流式分選和磁珠分選

來源: 發(fā)布時間:2023-07-03

MSD超敏電化學(xué)發(fā)光技術(shù)優(yōu)勢:1)更高靈敏度與更寬的線性范圍MSD靈敏度可達(dá)0.05pg/ml,有效線性范圍達(dá)6log(從亞皮克級到幾萬皮克),能同時兼顧高低豐度蛋白的檢測。2)樣本兼容度高,基質(zhì)效應(yīng)小MSD平臺由于其獨特的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小(如粘稠樣本,懸濁顆粒樣本等),因此對于各類生物學(xué)樣本的兼容度高。目前測定樣本包括但不限于:血清,血漿,培養(yǎng)上清,細(xì)胞/組織裂解液,腦脊液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物學(xué)樣本。3)節(jié)省樣本用量,可實現(xiàn)多重檢測傳統(tǒng)ELISA每孔所需樣本量一般為50-100uloMSD通過點陣技術(shù),為珍稀樣本的研究提供了更多的數(shù)據(jù)。4)實驗流程簡便、快速、多元化MSD提供了更為便捷快速的實驗流程,通常只需4-5小時5)信號穩(wěn)定且不受顯色順序影響MSD由于基于電化學(xué)發(fā)光原理,信號分子需在電激發(fā)的情況下才能產(chǎn)生信號,因此整個實驗流程無需避光,每孔激發(fā)與信號采集時長統(tǒng)一,避免了像ELISA底物與終止液加入順序先后所導(dǎo)致的數(shù)據(jù)差異,不受操作人員技術(shù)水平差異的影響。本panel可檢測以下因子:Cortisol,HSA,Involucrin,Keratin-6,Keratin-1/10 種屬:Human。流式分選和磁珠分選

多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)優(yōu)勢1.由于每次體系中都只有單一抗體孵育,因此無需擔(dān)心抗體交叉反應(yīng),以及一抗二抗種屬匹配問題,減少了實驗設(shè)計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。2.TSA技術(shù)可以用于檢測用傳統(tǒng)方法無法檢出的低豐度靶標(biāo)。基于酪酰胺的信號放大技術(shù)能夠提供極強的敏感度、檢測極微量的目的抗原。極大的降低抗體的用量,節(jié)約抗體,實測確實可以提升抗體的稀釋比例。3.熒光法多重免疫組化,可同時進行五個顏色通道以上,這種情況下發(fā)射光譜會重疊,我們可以借助多光譜成像系統(tǒng)來解決這個問題。這是傳統(tǒng)間接熒光法染色和顯色法多重免疫組化所做不到的。這種方法能真實反映關(guān)鍵蛋白的表達(dá)情況和相互之間的關(guān)系,從而極大地節(jié)約珍貴的樣品。磁珠分選t細(xì)胞的作用和意義本panel可檢測以下因子:TIMP-1,TIMP-2,TIMP-3,TIMP-4 種屬:Human。

多重?zé)晒饷庖呓M化,主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號放大技術(shù)(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波處理,前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉,共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,然后去檢測結(jié)果。

本panel可檢測以下因子:BCMA/TNFRSF17,CathepsinS,CD23/FcepsilonRII,CD44,CEACAM-1/CD66a,CoagulationFactorXIV/ProteinC,ComplementC2,CX3CL1/Fractalkine,CXCL7/NAP-2,CXCL9/MIG,CXCL14/BRAK,D-dimer,Endocan/ESM-1,Endostatin,FGF-23,Fibronectin,Galectin-9,Gas6,HE4/WFDC2,HGFR/c-MET,HTRA2/Omi,IGFBP-2,IGFBP-rp1/IGFBP-7,IL-27,ITIH4,LRG1,Lumican,Lymphotoxin-alpha/TNF-beta,MICB,Midkine,NCAM-1/CD56,beta-NGF,NT-4,Osteoprotegerin/TNFRSF11B,Park7/DJ-1,PBEF/Visfatin,Pentraxin3/TSG-14,Procalcitonin,Reg3A,S100A8,SCGF/CLEC11a,SerpinA7/TBG,SerpinC1/Antithrombin-III,SerpinF1/PEDF,Syndecan-4,Tau,uPAR種屬:Human本panel可檢測以下因子:BDNF,FGF-21,Ghrelin (total),Glucagon,Leptin 種屬:Human。

產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當(dāng)增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標(biāo)本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強非特異性著色。LabEx提供MSD超敏電化學(xué)發(fā)光平臺服務(wù)!液相懸浮芯片技術(shù)

本panel可檢測以下因子:IFN-γ,IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-10,IL-12p70,IL-13,KC/GRO,TNF-α 種屬:Mouse。流式分選和磁珠分選

酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行的技術(shù)?;驹恚核捎每乖c抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。測量時,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標(biāo)儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。流式分選和磁珠分選

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