美國(guó)卵母細(xì)胞紡錘體Hoechst染料

Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術(shù)，無需對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行染色，即可實(shí)時(shí)、清晰、高對(duì)比度地進(jìn)行紡錘體結(jié)構(gòu)和透明帶成像，對(duì)ICSI、核移植操作、卵母細(xì)胞質(zhì)量評(píng)價(jià)等有很好的輔助作用。主要應(yīng)用ICSI：在單精胞漿注射過程中定位初級(jí)卵母細(xì)胞，避免卵的破裂損傷，增強(qiáng)胚胎的發(fā)育潛能。卵評(píng)估：利用定量的分析數(shù)據(jù)對(duì)卵進(jìn)行分級(jí)，改善對(duì)胚胎的選擇。體外成熟評(píng)估：在未成熟卵催化（IVM）過程判斷成熟期，判斷依據(jù)采用的是準(zhǔn)確的識(shí)別紡錘體，而非不準(zhǔn)確的極體。質(zhì)量控制：利用定量的分析數(shù)據(jù)對(duì)卵進(jìn)行分級(jí)，改善對(duì)胚胎的選擇。核移植：顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質(zhì)，使得核移植的成功率增加了80%，并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究：對(duì)冷凍的初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行解凍前和解凍后的定量分析，從而判斷卵的發(fā)育力，改善妊娠率。紡錘體研究：檢測(cè)胚胎中紡錘體的發(fā)育過程，確定正常和非正常分裂率（只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡）?？梢詫?duì)染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像，從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究：測(cè)量卵母細(xì)胞的透明帶；準(zhǔn)確測(cè)量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化，判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài)紡錘體在細(xì)胞分裂過程中經(jīng)歷明顯的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。美國(guó)卵母細(xì)胞紡錘體Hoechst染料

紡錘體觀測(cè)儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道，成熟的卵母細(xì)胞含有1個(gè)極體，也就是***極體。IVF加入精子后，精子會(huì)穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子，隨著時(shí)間的推移，～6小時(shí)后卵子的紡錘體會(huì)將染色單體拉向兩極，進(jìn)而排出第二極體，再往后大約加精后9～16小時(shí)，雌雄原核會(huì)出現(xiàn)，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對(duì)于那些沒有受精的卵子，到了原核出現(xiàn)的時(shí)間窗發(fā)現(xiàn)沒有受精時(shí)再去補(bǔ)救ICSI，往往錯(cuò)過了卵子的比較好受精時(shí)間，因?yàn)闆]有受精的卵子會(huì)在體外老化，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以，我們?cè)诩泳蟮?～6小時(shí)，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精，**的增加了那些受精障礙患者的受精率，也避免了卵子的老化。當(dāng)然，偶爾也會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救，實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測(cè)儀觀察并統(tǒng)計(jì)紡錘體的數(shù)目，82.7%含有一個(gè)紡錘體，17.3%含有兩個(gè)紡錘體，并對(duì)含有一個(gè)紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI；而對(duì)照組并未用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體，只對(duì)未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率，降低多原核受精比率。深圳Hamilton Thorne紡錘體液晶偏光補(bǔ)償器紡錘體的異常可能與人類衰老和疾病的發(fā)生有關(guān)。

在有絲分裂中，紡錘體負(fù)責(zé)將姐妹染色單體分離并牽引至細(xì)胞兩極，形成兩個(gè)遺傳物質(zhì)完全相同的子細(xì)胞。而在減數(shù)分裂中，紡錘體則負(fù)責(zé)將同源染色體分離并牽引至細(xì)胞兩極，形成四個(gè)遺傳物質(zhì)相似的子細(xì)胞。這一過程實(shí)現(xiàn)了遺傳信息的重組和配子的形成。其次，在有絲分裂中，紡錘體的形成和分裂過程相對(duì)簡(jiǎn)單，主要依賴于中心體的復(fù)制和分離以及微管的動(dòng)態(tài)生長(zhǎng)和縮短。而在減數(shù)分裂中，紡錘體的形成和分裂過程則更加復(fù)雜。在減數(shù)分裂Ⅰ的前期，同源染色體需要發(fā)生配對(duì)、聯(lián)會(huì)、交換和交叉等過程，這些過程都依賴于紡錘體的微管網(wǎng)絡(luò)。此外，在減數(shù)分裂Ⅱ中，姐妹染色單體的分離也需要紡錘體的牽引和定位。此外紡錘體在有絲分裂和減數(shù)分裂中的形態(tài)和大小也存在差異。在有絲分裂中，紡錘體通常呈現(xiàn)出較為規(guī)則的紡錘形狀，而在減數(shù)分裂中，紡錘體的形態(tài)則更加多樣化，可能呈現(xiàn)出不規(guī)則的形狀或分叉的形態(tài)。

