抗體芯片實驗室服務思考留給科研,實驗外包出去!抗體芯片是蛋白芯片的一種,具有微型化、集成化、高通量化的特點,可以用于檢測某一特定的生理或病理過程相關(guān)蛋白的表達豐度,目前主要用于信號轉(zhuǎn)異、蛋白質(zhì)組學、腫塊物及其他疾病的相關(guān)研究。抗體芯片檢測的樣本類型包括提取物、細胞培養(yǎng)上清、血清血漿等,檢測的方式通過生物素標記的方法完成樣本標記,然后芯片孵育,樣本中相關(guān)蛋白與芯片上特異性抗體結(jié)合,通過熒光的方式使用芯片掃描儀檢測。實驗獲得的數(shù)據(jù)將通過標準的數(shù)據(jù)處理流程進行分析??贵w芯片檢測的優(yōu)點:靈敏度高、特異性好、重復性佳、準確性高抗體芯片的檢測內(nèi)容包括:抗體芯片主要用于蛋白表達譜、蛋白質(zhì)磷酸化及蛋白質(zhì)相互作用等檢測LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技術(shù)服務!msd電化學發(fā)光程序
PCRArray技術(shù)服務:PCRArray采用一種高通量的方法利用實時定量PCR聚焦信號轉(zhuǎn)導、生物過程或疾病研究通路中的一組基因,無論您感興趣的是生物標志物的發(fā)現(xiàn)、芯片后續(xù)研發(fā)、藥物幵發(fā)、疾病鑒定PCRarray都能實現(xiàn)您感興趣基因的表達分析,涵蓋人、小鼠、大鼠、狗、恒河猴、豬、雞、牛、馬、兔、CHO細胞、果蠅、斑馬魚等物種的200多條信號通路,覆蓋中的幾乎任何基因。生命科學現(xiàn)象和基因之間的關(guān)系都不是孤立的,例如血管生成都有幾十個或者幾百個基因參與這些調(diào)控,這些基因之間存在上下游調(diào)控關(guān)系形成一張復雜的網(wǎng)絡。我們關(guān)注某個信號通路的話就需要對整個信號通路進行比較完整的觀察才能的到準確的結(jié)論。PCRArray能夠同步對整個信號通路幾十個乃至上百的基因進行觀察,我們檢測的對象包括mRNA,miRNA以及IncRNA。RNA的研究對了解基因調(diào)控、基因敲除、人類疾病防治及生物進化探索等都具有重要意義。細胞因子 檢測方法PCR Array:用于檢測生物學功能相關(guān)的一系列基因的表達量變化,發(fā)現(xiàn)變化比較明顯的標志性基因。
問:因子檢測技術(shù)有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實驗適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計算96孔板可做多少樣本?答:標曲16孔,預實驗8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復孔可做36樣本;問:多因子實驗的正式實驗,是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個月內(nèi)用完,否則標準曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑也要在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標準曲線,會浪費試劑和孔板,同時試劑在一個月內(nèi)用完,防止試劑過期,每次送樣+標準曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會造成浪費。
LUMINEX常見問題及解答(一)1)LUMINEX應用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學研究,生物標記物開發(fā),臨床檢測等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開頭的質(zhì)量。對于同樣的抗體對,Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測靈敏度在pg級。3)對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測需要10ul,每次可以檢測多個蛋白。從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測,制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息?檢測蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測目前可以達到50個左右,基因檢測可達500個。5)如何保證檢測結(jié)果的特異性?檢測的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司,產(chǎn)品經(jīng)過了嚴格的質(zhì)量控制。同時,我們檢測公司也有近15年的經(jīng)驗、嚴格的操作程序和質(zhì)量控制體系。LabEx年多因子檢測樣本量達20w+!
LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺,用心服務,現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個專業(yè)的實驗室技術(shù)平臺,助推科研進步!多因子檢測技術(shù)包括Luminex、MSD、CBA、AntibodyArray,一份樣本可檢測幾十種不同的生物分子,可實現(xiàn)高通量、高靈敏度等特點免疫組化可通過HE、IF、Tunel、DAB、Nissl、Masson染色等,對指標進行定位分析,并且可提供病理分析平臺。流式細胞術(shù)通過不同熒光對同一細胞進行對參數(shù)分析,可提供細胞的12色染色。檢測速度快,分析樣本量大,包含的樣本種類多。LabEx流式染色服務:現(xiàn)可進行流式celesta 12色染色,細胞培養(yǎng)加染色一條龍。流式細胞儀分析細胞凋亡
LabEx提供流式多因子檢測技術(shù)(CBA)服務!msd電化學發(fā)光程序
免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結(jié)果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時間過長。5)、DAB孵育時間過短。6)、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內(nèi)參與反應。7)、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。msd電化學發(fā)光程序
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