芯棄疾數(shù)字ELISA快速檢測

來源: 發(fā)布時間:2025-05-08

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

數(shù)字ELISA測量蛋白質(zhì)濃度遠低于傳統(tǒng)ELISA的能力源于兩種效應:1)SiMoA對酶標記的高度敏感性;以及2)通過數(shù)字化蛋白質(zhì)檢測可以實現(xiàn)的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術(shù)到標簽,抗體親和力,試驗背景,以及背景測量值的變異(%CV)27.SiMoA對酶非常敏感標簽(圖2)為在數(shù)字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標記蛋白提供了基礎(chǔ)。也就是說,對于給定親和力的抗體,其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定,SiMoA的高標記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明,數(shù)字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結(jié)合(NSB)與捕獲珠表面結(jié)合(補充表2)。AsSiMoA相比傳統(tǒng)檢測方法具有更高的標記靈敏度,明顯減少了檢測抗體(~1nM)和酶標記物(1–50pM)的需要,以檢測結(jié)合事件,與傳統(tǒng)方法相比(標記試劑濃度~10nM)。降低的標記物濃度減少了NSB到捕獲表面,從而導致背景信號明顯降低。 超多重檢測芯片節(jié)省耗材成本,21 項指標共享一套耗材,適合大規(guī)模篩查與研究。芯棄疾數(shù)字ELISA快速檢測

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單分子酶檢測到的比較低酶分子數(shù)假設(shè)蛋白質(zhì)檢測分析的更終靈敏度為背景信號可能由非特異性相互作用產(chǎn)生。為了評估內(nèi)在敏感性,我們通過將400,000個帶有生物素的珠子與不同濃度的酶綴合物鏈霉親和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,創(chuàng)建了具有明確酶與珠子比例的珠子群體。為了方便起見,生物素化珠子是通過將生物素化DNA與功能化的珠子雜交提供的?;パaDNA。[我們注意到,該實驗不應被視為敏感的DNA檢測;該檢測的敏感性受到非特異性相互作用的限制,如補充圖2所示,這些相互作用發(fā)生在酶綴合物和表面結(jié)合的DNA之間。 芯棄疾數(shù)字ELISA快速檢測芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品,微量樣本實現(xiàn)多重快速檢測!

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微量樣本超多重檢測芯片:亞pg級靈敏度與高通量的協(xié)同創(chuàng)新,微量樣本超多重檢測芯片突破傳統(tǒng)技術(shù)限制,單通道**多設(shè)計21個檢測區(qū),單個芯片并聯(lián)8-16個**通道,檢測速度達288-336測試/小時,性能媲美化學發(fā)光技術(shù),靈敏度達亞pg級別。其“省樣本、省耗材、省空間”優(yōu)勢***:5μl微量進樣適配稀缺樣本,21項指標共享一套耗材降低成本,桌面式掃描儀節(jié)省實驗室空間。在**普查中,該芯片可同時篩查29種肺*標記物,篩選特異性>80%的組合(如CEA、SA、CA242),提高早期診斷準確性;在炎癥因子檢測中,對IL-1β、IL-6等低豐度細胞因子的檢測線性范圍寬泛,為疾病早期***篩查提供了高效解決方案,尤其適合大規(guī)模流行病學調(diào)查與個體化醫(yī)療中的多因子分析。

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我們已經(jīng)開發(fā)了兩種臨床相關(guān)蛋白的檢測方法——前列腺特異性抗原(PSA)和腫瘤壞死因子α(TNF-α),以確定高酶標記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗的關(guān)鍵參數(shù)是:珠子濃度和兩種標記試劑(檢測試劑和酶偶聯(lián)物)的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個相互競爭的因素。首先,足夠的珠子必須在場以從熱力學和動力學中捕獲大部分目標分析物從熱力學角度看,100μL中有20萬個珠子,每個珠子大約有8萬個與之結(jié)合的抗體25相當于約0.3nM的抗體濃度,在該濃度下,抗體-蛋白平衡導致高捕獲效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未發(fā)表工作)。 POCT 芯片推動急診檢測向多指標聯(lián)檢升級,15 分鐘內(nèi)出具心肌損傷等多項結(jié)果。

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抗體篩選芯片的正交驗證能力,抗體篩選芯片支持同一反應體系下不同樣本的交叉反應測試,為抗體的正交驗證提供了高效平臺。在篩選IL-6抗體對時,可同時測試8種捕獲抗體與8種標記抗體的組合,通過陰性質(zhì)控品與陽性質(zhì)控品的比值分析,快速排除非特異性配對,篩選出親和力常數(shù)(KD)<10??M的高特異性抗體。該能力在復雜樣本(如含有異嗜性抗體的血清)檢測中尤為重要,可提前識別潛在干擾因素,提升診斷試劑盒的臨床適用性。此外,芯片的低密度陣列設(shè)計(如3×7排列)便于后續(xù)單克隆抗體的克隆化篩選,形成從初步篩選到精細優(yōu)化的完整技術(shù)鏈條,加速抗體藥物與診斷試劑的研發(fā)周期。芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量檢測,使用微量樣本就能測試;高科技數(shù)字ELISA使用靈活

數(shù)字化ELISA芯片,幫您數(shù)字化高靈敏檢測,且微量樣本多重指標檢測;芯棄疾數(shù)字ELISA快速檢測

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從TNF-α數(shù)字ELISA測定的檢測限為~150aM(2.5fg/mL),相當于全血中的~600aM(10fg/mL);市場上可用的ELISA對TNF-α的比較高靈敏度在血清中的LOD為21fM(0.34pg/mL)(補充圖3)。兩種方法的目標蛋白零濃度尖峰均為為這些實驗提供有用的陰性對照:25%的血清含有多種蛋白質(zhì)的微摩爾濃度,在這些高蛋白質(zhì)背景之上可以檢測到非常低濃度的目標蛋白。我們還開發(fā)了一個證明用于顯示低濃度核酸可以檢測到的DNA的主要數(shù)字分析方法,而無需復制目標


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