芯棄疾單分子數(shù)字ELISA靈活

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

我們已經(jīng)開(kāi)發(fā)了兩種臨床相關(guān)蛋白的檢測(cè)方法——前列腺特異性抗原（PSA）和腫瘤壞死因子α（TNF-α），以確定高酶標(biāo)記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測(cè)方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開(kāi)發(fā)這些試驗(yàn)的關(guān)鍵參數(shù)是：珠子濃度和兩種標(biāo)記試劑（檢測(cè)試劑和酶偶聯(lián)物）的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個(gè)相互競(jìng)爭(zhēng)的因素。首先，足夠的珠子必須在場(chǎng)以從熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)中捕獲大部分目標(biāo)分析物從熱力學(xué)角度看，100μL中有20萬(wàn)個(gè)珠子，每個(gè)珠子大約有8萬(wàn)個(gè)與之結(jié)合的抗體25相當(dāng)于約0.3nM的抗體濃度，在該濃度下，抗體-蛋白平衡導(dǎo)致高捕獲效率（>70%）(D.M.R.，E.P.F.，D.C.D.，未發(fā)表工作）。 自動(dòng)版數(shù)字 ELISA 芯片配套全自動(dòng)加樣儀與掃描儀，單個(gè)芯片支持≥8 樣本同時(shí)反應(yīng)，總時(shí)長(zhǎng) 30 分鐘。芯棄疾單分子數(shù)字ELISA靈活

創(chuàng)新性的解決方案：芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA

我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測(cè)產(chǎn)品應(yīng)用場(chǎng)景：適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場(chǎng)、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)、ELISA檢測(cè)、動(dòng)物病情檢測(cè)等各種應(yīng)用場(chǎng)景應(yīng)用范圍：各種高靈敏多重免疫檢測(cè)，可替代各種ELISA試劑盒，及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。

根據(jù)目標(biāo)蛋白的抗體制備了功能化的微球生產(chǎn)商說(shuō)明。含有目標(biāo)蛋白的100-μL測(cè)試溶液與200,000個(gè)磁珠懸浮液孵育2小時(shí)至23°C。然后將磁珠分離并用PBS和0.1%Tween-20洗滌三次。磁珠重新懸浮后與含有檢測(cè)抗體（通常約為1nM)的溶液孵育45分鐘。在23°C下最小值。然后將珠子分別用PBS和0.1%洗滌三次。Tween-20。將珠子與含有SβG（1–50pM)的溶液在23°C孵育30分鐘，然后分離并在PBSand0.1%Tween-20中洗滌六次。隨后將珠子重懸于10μLofPBS中，并加載到飛升液位陣列中。整個(gè)實(shí)驗(yàn)的總時(shí)間約為~6小時(shí)。 單分子陣列數(shù)字ELISA單分子POCT產(chǎn)品-數(shù)字化ELISA芯片，幫您數(shù)字化高靈敏檢測(cè)，且微量樣本多重指標(biāo)檢測(cè)；

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測(cè)產(chǎn)品；將傳統(tǒng)的模擬信號(hào)轉(zhuǎn)化為新型的數(shù)字化信號(hào)；創(chuàng)新型原理，有效提高檢測(cè)靈敏度，可達(dá)fg/aM級(jí)！
陣列芯片原理：從15μLof基質(zhì)中的500,000個(gè)珠子開(kāi)始。結(jié)果表明，陣列圖像的定量分析大約一半的孔在珠子沉降幾分鐘后被占據(jù)。對(duì)于SimoaHD-1分析儀，沉降時(shí)間減少到90秒，分布在三個(gè)儀器處理周期之間。隨著珠子重新沉降到陣列中，儀器對(duì)其他操作（密封和成像）進(jìn)行索引，這些操作已經(jīng)加載到陣列上。通常，會(huì)檢測(cè)25,000-50,000個(gè)珠子。由于Simoa中的測(cè)量單位（AEB）是一個(gè)比率，一定珠裝載量的差異不影響數(shù)據(jù)質(zhì)量或在大多的范圍內(nèi)保持精度，前提是存在足夠的珠子數(shù)量以保持在泊松噪聲水平之上。22數(shù)據(jù)質(zhì)量會(huì)受到影響，當(dāng)泊松噪聲主導(dǎo)測(cè)量誤差時(shí)。這發(fā)生在與背景相關(guān)的正井?dāng)?shù)量降至約50個(gè)珠子以下時(shí)，此時(shí)泊松噪聲明顯影響測(cè)量的變異系數(shù)（CV）。

