蛋白質(zhì)生物學(xué)不僅包含研究?jī)?nèi)容，也包含了研究所需的工具。即基于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)及功能的研究，和利用抗體、蛋白及多肽等作為純化、檢測(cè)和分析生物系統(tǒng)的工具。有些蛋白分析方法（如western blotting和ELISA等）已作為實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法使用了多年。其它方法如定量蛋白質(zhì)譜的實(shí)驗(yàn)方法則是相對(duì)較新的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，并且正在快速發(fā)展中。針對(duì)重組蛋白純化，賽默飛提供種類(lèi)豐富的標(biāo)簽選擇，包括6xHis, GST, DYKDDDDK (FLAG), c-myc, 和 HA。還提供一系列磁珠和樹(shù)脂等純化產(chǎn)品，磁珠、磁性瓊脂糖、散裝樹(shù)脂、離心柱或試劑盒，F(xiàn)PLC層析柱，96孔過(guò)濾板等，用于從大腸桿菌、酵母、昆蟲(chóng)或哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)中純化從微克(μg)到低千克(kg)級(jí)重組蛋白?？蓾M(mǎn)足大多實(shí)驗(yàn)的需求，包括高通量篩選、批量處理、中試和工藝純化等。重組蛋白疫苗有著天然的優(yōu)勢(shì)。GMP級(jí)BDNF重組蛋白定制
購(gòu)買(mǎi)的重組蛋白單位一般是 μg，重組蛋白檢測(cè)結(jié)果和用量常用單位是 U/mL 或 IU/mL。U是什么？和IU之間有什么差別？它們又是怎么與 μg 進(jìn)行換算的呢？首先，U 是蛋白活性單位，用于計(jì)量蛋白本身的生物學(xué)活性?；钚詥挝恢冈谶m條件下，單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生單位生物學(xué)效應(yīng)的蛋白量。以酶為例，1961年，國(guó)際生物化學(xué)學(xué)會(huì)酶學(xué)委員會(huì)提出采用統(tǒng)一的「國(guó)際單位」（IU）來(lái)表示酶的活力，在合適條件下，每分鐘內(nèi)催化 1 微摩爾（μmol）底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物或轉(zhuǎn)化底物中 1 微摩爾的有關(guān)基團(tuán)所需的酶量。即 1 IU＝1 U＝1 μmol/min。IU 與 μg之間的換算，要引入比活性的概念。比活性是指單位質(zhì)量蛋白的生物學(xué)活性單位，通常用 U/μg 或 μmol/min/μg 表示。以酶為例，在合適條件下，如果 1 μg 酶可以在 1 分鐘內(nèi)催化 1μmol 的底物，那么其比活性就是 1U/μg。比活性是重組蛋白的一項(xiàng)重要指標(biāo)。進(jìn)行比活性項(xiàng)目的檢測(cè)，不僅可以反映產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定情況，而且可以比較不同表達(dá)體系、不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)同一產(chǎn)品的品質(zhì)情況。比活性高說(shuō)明產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝更先進(jìn)、純度更高、質(zhì)量更優(yōu)。小鼠EGF重組蛋白定制重組蛋白是生物醫(yī)藥行業(yè)研發(fā)及生產(chǎn)中的關(guān)鍵生物試劑。
重組蛋白的細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)有各種各樣的載體和宿主菌可供選擇，大部分工程菌的增殖時(shí)間短,不僅便于快速評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而且降低了技術(shù)和設(shè)備無(wú)菌要求的嚴(yán)格性。無(wú)害大腸桿菌是腸道正常微生物群的一部分與生物體為共生關(guān)系，可以通過(guò)產(chǎn)生維生素K 2使機(jī)體受益，并防止病原菌在腸道增殖。