紡錘體觀測(cè)儀使ICSI更加安全可靠在進(jìn)行單精子卵胞漿內(nèi)注射（ICSI）授精時(shí)，**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞時(shí)，通常認(rèn)為，卵母細(xì)胞紡錘**于***極體附近，故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動(dòng)卵母細(xì)胞使其***極**于6點(diǎn)或12點(diǎn)處，然后在3點(diǎn)處注入精子。但是，在大量使用紡錘體觀測(cè)儀后發(fā)現(xiàn)，***極體并不能很好地預(yù)測(cè)紡錘體的位置。一項(xiàng)研究提示，在ICSI后，用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體與***極體的夾角，結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細(xì)胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動(dòng)，或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變，普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇，可能會(huì)損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測(cè)儀，可以精確地對(duì)卵母細(xì)胞中紡錘體的位置進(jìn)行定位，從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體，使ICSI更加安全可靠。有文獻(xiàn)報(bào)道，在進(jìn)行ICSI時(shí)，觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細(xì)胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，有些卵母細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的，但在紡錘體觀測(cè)儀這個(gè)“照妖鏡”下，就能顯出原形，表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體，這類卵母細(xì)胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。紡錘體的形成需要多種蛋白質(zhì)的參與，包括微管相關(guān)蛋白和中心體蛋白等。

通過靶向微管蛋白，可以恢復(fù)微管的穩(wěn)定性和功能，糾正紡錘體的組裝異常。例如，使用微管穩(wěn)定劑（如紫杉醇）可以穩(wěn)定微管，改善紡錘體的組裝和染色體的分離。此外，通過抑制微管蛋白的異常磷酸化，也可以恢復(fù)微管的正常功能。通過恢復(fù)染色體穩(wěn)定性，可以減少基因組的不穩(wěn)定性，改善神經(jīng)元的基因表達(dá)和功能。例如，使用染色體穩(wěn)定劑（如TOP2抑制劑）可以穩(wěn)定染色體，減少基因組的不穩(wěn)定性。此外，通過修復(fù)DNA損傷，也可以恢復(fù)染色體的穩(wěn)定性。紡錘體在細(xì)胞分裂末期逐漸解體，為細(xì)胞質(zhì)分裂做準(zhǔn)備。武漢哺乳動(dòng)物紡錘體改善分級(jí)

紡錘體形態(tài)的變化反映了細(xì)胞分裂的不同階段。美國(guó)卵母細(xì)胞紡錘體Hoechst染料

什么是紡錘體？它有多重要？紡錘體主要由微管蛋白組成，微管蛋白是一種含有α和β亞單位的異二聚體。紡錘體不是一成不變的，常常處于組裝和去組裝的動(dòng)態(tài)變化過程中，一般在細(xì)胞分裂的中、后期，紡錘體結(jié)構(gòu)較為典型。紡錘體主要有兩個(gè)作用：其一，排列與分配染色體；其二，決定細(xì)胞胞質(zhì)分裂的分裂面。紡錘體的完整性決定了染色體分裂過程在時(shí)間和空間上的準(zhǔn)確性。紡錘體就像一位聰明的大力士的雙手，在細(xì)胞分裂過程中，能精細(xì)的將等位染色體平均拉向細(xì)胞的兩極，確保分裂后的2個(gè)子細(xì)胞中的染色體數(shù)目相等。但是，如果這個(gè)大力士多了一只或幾只手，染色體的分配將紊亂，導(dǎo)致非整倍體。紡錘體損傷的增加多見于高齡婦女，或接觸某些化學(xué)物質(zhì)的卵母細(xì)胞。在細(xì)胞分裂過程中，紡錘體對(duì)卵母細(xì)胞染色體的平衡、運(yùn)動(dòng)、分配、和極體的排出非常關(guān)鍵。卵母細(xì)胞成熟過程中的兩次減數(shù)分裂形成兩次紡錘體，卵母細(xì)胞受精、雌雄原核融合后又會(huì)形成有絲分裂紡錘體。美國(guó)卵母細(xì)胞紡錘體Hoechst染料