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列（圖1C）我們稱(chēng)之為單分子陣列（SiMoA）——可以分離和檢測(cè)單個(gè)酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個(gè)酶的動(dòng)力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測(cè)單個(gè)酶的能力來(lái)檢測(cè)用酶標(biāo)記的單個(gè)蛋白質(zhì)分子。在這個(gè)單分子免疫測(cè)定的第一步（圖1A)，在微球（直徑μm）上形成一個(gè)三明治抗體復(fù)合物，結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記，如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測(cè)定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品，蛋白質(zhì)的比值分子（以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物）與微球的比例很?。ㄍǔＰ∮?：1)，因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布，導(dǎo)致單個(gè)微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如，如果在(3000個(gè)分子）的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì)，并且在200，000個(gè)微球上進(jìn)行標(biāo)記，則珠子，然后，。無(wú)法檢測(cè)到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)技術(shù)（例如，平板閱讀器）的標(biāo)簽，因?yàn)闊晒馊玖嫌擅糠N酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個(gè)大卵試驗(yàn)體積（通常為)，并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬(wàn)種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號(hào)背景。 6）數(shù)字化高敏ELISA芯片試劑盒，10ul樣本可同時(shí)測(cè)2-4個(gè)指標(biāo)；

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

為了證明檢測(cè)極低濃度的可能診斷價(jià)值使用數(shù)字ELISA檢測(cè)血液中的蛋白質(zhì)，對(duì)接受治理性前列腺切除術(shù)（RP）的患者血清樣本中的PSA進(jìn)行了測(cè)量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具，也用于監(jiān)測(cè)住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后，絕大多數(shù)PSA被消除，水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測(cè)方法的檢測(cè)限（3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測(cè)這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測(cè)前列腺病的復(fù)發(fā)，但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會(huì)被發(fā)現(xiàn)。 芯棄疾JX-8B簡(jiǎn)易版單分子ELISA檢測(cè)產(chǎn)品，極速檢測(cè)，檢測(cè)用時(shí)只需要 15-30min！創(chuàng)新性數(shù)字ELISA試劑開(kāi)放

芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測(cè)產(chǎn)品，每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測(cè)；芯棄疾單分子數(shù)字ELISA靈活

    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)

珠子以?xún)煞N不同的方式讀出。首先，在與100μMresorufin-阝-D孵育1小時(shí)后，用熒光板讀出器以100μL方式讀出珠子結(jié)合-半乳糖苷（RGP），一種熒光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板閱讀器上，檢測(cè)限為15fMofS阝G（圖2）。其次，將珠子加載然后將RGP溶液密封到陣列的孔中，單個(gè)酶的信號(hào)被允許在反應(yīng)室中積累，并每30秒獲取一次熒光圖像。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)獲取陣列的白光圖像以識(shí)別含有珠子的孔（含有珠子的孔散射光與空井不同）。熒光圖像用于確定哪些微球具有相關(guān)的結(jié)合酶（從時(shí)間變化的熒光圖像中強(qiáng)度增加）。圖2顯示了微球中含酶的比例與總體S阝G濃度的關(guān)系的對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)圖。檢測(cè)到的比較低酶偶聯(lián)物濃度為350飛摩爾（zM），并通過(guò)外推信號(hào)等于的酶濃度計(jì)算得出的檢測(cè)限（LOD）。 芯棄疾單分子數(shù)字ELISA靈活