冷凍電鏡已有幾十年的歷史了,它的原理是向快速冷凍的樣品發(fā)射電子并記錄生成的圖像從而確定其形狀。探測回彈電子的技術(shù)以及圖像分析軟件的進(jìn)步觸發(fā)了一場始于2013年的“分辨率改變”,并讓研究人員得到了比較清晰的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)——幾乎與利用X射線晶體技術(shù)得到的結(jié)果一樣好。X射線晶體技術(shù)的出現(xiàn)時(shí)間更早,主要根據(jù)蛋白質(zhì)晶體被X射線轟擊時(shí)形成的衍射圖案推斷蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。后續(xù)的軟硬件更新使得冷凍電鏡的結(jié)構(gòu)分辨率得到了更大的提升。但是科學(xué)家還是要依賴X射線晶體學(xué)才能獲得原子分辨率的結(jié)構(gòu)。問題是,研究人員可能要花幾個(gè)月到幾年的時(shí)間才能使蛋白質(zhì)結(jié)晶,而且許多醫(yī)學(xué)上重要的蛋白質(zhì)不會(huì)形成可用的晶體;相比之下,冷凍電鏡只需要把蛋白質(zhì)置于純化溶液中即可。透射電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡類似,采用高能電子束作為光源,電磁透鏡進(jìn)行聚焦。廣東徠卡DM6M顯微鏡品牌
顯微鏡之所以能將被檢物體進(jìn)行放大,是通過透鏡來實(shí)現(xiàn)的。單透鏡成像具有像差,嚴(yán)重影響成像質(zhì)量。因此顯微鏡的主要光學(xué)部件都由透鏡組合而成。從透鏡的性能可知,只有凸透鏡才能起放大作用,而凹透鏡不行。顯微鏡的物鏡與目鏡雖都由透鏡組合而成,但相當(dāng)于一個(gè)凸透鏡。為便于了解顯微鏡的放大原理,簡要說明一下凸透鏡的幾種成像規(guī)律: 當(dāng)物體了位于透鏡物方二倍焦距以外時(shí),則在像方二倍焦距以內(nèi)、焦點(diǎn)以外形成縮小的倒立實(shí)像;當(dāng)物體了位于透鏡物方二倍焦距上時(shí),則在像方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)像;當(dāng)物體了位于透鏡物方二倍焦距以內(nèi),焦點(diǎn)以外時(shí),則在像方二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)像;當(dāng)物體了位于透鏡物方焦點(diǎn)上時(shí),則像方不能成像;當(dāng)物體了位于透鏡物方焦點(diǎn)以內(nèi)時(shí),則像方也無像的形成,而在透鏡物方的同側(cè)比物體遠(yuǎn)的位置形成放大的直立虛像。廣東大平臺(tái)顯微鏡哪里有在材料研究領(lǐng)域,反射式明場顯微鏡得到普遍應(yīng)用。
掃描探針顯微鏡是一系列使用特殊探針與樣品進(jìn)行逐點(diǎn)掃描,測量針尖與樣品之間的相互作用,采集其物理性質(zhì)并獲得圖像的顯微鏡的統(tǒng)稱。代表性的顯微鏡有掃描隧道顯微鏡,原子力顯微鏡,近場光學(xué)顯微鏡等。如果說電子顯微鏡還有一點(diǎn)脫胎于光學(xué)顯微鏡的影子,那么掃描探針顯微鏡已經(jīng)完全擺脫了“鏡”的束縛,發(fā)展出了了一條完全不同顯微技術(shù)的道路。掃描隧道顯微鏡是STM 使掃描針尖與樣品之間距離極近(1納米以內(nèi))并施加電壓,利用量子力學(xué)中的隧穿效應(yīng),使電子能夠穿過中間的真空區(qū)域形成電流,電流的大小反映了樣品對應(yīng)位置的局域態(tài)密度,從而進(jìn)行成像。STM可以在真空、大氣、 液體等多種條件下進(jìn)行無破壞測, 量。目前橫向分辨率已經(jīng)達(dá)到0.1納米。
