西藏高脂高糖動物模型實驗

    疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型動物抗抑郁對腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用（樣品篩選、IC50測定）大鼠強迫游泳試驗（大/小鼠，Noduls軟件、視屏分析）大/小鼠小鼠懸尾試驗（Noduls軟件、視屏分析）小鼠5-羥色胺增強試驗小鼠利血平誘導(dǎo)眼瞼下垂試驗小鼠育亨賓毒性增強試驗小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預(yù)見性刺激（CUMS）模型大鼠新環(huán)境進食抑制實驗大/小鼠小鼠腦內(nèi)單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測定小鼠對新生大鼠海馬神經(jīng)細胞的保護作用（谷氨酸損傷、過氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等）新生大鼠對SH-SY5Y細胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細胞抗驚厥育亨賓毒性增強試驗小鼠戊四唑驚厥小鼠荷包牡丹堿驚厥小鼠印防己驚厥小鼠抗焦慮與戊巴比妥類藥物的協(xié)同作用小鼠對巴比妥閾下劑量的影響小鼠再入睡試驗小鼠曠場實驗（大/小鼠，全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大/小鼠大鼠高架十字迷宮法（全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大鼠大鼠穿梭箱法（全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大鼠抗帕金森氏癥抗帕金森氏癥6-羥多巴胺致大鼠帕金森病模型大鼠MPTP模型（雙側(cè)損毀PD模型）大/小鼠氧化震顫素致顫模型大/小鼠疼痛?？梢钥朔祟惸承┘膊摲陂L，病程長和發(fā)病率低的缺點。西藏高脂高糖動物模型實驗

    40mmnaoh，)，并在金屬浴100℃加熱1h；(3)取出離心管，冷卻至室溫后，加入100μl的中和液(40mmtris-hcl，)，10000g離心2min后，取上清用于小鼠基因型鑒定。(3)pcr擴增：按照如系配置pcr反應(yīng)體系2×taqmix：10μl尾巴組織裂解液：2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward)：1μl(濃度：10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse)：1μl(濃度：10mm)ddh2o：6μl。引物序列如下：gm20541-loxp-forward序列：5’-attccccttcaagatagctac-3’；gm20541-loxp-reverse序列：5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’；six3-cre-forward序列：5’-gccgccgggatcactctcg-3’；six3-cre-reverse序列：5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。擴增程序：pcr反應(yīng)體系配制完后，在pcr儀上于95℃預(yù)加熱5分鐘使模板dna充分變性，然后進入擴增循環(huán)。在每一個循環(huán)中，先于95℃保持30秒鐘使模板變性，然后將溫度降到復(fù)性溫度58℃，保持30秒，使引物與模板充分退火；在72℃保持30秒，使引物在模板上延伸，合成dna，完成一個循環(huán)。重復(fù)這樣的循環(huán)25次，使擴增的dn段大量累積。，在72℃保持5分鐘，使產(chǎn)物延伸完整，4℃保存。(4)凝膠電泳稱取1g瓊脂糖放于100mltaebuffer中。北京乳鼠動物模型培養(yǎng)臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復(fù)制出來。

    指明方向。盡管現(xiàn)在基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組等組學(xué)已經(jīng)取得了非凡的突破，但人類對于組學(xué)的整體性和復(fù)雜性認識還是很初級，也就比開始高明那么一點點，對橫亙在組學(xué)和個體之間的裂隙毫無辦法——這也是目前生物研究被黑的重要原因之一：由于目前還不存在什么生物根本性原理，很多研究還是得靠盲人摸象式的實驗、觀察和歸納。當(dāng)年山中伸彌找到誘導(dǎo)分化細胞核重編程（也就是IPSc技術(shù)）的四個基因，可不是用理論算出來的，是大海撈針般地從成百上千個轉(zhuǎn)錄因子基因組合中篩選出來的。盡管以前的研究能有所幫助，但本質(zhì)還是差別不大，這也是為什么分子生物學(xué)科研常常被類比成民工搬磚。明白了這個背景，你大概就能理解小鼠的意義。既然我們對復(fù)雜系統(tǒng)的架構(gòu)原理毫無辦法，那我們不妨就建立一個標(biāo)準(zhǔn)模型，自上而下地研究問題。誠然，動物模型和人類差別巨大，小鼠、大鼠、兔、猴身上做的好好的實驗，放在人身上就不靈了（有時候，即使是針對某一個人群成功的實驗，換一個人群就不靈了，人類內(nèi)部的多樣性都不容小覷）。但是，同在哺乳動物大家庭，大家的系統(tǒng)架構(gòu)應(yīng)該是差不多的，差別只在細節(jié)，問題已經(jīng)從大海撈針變成了池塘撈針。為什么藥物會失效呢？如果是靶點有差異。

