LUMINEX常見問題及解答(一)1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究,生物標(biāo)記物開發(fā),臨床檢測等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開頭的質(zhì)量。對(duì)于同樣的抗體對(duì),Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測靈敏度在pg級(jí)。3)對(duì)不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測需要10ul,每次可以檢測多個(gè)蛋白。從各種細(xì)胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測,制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達(dá)信息?檢測蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測目前可以達(dá)到50個(gè)左右,基因檢測可達(dá)500個(gè)。5)如何保證檢測結(jié)果的特異性?檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司,產(chǎn)品經(jīng)過了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。同時(shí),我們檢測公司也有近15年的經(jīng)驗(yàn)、嚴(yán)格的操作程序和質(zhì)量控制體系。LabEx流式染色服務(wù):現(xiàn)可進(jìn)行流式celesta 12色染色,細(xì)胞培養(yǎng)加染色一條龍。msd多因子檢測 上樣量
基于流式平臺(tái)CBA:CBA(CytometricBeadArray),即微量樣本多指標(biāo)流式蛋白定量技術(shù)是一個(gè)基于流式細(xì)胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時(shí)對(duì)單個(gè)樣品中的多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行檢測。CBA的原理通過利用一系列帶有熒光標(biāo)記的微小、分散的微球連接特定的捕獲抗體以捕捉溶液系統(tǒng)中的待測物,通過對(duì)應(yīng)各種不同檢測物的特異微球上所帶有熒光強(qiáng)度不同從而同時(shí)測定分析樣本中多種可溶性成分的數(shù)量。CBA的特點(diǎn):1.能夠同時(shí)對(duì)單個(gè)樣本進(jìn)行多種檢測。2.較傳統(tǒng)檢測節(jié)省樣本量9倍。3.靈敏度高、重復(fù)性好。4.所有分析只需一組標(biāo)準(zhǔn)曲線。5.避免酶聯(lián)反應(yīng)所致人工假象。6.節(jié)省操作和檢測時(shí)間。ARY004B檢測服務(wù)LabEx年多因子檢測樣本量達(dá)20w+!
Luminex液相芯片檢測實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原理:Luminex:應(yīng)用微球和流式細(xì)胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分500種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術(shù),可以同時(shí)檢測高達(dá)500個(gè)蛋白或基因。Luminex技術(shù)的測量結(jié)果在準(zhǔn)確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達(dá)到相似的水平。Luminex應(yīng)用的熒光編碼微球帶有針對(duì)不同目標(biāo)分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實(shí)驗(yàn)中可以同時(shí)完成多個(gè)目標(biāo)分子的分析。多目標(biāo)分子的同時(shí)測定可以減少生物樣品的消耗量,節(jié)省成本和測定時(shí)間,并且使多種目標(biāo)分子之間相關(guān)性的分析更加準(zhǔn)確。目前,Luminex試劑盒已經(jīng)可以檢測500多種蛋白質(zhì)分子,包括細(xì)胞因子、自身抗體、腫塊物標(biāo)志物等。
問:因子檢測技術(shù)有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實(shí)驗(yàn)適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計(jì)算96孔板可做多少樣本?答:標(biāo)曲16孔,預(yù)實(shí)驗(yàn)8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復(fù)孔可做36樣本;問:多因子實(shí)驗(yàn)的正式實(shí)驗(yàn),是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個(gè)月內(nèi)用完,否則標(biāo)準(zhǔn)曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑也要在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過期,每次送樣+標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會(huì)造成浪費(fèi)。MSD平臺(tái)由于其獨(dú)特的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號(hào)予以排除,對(duì)于各類生物學(xué)樣本的兼容度高。
Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測抗體芯片技術(shù)。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標(biāo)記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測時(shí),一束激光照射磁珠上的熒光,識(shí)別磁珠標(biāo)記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測哪種細(xì)胞因子,從而實(shí)現(xiàn)“定性”作用。進(jìn)一步,通過加入生物素標(biāo)記的高親和配對(duì)檢測抗體,同步識(shí)別磁珠抓取的目標(biāo)細(xì)胞因子,形成“三明治”結(jié)構(gòu),并加入SA-PE偶聯(lián)上生物素,通過另一束激光照射進(jìn)行信號(hào)放大檢測,實(shí)現(xiàn)“定量”作用。液態(tài)流式技術(shù)(Luminex),流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等。msd電化學(xué)發(fā)光 價(jià)格
LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技術(shù)服務(wù)!msd多因子檢測 上樣量
Q:多因子實(shí)驗(yàn)還用的樣本類型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支氣管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子實(shí)驗(yàn)中血清好檢測,還是血漿好檢測?A:文獻(xiàn)報(bào)道EDTA的血漿適合做多因子實(shí)驗(yàn),具體需研究者根據(jù)自己實(shí)際條件選擇。Q:為什么要做預(yù)實(shí)驗(yàn)?A:試劑說明書中的樣本稀釋比例不精確,需要進(jìn)一步確認(rèn)。預(yù)實(shí)驗(yàn)主要目的∶1.確定好較好稀釋比例,讓盡可能多的因子在檢測范圍內(nèi),從而提高檢出率。2.避免樣本濃度過高,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。3.讓研究者在正式實(shí)驗(yàn)中有選擇的依據(jù)。Q:血清血聚溶血,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有形響嗎?A:肯定有影響。溶血是紅細(xì)胞破裂導(dǎo)致的,輕微溶血都是可以接受,但從溶血的嚴(yán)重程度看區(qū)別較大,樣本普遍存在些許溶血情況,從目前文獻(xiàn)上看沒有明確的數(shù)據(jù)支持。msd多因子檢測 上樣量
上海樂備實(shí)生物技術(shù)有限公司位于古丹路15號(hào)18號(hào)樓4樓。樂備實(shí)生物致力于為客戶提供良好的標(biāo)志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務(wù),一切以用戶需求為中心,深受廣大客戶的歡迎。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競爭力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí),遵守行業(yè)規(guī)范,植根于醫(yī)藥健康行業(yè)的發(fā)展。樂備實(shí)生物立足于全國市場,依托強(qiáng)大的研發(fā)實(shí)力,融合前沿的技術(shù)理念,及時(shí)響應(yīng)客戶的需求。