芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測
動(dòng)力學(xué)上,對(duì)于200,000個(gè)微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質(zhì)將在不到1min的時(shí)間內(nèi)擴(kuò)散80μm。表明,在2小時(shí)的孵育過程中,蛋白質(zhì)分子的捕獲不會(huì)受到限制動(dòng)力學(xué)上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個(gè)珠子加載到50,000孔陣列中,通常會(huì)導(dǎo)致20,000–30,000個(gè)微球被困在1mL孔中。對(duì)于典型的背景信號(hào)為1%活性微球(見下文),這種裝載導(dǎo)致背景信號(hào)為200-300個(gè)活性微球檢測到,對(duì)應(yīng)于泊松噪聲的可接受變異系數(shù)(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導(dǎo)致:a)非特異性結(jié)合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導(dǎo)致活性微球的比例過低,從而導(dǎo)致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數(shù)字ELISA。同時(shí),為了獲得可接受的背景信號(hào)(1%)和泊松噪聲)。 數(shù)字 ELISA 芯片采用高透光基底與表面涂層,減少非特異性吸附,提升磁珠捕獲效率。創(chuàng)新性數(shù)字ELISA使用效果
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測單個(gè)酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個(gè)酶的動(dòng)力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測單個(gè)酶的能力來檢測用酶標(biāo)記的單個(gè)蛋白質(zhì)分子。在這個(gè)單分子免疫測定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個(gè)三明治抗體復(fù)合物,結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記,如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品,蛋白質(zhì)的比值分子(以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物)與微球的比例很?。ㄍǔP∮?:1),因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布,導(dǎo)致單個(gè)微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如,如果在(3000個(gè)分子)的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì),并且在200,000個(gè)微球上進(jìn)行標(biāo)記,則珠子,然后,。無法檢測到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測技術(shù)(例如,平板閱讀器)的標(biāo)簽,因?yàn)闊晒馊玖嫌擅糠N酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個(gè)大卵試驗(yàn)體積(通常為),并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號(hào)背景。 芯棄疾單分子數(shù)字ELISA極速單分子POCT產(chǎn)品-數(shù)字化ELISA芯片,幫您數(shù)字化高靈敏檢測,且微量樣本多重指標(biāo)檢測;
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
數(shù)字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速進(jìn)行微量樣本的檢測:1)微量樣本即可檢測;微量樣本、微量試劑檢測:流道高度只有幾十微米,是原來微孔板高度的幾十分之一,可有效節(jié)省樣本量、試劑量;常規(guī)檢測比較低只需要10ul樣本即可進(jìn)行完整檢測。2)單個(gè)樣本可以同時(shí)進(jìn)行多指標(biāo)的檢測多重指標(biāo)檢測:單個(gè)樣本,同時(shí)進(jìn)行2-4個(gè)指標(biāo)檢測,可定制更多指標(biāo);芯片單孔同時(shí)檢測2個(gè)指標(biāo)芯片單孔同時(shí)檢測4個(gè)指標(biāo)3)靈活多通道檢測:可以手動(dòng)完成,主要在芯片上進(jìn)行,對(duì)儀器不依賴(只需要移液槍和現(xiàn)成的熒光顯微鏡,即可實(shí)現(xiàn)檢測),更小單元可做4-8個(gè)樣本檢測;初始的嘗試成本極低(活動(dòng)期8孔芯片只需要200元即可測試實(shí)驗(yàn));相比普通ELISA試劑盒,更少96孔板價(jià)格2-4千元,每個(gè)檢測孔20-40元;4)數(shù)字化的檢測方式和檢測結(jié)果;檢測反應(yīng)基底為陣列化、單分散排列的磁珠,可使用熒光顯微鏡進(jìn)行可視化的免疫檢測,原來的ELISA信號(hào),轉(zhuǎn)化成0或1,每個(gè)磁珠是否參與反應(yīng),反應(yīng)效率如何。