    所用儀器為bio-rad的化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)。結(jié)果見圖1中c和d，可以看出，通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達。實施例2本實施例以小鼠為目標(biāo)動物，對本發(fā)明提供的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的構(gòu)建方法進行說明，gm20541基因敲除的路線如圖2所示，具體操作如下：基因敲除小鼠獲取步驟：1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報告基因gfp的表達框、有neo抗性基因的表達框、兩端有同向排列l(wèi)oxp位點的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個外顯子；2利用dna同源重組技術(shù)將gm20541基因中的第3個外顯子替換，得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細胞；3利用步驟2得到的胚胎干細胞制備得到含gm20541基因敲除細胞的嵌合體小鼠(圖2)；4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育，在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定：實施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實驗結(jié)果，擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r，擴增產(chǎn)物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’；sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結(jié)果見圖3中a。SD大鼠腦缺血模型建立。

    所述高原光照環(huán)境模擬裝置15包括可見暖光系統(tǒng)和照明亮度無極控制系統(tǒng)，所述可見暖光系統(tǒng)設(shè)置飼養(yǎng)倉2頂部。本實施例的工作原理:本系統(tǒng)集成了可見暖光系統(tǒng)(可模擬高原紅外線和紫外線)與照明亮度無極控制系統(tǒng)，需要燈光時，可通過燈光系統(tǒng)開啟紫外燈以及照明燈，并可根據(jù)所需實現(xiàn)亮度調(diào)節(jié)，通過日光燈加紫外線燈來實現(xiàn)高原高紫外線光照環(huán)境。實施例5在實施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)，所述高原溫度環(huán)境模擬裝置16包括降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)和溫度采集顯示系統(tǒng)。本實施例的工作原理：本系統(tǒng)配置降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)與溫度采集顯示系統(tǒng)使系統(tǒng)內(nèi)溫度可無極調(diào)控，以保障海拔(3000m～7000m)高原溫度環(huán)境進行模擬，溫度調(diào)節(jié)通過冷暖風(fēng)機來實現(xiàn)，就是和空調(diào)一樣的原理。實施例6在實施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)，所述高原濕度環(huán)境模擬裝置17包括加濕系統(tǒng)、除濕系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)和濕度采集顯示系統(tǒng)。本實施例的工作原理：本系統(tǒng)配置加濕系統(tǒng)、除濕系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)與濕度采集顯示系統(tǒng)使系統(tǒng)內(nèi)濕度可無極調(diào)控，以保障海拔(3000m～7000m)高原濕度環(huán)境進行模擬。避免了在人身上進行實驗所帶來的風(fēng)險。湖北動物模型實驗

放血致失血性貧血小鼠模型。西藏高脂高糖動物模型實驗

    常見的有組織病理染色、WesternBlot、PCR等），實驗儀器是否需要預(yù)約使用。如果需要外送生物公司檢測，需要提前聯(lián)系好商家，以及了解清楚樣本如何獲取，如何運輸。飼養(yǎng)動物及干預(yù)動物購買后需要將時間節(jié)點提前規(guī)劃好，比如，周需要做什么？測量體重？觀察飲食？測量需要的指標(biāo)？中間有無特殊操作？比如灌胃、測量體重、做CT檢測、取血？……第幾周取材？取材需要哪些組織？預(yù)實驗方案就要提前設(shè)計清楚以上內(nèi)容。取材及樣品準(zhǔn)備取材需要提前到動物房禁食、稱體重、取出動物、手術(shù)器械的消毒、組織固定所需要的試劑和EP管，WesternBlot和PCR所需要的樣本儲存條件。比如凍存管、EP管，是否需要冰塊？是否需要液氮？取材當(dāng)天需要多少人？是否需要請人幫忙？如果所需要取出的樣本較多，建議大家請人一起幫忙，流水線作業(yè)，這樣能節(jié)省時間，并且能保證樣品的質(zhì)量。如果請人，每個人需要負責(zé)哪一板塊的工作，比如誰負責(zé)麻醉，誰負責(zé)取血液，誰負責(zé)取，誰負責(zé)拍照、誰負責(zé)儲存，都需要提前規(guī)劃交代清楚。實驗指標(biāo)檢測如果是需要自己做的檢測，比如常見的WesternBlot、PCR，建議提前可以看看教程（無論是視頻還是貼吧，都要自己多方參考）。有了一定的理論基礎(chǔ)后。西藏高脂高糖動物模型實驗