廣東醫(yī)用細胞培養(yǎng)基

    MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基，與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富，在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分，廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養(yǎng)。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色，PH值～，**適合細胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點，研究表明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的細胞時（如乳腺組織），比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”，是體外培養(yǎng)中為預防微生物污染**常用的***，其中，青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成，對革蘭陽性菌特別有效；而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合，抑制細菌蛋白質的合成，對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效，但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預防絕大部分的細菌污染。 本產品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分，故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。廣東醫(yī)用細胞培養(yǎng)基

DMEM，即 Dulbecco 改良的 Eagle 培養(yǎng)基，在細胞培養(yǎng)領域占據(jù)著極為重要的地位。它源于經(jīng)典的 Eagle 培養(yǎng)基，經(jīng)科學家 Dulbecco 改良優(yōu)化后，煥發(fā)出全新活力。DMEM 培養(yǎng)基成分豐富，氨基酸濃度是原始 Eagle 培養(yǎng)基的兩倍，還涵蓋了非必需氨基酸，為細胞蛋白質合成筑牢根基。其維生素含量亦是 Eagle 培養(yǎng)基的四倍之多，積極參與細胞內各類代謝反應，助力細胞維持正常生理功能。同時，培養(yǎng)基中包含酸，這一糖酵解途徑的關鍵物質，在細胞能量供應方面發(fā)揮著重要作用，時刻為細胞的生命活動提供動力支持。遼寧DMEM細胞培養(yǎng)基批發(fā)L-谷氨酰胺是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基。

    RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開發(fā)出來的，RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常用初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的，現(xiàn)在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養(yǎng)，包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞，是使用常用為比較多的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA，這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養(yǎng)應用，我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定，不會自發(fā)的降解。細胞利用其機制是：在細胞培養(yǎng)時，細胞會逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似，連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成多余的氨，更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨?？梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無需適應，并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間，減少傳代次數(shù)，即節(jié)省了時間也節(jié)約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞相比，活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細胞培養(yǎng)時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用，有效促進細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要。針對細胞培養(yǎng)應用，我們提供多種組分的 McCoy’s 5A改良培養(yǎng)基。

    培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通?？赡褪?60mOsm/kg～320mOsm/kg。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細胞所需pH在-。但是，細胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進行緩沖，因此，氣相中的CO2濃度應與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設定在5％，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為；如果CO2濃度維持在10％，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細胞培養(yǎng)瓶蓋不應擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH-范圍內具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下，細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。MCDB是為特定細胞設計的低蛋白和無血清培養(yǎng)的培養(yǎng)基。正規(guī)細胞培養(yǎng)基檢測

靈活適配血清/無血清培養(yǎng)，DMEM/F12助力定制化實驗方案。廣東醫(yī)用細胞培養(yǎng)基

    Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養(yǎng)基初設計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現(xiàn)已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑，對細胞無毒性作用，添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍，可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色，PH值～，適合細胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點，研究表明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的細胞時（如乳腺組織），較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。 廣東醫(yī)用細胞培養(yǎng)基

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