使用顯微鏡前,首先要把顯微鏡的目鏡和物鏡安裝上去。目鏡的安裝極為簡單,主要的問題在于物鏡的安裝,由于物鏡鏡頭較貴重,萬一安裝時(shí)螺紋沒合好,易摔到地上,造成鏡頭損壞,所以為了保險(xiǎn)起見,在安裝物鏡時(shí)用左手食指合中指托住物鏡,然后用右手將物鏡裝上去,這樣即使沒安裝好,也不會(huì)摔到地上。對光是使用顯微鏡時(shí)很重要的一步,一定要用低倍鏡對光,當(dāng)光線較強(qiáng)時(shí)用小光圈,平面鏡,而光線較弱時(shí)則用大光圈,凹面鏡,反光鏡要用雙手轉(zhuǎn)動(dòng),當(dāng)看到均勻光亮的圓形視野為止。光對好后不要隨便的移動(dòng)顯微鏡,以免光線不能準(zhǔn)確的通過反光鏡進(jìn)入通光孔。顯微鏡總的放大倍數(shù)等于目鏡的放大倍數(shù)和物鏡放大倍數(shù)的乘積。
光學(xué)顯微鏡使用可見光進(jìn)行照明,用光學(xué)透鏡進(jìn)行聚焦,人眼或者 CCD/CMOS 相機(jī)進(jìn)行觀察。較基本的明場照明顯微鏡由光源,目鏡,物鏡,載物臺(tái),聚光鏡,光圈等部件組成。收到衍射效應(yīng)的限制,光學(xué)顯微鏡的分辨率極限由極限給出,阿貝極限將光學(xué)顯微鏡的分辨率限制在約200納米處。 為了提高顯微鏡的成像素質(zhì),擴(kuò)展應(yīng)用范圍,光學(xué)顯微鏡經(jīng)過不斷的發(fā)展改進(jìn),已經(jīng)成為一個(gè)龐大的家族。電子顯微鏡以電子束作為光源對樣品進(jìn)行照明。由于電子的波長有效小于可見光,電子顯微鏡的分辨率相對于光學(xué)顯微鏡有效提高,目前已經(jīng)可以超過50皮米(1皮米等于千分之一納米)。按照工作原理的不同,電子顯微鏡可分為透射電子顯微鏡,掃描電子顯微鏡,反射電子顯微鏡,連續(xù)切片電子顯微鏡等等。這里介紹較主要的透射電鏡以及掃描電鏡。金相顯微鏡基本就是光學(xué)顯微鏡,主要用于看金屬晶格結(jié)構(gòu),巖石結(jié)構(gòu)等。廣州尼康基板測量顯微鏡去哪買
顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)有三種光學(xué)系統(tǒng)。廣東徠卡DM6M顯微鏡品牌
熒光顯微鏡有哪些激發(fā)光源?目前市面上90%以上的顯微鏡自帶的光源都只有用于照明的白光,而帶有激發(fā)光源用于生物觀測的熒光顯微鏡價(jià)格比較昂貴而且波段少,因此為顯微鏡匹配單獨(dú)的熒光激發(fā)光源成為物質(zhì)觀測的主選。熒光顯微鏡通過激發(fā)光源激發(fā)標(biāo)本發(fā)出熒光,再通過物鏡、目鏡放大系統(tǒng)來觀測標(biāo)本的熒光現(xiàn)象來進(jìn)行生物研究。熒光顯微鏡常用的激發(fā)光源:汞燈:高壓汞燈是利用電極放電使分子不斷解離、還原過程中發(fā)射光量子而發(fā)光,可以發(fā)射很強(qiáng)的紫外線和藍(lán)紫光,用來激發(fā)各種熒光物質(zhì),但光毒性很強(qiáng)。氙燈:氙燈是利用高壓電流啟用氙氣而形成的一束電弧光,可以用于不同波長之間的強(qiáng)度比較,激發(fā)在近紅外800-1000nm。廣東徠卡DM6M顯微鏡品牌