者和生物醫(yī)藥企業(yè)提供各類分子遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)(高同源區(qū)段SNP分型)和質(zhì)控試劑盒。高同源序列分型機構(gòu)
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司位于龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號502,交通便利,環(huán)境優(yōu)美,是一家服務(wù)型企業(yè)。翼和生物是一家私營有限責(zé)任公司企業(yè),一直“以人為本,服務(wù)于社會”的經(jīng)營理念;“誠守信譽,持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。以滿足顧客要求為己任;以顧客永遠(yuǎn)滿意為標(biāo)準(zhǔn);以保持行業(yè)優(yōu)先為目標(biāo),提供高品質(zhì)的細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)。翼和生物將以真誠的服務(wù)、創(chuàng)新的理念、高品質(zhì)的產(chǎn)品,為彼此贏得全新的未來!