大腸桿菌是用于重組蛋白生產(chǎn)的宿主菌,它不僅具有遺傳背景清楚、培養(yǎng)操作簡(jiǎn)單、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率高、生長(zhǎng)繁殖快、成本低廉,可以快速大規(guī)模地生產(chǎn)目的蛋白等優(yōu)點(diǎn),而且其表達(dá)外源基因產(chǎn)物的水平遠(yuǎn)高于其它基因表達(dá)系統(tǒng),表達(dá)的目的蛋白量甚至能超過(guò)細(xì)菌總蛋白量的30%，對(duì)小分子蛋白的生產(chǎn)具有極大的優(yōu)勢(shì)，因此大腸桿菌是目前應(yīng)用多的重組蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。
單克隆抗體是一類(lèi)重組蛋白，不論是科研還是醫(yī)療中，都有很大應(yīng)用。突出的表達(dá)重組單克隆抗體的宿主細(xì)胞系是CHO、NS0、SP2／0、HEK293和PER.C6。然而，大多數(shù)文獻(xiàn)都是關(guān)于CHO細(xì)胞的，該細(xì)胞仍然是現(xiàn)今工業(yè)生產(chǎn)重組蛋白藥物的主力，占到了70%（Jayapal等人,2007）。CHO細(xì)胞是于1986年一個(gè)被批準(zhǔn)的重組生物制藥的表達(dá)系統(tǒng)（組織型纖溶酶原actin物；t-PA）。從那時(shí)起，CHO細(xì)胞就是是重組蛋白表達(dá)的選擇。盡管有其他哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)可用，CHO細(xì)胞仍然是優(yōu)化重組蛋白表達(dá)研究的中心。重組蛋白的生物活性接近于天然蛋白質(zhì)，因此在生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
昆蟲(chóng)細(xì)胞是多種重組蛋白的多功能表達(dá)宿主。其較強(qiáng)的折疊能力和較高的培養(yǎng)密度使其成為表達(dá)細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜蛋白和病毒蛋白的理想選擇。2007年，由昆蟲(chóng)細(xì)胞系以病毒樣顆粒(VLPs)的形式生產(chǎn)的病毒疫苗Cervarix被批準(zhǔn)用于人類(lèi)。除了在疫苗開(kāi)發(fā)方面的潛力外，昆蟲(chóng)細(xì)胞產(chǎn)生的高活性蛋白還應(yīng)用于生物物理學(xué)和生物化學(xué)的各個(gè)學(xué)科，如結(jié)構(gòu)解釋、藥物設(shè)計(jì)、測(cè)定方法建立和診斷試劑開(kāi)發(fā)等等。許多生物廠家利用昆蟲(chóng)細(xì)胞進(jìn)行重組蛋白產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和承包研究項(xiàng)目。重組蛋白包括各類(lèi)受體、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)錄因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。小鼠PDGF重組蛋白
重組蛋白生物科研試劑總體市場(chǎng)逐年遞增。GMP級(jí)BDNF重組蛋白定制
由于重組蛋白通常在不同的表達(dá)系統(tǒng)中生產(chǎn)，容易受到各種因素的影響進(jìn)而引起蛋白質(zhì)的性質(zhì)出現(xiàn)差異，因此為了保證獲得高質(zhì)量，穩(wěn)定的結(jié)果，在藥物分析、新藥研發(fā)、細(xì)胞 therapy等應(yīng)用中優(yōu)先選擇GMP（Good Manufacturing Practice, 良好生產(chǎn)規(guī)范）級(jí)重組蛋白。GMP要求企業(yè)從原料、人員、設(shè)施設(shè)備、生產(chǎn)過(guò)程、包裝運(yùn)輸和質(zhì)量控制等方面達(dá)到法規(guī)相關(guān)要求，形成一套可操作的作業(yè)規(guī)范。GMP級(jí)重組蛋白具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：詳實(shí)的產(chǎn)品信息；嚴(yán)格的質(zhì)量管理體系；批次間穩(wěn)定性高；無(wú)外源動(dòng)物源性。GMP級(jí)BDNF重組蛋白定制
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