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每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測
珠子以兩種不同的方式讀出。首先,在與100μMresorufin-阝-D孵育1小時(shí)后,用熒光板讀出器以100μL方式讀出珠子結(jié)合-半乳糖苷(RGP),一種熒光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板閱讀器上,檢測限為15fMofS阝G(圖2)。其次,將珠子加載然后將RGP溶液密封到陣列的孔中,單個(gè)酶的信號(hào)被允許在反應(yīng)室中積累,并每30秒獲取一次熒光圖像。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)獲取陣列的白光圖像以識(shí)別含有珠子的孔(含有珠子的孔散射光與空井不同)。熒光圖像用于確定哪些微球具有相關(guān)的結(jié)合酶(從時(shí)間變化的熒光圖像中強(qiáng)度增加)。圖2顯示了微球中含酶的比例與總體S阝G濃度的關(guān)系的對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)圖。檢測到的比較低酶偶聯(lián)物濃度為350飛摩爾(zM),并通過外推信號(hào)等于的酶濃度計(jì)算得出的檢測限(LOD)。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,超敏檢測,理論可達(dá)飛克級(jí);
多指標(biāo)高通量數(shù)字ELISA芯片:微量樣本多重檢測的理想方案,多指標(biāo)高通量數(shù)字ELISA芯片聚焦微量樣本的多重檢測需求,單個(gè)樣本可同時(shí)測試2-8個(gè)指標(biāo),單個(gè)芯片支持8樣本并行檢測,實(shí)現(xiàn)“片內(nèi)反應(yīng)-片內(nèi)檢測”的一體化設(shè)計(jì),有效推動(dòng)設(shè)備小型化。其檢測性能兼具超敏性與極速性,IL-6靈敏度達(dá)1pg/ml,檢測范圍1-1000pg/ml,PCT靈敏度10pg/ml,線性范圍覆蓋臨床常見濃度區(qū)間。該芯片可替代高敏ELISA、Simoa等技術(shù),在疾病初篩中快速篩選特異性蛋白標(biāo)記物組合,為**分期判斷、新藥安全性評(píng)價(jià)提供準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。其開放靈活的設(shè)計(jì)支持2-10個(gè)單通道擴(kuò)展檢測區(qū)定制,適配不同檢測場景,尤其適合珍稀樣本的多因子分析,如長期化療患者、嬰幼兒的微量血樣檢測,在保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的同時(shí),比較大限度節(jié)省樣本與試劑消耗。芯棄疾JX-8B單分子普惠化ELISA檢測產(chǎn)品,微量檢測,使用微量樣本就能測試;什么是數(shù)字ELISA快速檢測
芯棄疾芯片可檢測血清中 NfL 等較低豐度神經(jīng)因子,助力阿爾茨海默癥早期篩查。創(chuàng)新性數(shù)字ELISA使用效果
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品;具有以下特點(diǎn):多重、超敏微量、極速靈活、開放;
只有少量分泌蛋白可測量的可能性突顯了蛋白質(zhì)測量領(lǐng)域面臨的挑戰(zhàn):醫(yī)學(xué)上相關(guān)的生物標(biāo)志物可能存在于非常低的豐度中。免疫測定仍然是是蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物敏感和特異性測量的基礎(chǔ)。然而,傳統(tǒng)的免疫分析技術(shù)在檢測不可測量的生物標(biāo)志物時(shí)靈敏度不足,這些生物標(biāo)志物肯定位于當(dāng)前可檢測范圍之下。主流的傳統(tǒng)免疫分析方法——包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、化學(xué)發(fā)光和電化學(xué)發(fā)光——的靈敏度下限約為10^-13M(~<0.1pM)。許多降低靈敏度的方法已被描述,包括拉曼增強(qiáng)信號(hào)檢測、電感耦合等離子體質(zhì)譜,但這些方法的數(shù)據(jù)表明其成功有限。非常規(guī)方法如亞飛摩爾級(jí)檢測具有明顯的權(quán)衡,例如程序較長或無法提供定量答案。
創(chuàng)新性數(shù)字ELISA使用效果