單分子蛋白數(shù)字ELISA極速

參考原理：血液中單個(gè)蛋白質(zhì)分子的檢測(cè)有助于識(shí)別許多新的診斷性蛋白質(zhì)標(biāo)記物。我們報(bào)告了一種同時(shí)檢測(cè)數(shù)百至數(shù)千個(gè)單獨(dú)蛋白質(zhì)分子的方法，該方法能夠檢測(cè)到非常低濃度的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)被捕獲在顯微珠上，并用酶標(biāo)記，每個(gè)顯微珠上有一個(gè)或零個(gè)酶標(biāo)記的蛋白質(zhì)。通過(guò)將這些顯微珠分離成50飛米的陣列反應(yīng)室，單個(gè)蛋白質(zhì)可以通過(guò)熒光想象檢測(cè)到。通過(guò)單化這些陣列中的分子，~10-20種酶可以在100μL（~10?19M）中檢測(cè)到。單個(gè)基于酶標(biāo)記的分子酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（數(shù)字ELISA)能夠檢測(cè)血清中臨床相關(guān)的蛋白質(zhì)，其濃度（<10?15M）遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)ELISA3-5。數(shù)字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除術(shù)的患者血清中檢測(cè)到前列腺特異性抗原，比較低至14fmol/mL（0.4fmol）。

數(shù)字化高敏ELISA芯片，可以進(jìn)行8孔、4孔的靈活檢測(cè)。單分子蛋白數(shù)字ELISA極速

創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA

我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測(cè)產(chǎn)品應(yīng)用場(chǎng)景：適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場(chǎng)、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)、ELISA檢測(cè)、動(dòng)物病情檢測(cè)等各種應(yīng)用場(chǎng)景應(yīng)用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測(cè)，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。

將200,000個(gè)功能化DNA捕獲探針與100μL孵育含有目標(biāo)DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小時(shí)后，移除DNA靶標(biāo)溶液，用0.2×SSC緩沖液洗滌珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新懸浮并與10nM混合生物素標(biāo)記的信號(hào)探針(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’）對(duì)目標(biāo)DNA具有特異性，孵育1小時(shí)。然后將珠子在去除信號(hào)探針后用含0.1%吐溫-20的0.2×SSC緩沖液洗滌三次。隨后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液，混勻并混合1小時(shí)。然后將珠子分離并在含0.1%吐溫-20的5×PBS緩沖液中洗滌六次。重懸于10μLofPBS中并加載到飛升微升孔陣列上。 單分子蛋白數(shù)字ELISA極速芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA，極速檢測(cè)，檢測(cè)用時(shí)只需要 15-30min！

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列（圖1C）我們稱之為單分子陣列（SiMoA）——可以分離和檢測(cè)單個(gè)酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個(gè)酶的動(dòng)力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測(cè)單個(gè)酶的能力來(lái)檢測(cè)用酶標(biāo)記的單個(gè)蛋白質(zhì)分子。在這個(gè)單分子免疫測(cè)定的第一步（圖1A)，在微球（直徑μm）上形成一個(gè)三明治抗體復(fù)合物，結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記，如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測(cè)定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品，蛋白質(zhì)的比值分子（以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物）與微球的比例很小（通常小于1：1)，因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布，導(dǎo)致單個(gè)微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如，如果在(3000個(gè)分子）的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì)，并且在200，000個(gè)微球上進(jìn)行標(biāo)記，則珠子，然后，。無(wú)法檢測(cè)到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)技術(shù)（例如，平板閱讀器）的標(biāo)簽，因?yàn)闊晒馊玖嫌擅糠N酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個(gè)大卵試驗(yàn)體積（通常為)，并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬(wàn)種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號(hào)背景。

芯棄疾JX-8B數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測(cè)產(chǎn)品為什么能做到？

先進(jìn)新型的單分子檢測(cè)方法的普及版；每個(gè)生物/醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)；使用現(xiàn)有平臺(tái)就能做的單分子免疫檢測(cè)且具有以下特點(diǎn)：多重、超敏微量、極速靈活、開(kāi)放；

我們的芯棄疾.單分子ELISA產(chǎn)品：同樣的單分子技術(shù)方案，但創(chuàng)新性芯片方案，主要過(guò)程均芯片上完成，只有需搭配簡(jiǎn)單小型實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，或?qū)嶒?yàn)室常見(jiàn)已有設(shè)備；實(shí)現(xiàn)單分子檢測(cè)方案的小型化、靈活使用、低成本。更符合國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的各種科研使用場(chǎng)景 每個(gè)生物/醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)；

POCT芯片的即時(shí)診斷革新：芯棄疾POCT芯片采用卡片式設(shè)計(jì)（尺寸8×5cm），集成8個(gè)檢測(cè)通道，搭配全自動(dòng)加樣儀（加樣精度±0.1μL）與便攜式熒光掃描儀（分辨率5μm），實(shí)現(xiàn)“樣本進(jìn)-結(jié)果出”的15分鐘極速檢測(cè)。其**性能媲美化學(xué)發(fā)光，如超敏肌鈣蛋白T（hs-cTnT）檢測(cè)限達(dá)10pg/mL（線性范圍0-1000pg/mL），可在急診科快速鑒別心肌梗死（閾值>14pg/mL）。在膿毒癥管理中，PCT與IL-6聯(lián)合檢測(cè)靈敏度達(dá)95%，較單一指標(biāo)提升20%。芯片操作全程自動(dòng)化，醫(yī)護(hù)人員*需加載樣本即可完成檢測(cè)，無(wú)需復(fù)雜培訓(xùn)。在基層醫(yī)療場(chǎng)景中，該技術(shù)已應(yīng)用于核酸快檢（靈敏度98%）、流感分型（A/B型同步檢測(cè)）及糖尿病酮癥酸中毒（β-羥丁酸檢測(cè)）等場(chǎng)景，檢測(cè)時(shí)間從2小時(shí)縮短至15分鐘，誤診率降低至5%以下。自動(dòng)版芯片操作簡(jiǎn)便穩(wěn)定，2-4μl 微量樣本可測(cè)多項(xiàng)指標(biāo)，滿足高通量檢測(cè)需求。創(chuàng)新性數(shù)字ELISA檢測(cè)通量

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA，微量檢測(cè)，使用微量樣本就能測(cè)試；單分子蛋白數(shù)字ELISA極速

全自動(dòng)加樣與圖像分析系統(tǒng)：智能化檢測(cè)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，全自動(dòng)加樣儀與圖像分析軟件構(gòu)成數(shù)字ELISA芯片的智能化**，實(shí)現(xiàn)從樣本處理到結(jié)果輸出的全流程自動(dòng)化。加樣儀的8通道設(shè)計(jì)確保精細(xì)定量加樣，避免人工操作誤差，加樣精度達(dá)±1%；圖像分析軟件通過(guò)熒光信號(hào)識(shí)別與四參數(shù)Logistic曲線擬合，自動(dòng)計(jì)算濃度值，相關(guān)系數(shù)r2≥0.999，結(jié)果可靠性高。在自動(dòng)版芯片檢測(cè)中，系統(tǒng)可實(shí)時(shí)監(jiān)控磁珠捕獲效率，自動(dòng)剔除異常數(shù)據(jù)點(diǎn)，確保CV值<5%。該智能化體系不僅提升檢測(cè)效率，更降低了對(duì)操作人員的技術(shù)依賴，適用于基層醫(yī)療單位與高通量檢測(cè)場(chǎng)景，推動(dòng)免疫檢測(cè)從人工操作向自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化轉(zhuǎn)型。單分子蛋白數(shù)字ELISA極速