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紡錘體觀測儀在補救ICSI中的應(yīng)用我們知道,成熟的卵母細胞含有1個極體,也就是***極體。IVF加入精子后,精子會穿透層層障礙**終進入卵子,隨著時間的推移,~6小時后卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極,進而排出第二極體,再往后大約加精后9~16小時,雌雄原核會出現(xiàn),而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子,到了原核出現(xiàn)的時間窗發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補救ICSI,往往錯過了卵子的比較好受精時間,因為沒有受精的卵子會在體外老化,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以,我們在加精后的4~6小時,通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,也避免了卵子的老化。當(dāng)然,偶爾也會出現(xiàn)錯誤補救。文獻報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細胞進行補救,實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目,82.7%含有一個紡錘體,17.3%含有兩個紡錘體,并對含有一個紡錘體的卵母細胞進行補救ICSI;而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體,只對未排出第二極體的卵母細胞進行補救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,降低多原核受精比率。紡錘體的異常也是疾病發(fā)生和發(fā)展的一個重要因素。北京非侵入式成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿
紡錘體功能分解在細胞分裂中,其主要作用有兩個部分。其一為排列與分裂染色體。紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。紡錘體的正常生成是染色體排列的必要條件。紡錘體生成完畢后一般會有5-20分鐘的延遲,以供細胞調(diào)整著絲點上微管束的極性,以及決定是否所有的著絲點都附著正確。此后細胞進入分裂后期,染色體分裂為兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。同樣,紡錘體的完整性決定這個分裂過程在時間和空間上的準確性。紡錘體另一功能為決定胞質(zhì)分裂的分裂面。染色體分裂的同時,紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極,而停弛在紡錘體**,形成紡錘**體(centralspindle)。在紡錘中體的**為兩組極性相反的微管交疊的區(qū)域,稱為紡錘**區(qū)(spindlemidzone).此**區(qū)就是接下來的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開始于分裂后期的較晚期。胞質(zhì)分裂一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時,此期間兩個子細胞由中心顆粒體(midbody)連接。一般認為紡錘體的分解發(fā)生在細胞分裂末期。北京紡錘體實時成像紡錘體胚胎發(fā)育紡錘體的形成與細胞骨架的重構(gòu)密切相關(guān)。
為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷,研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細胞骨架保護劑,如紫杉醇(Taxol)。紫杉醇能夠穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu),防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術(shù),研究者可以實時監(jiān)測紫杉醇對紡錘體的保護效果,評估其在冷凍保存過程中的作用機制。此外,還可以進一步觀察解凍后卵母細胞的發(fā)育潛能,為臨床應(yīng)用提供可靠依據(jù)。無需對細胞進行固定和染色,保持細胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r監(jiān)測紡錘體的形態(tài)變化,評估冷凍效果。能夠捕捉到細微的紡錘體形態(tài)變化,提高評估的準確性。
在有絲分裂中,紡錘體的形成與功能至關(guān)重要。首先,在有絲分裂前期,中心體復(fù)制并分離至細胞兩極,形成紡錘體的兩極。隨后,微管從兩極向中心區(qū)域延伸,形成紡錘體的主干。在中期,染色體在紡錘絲的牽引下,自動在赤道板排列整齊。當(dāng)細胞進入分裂后期,紡錘體微管收縮,將染色體牽引至兩極,形成兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。這一過程確保了遺傳信息的準確傳遞,避免了染色體分離錯誤導(dǎo)致的遺傳異常。此外,紡錘體還決定了胞質(zhì)分裂的分裂面。在染色體分裂的同時,紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極,而是停弛在紡錘體中心,形成紡錘中心體。紡錘中心體的中心區(qū)域為兩組極性相反的微管交疊區(qū),稱為紡錘中心區(qū),它決定了接下來的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開始于分裂后期的較晚期,一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時,此期間兩個子細胞由中心顆粒體連接。紡錘體通過精確控制胞質(zhì)分裂面的位置,確保了細胞分裂的對稱性和穩(wěn)定性。紡錘體形成缺陷是多種遺傳疾病的共同特征。
卵母細胞紡錘體對低溫環(huán)境極為敏感,冷凍過程中可能發(fā)生的冰晶形成、溶液濃縮等物理化學(xué)變化均會對紡錘體造成損傷,導(dǎo)致其形態(tài)異常、穩(wěn)定性下降。在冷凍和解凍過程中,紡錘體微管可能發(fā)生解聚和重聚,這一過程不僅影響紡錘體的形態(tài),還可能破壞其內(nèi)部結(jié)構(gòu)和功能,進而影響卵母細胞的發(fā)育潛能。為了減輕冷凍損傷,研究者們嘗試在冷凍液中添加細胞骨架保護劑,如紫杉醇等。然而,保護劑的選擇、濃度及作用機制仍需進一步研究和優(yōu)化。紡錘體的功能異常與某些藥物的副作用有關(guān),如化療藥物可能干擾紡錘體的形成和功能。上海紡錘體
紡錘體在細胞分裂后期通過收縮力推動染色體分離。北京非侵入式成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿
在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,卵母細胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點之一。尤其是針對卵母細胞內(nèi)部高度復(fù)雜且精細的紡錘體結(jié)構(gòu),其冷凍過程中的穩(wěn)定性與完整性直接關(guān)系到解凍后卵母細胞的存活率及發(fā)育潛能。紡錘體作為卵母細胞內(nèi)部的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),由微管等高分子物質(zhì)有序排列而成,具有雙折射性。這種特性使得紡錘體在偏振光下能夠呈現(xiàn)出獨特的形態(tài)和特征,從而被Polscope等偏振光顯微鏡捕捉并觀察。雙折射性紡錘體的形態(tài)、穩(wěn)定性和完整性對于卵母細胞的正常減數(shù)分裂及胚胎發(fā)育至關(guān)重要。北京非侵入式成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