視頻 流式細胞分析

來源: 發(fā)布時間:2022-08-07

產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細胞多的組織),需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果;5)、DAB孵育時間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強非特異性著色。LabEx提供蛋白水平檢測服務!視頻 流式細胞分析

液態(tài)流式技術(shù)(Luminex)特點:多重檢測:理論上可同時檢測100種生物靶標。節(jié)省樣品:只需低至25μl的樣品體積。高靈敏度:精確定量下限低至0.1pg/mL。應用范圍應用領域:免疫、炎癥、心血管疾病、腫塊物研究、腎、代謝、神經(jīng)、細胞間作用。分析物類型:細胞因子、炎癥因子、趨化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、腫塊物標記物、基質(zhì)金屬蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑。其他應用:信號通路、重大疾病相關、Biomarker開發(fā)、臨床應用。美天旎tyto流式細胞分選儀本panel可檢測因子:C-Peptide,Ghrelin (total),GLP-1 (total),Insulin,Leptin,PYY (total) 種屬:Mouse。

本panel可檢測以下因子:CCL7/MCP-3/MARC,CCL21/6Ckine,CXCL16,IL-15,IL-34,IL-6R alpha,Lipocalin-2/NGAL,MMP-13,MSP/MST1,Myoglobin,Nectin-4,Oncostatin M/OSM,PDGF-DD,Proprotein Convertase 9/PCSK9,RAGE/AGER,RBP4/Retinol-Binding Protein 4,Resistin,L-Selectin/CD62L,Serpin A4/Kallistatin,SHBG,SOST/Sclerostin,SPARC,Stanniocalcin 1/STC-1,Tenascin C,TFF3,Thrombospondin-2,TIM-1/KIM-1/HAVCR,TRACP/PAP/ACP5,TRANCE/TNFSF11/RANK L 種屬:Human

酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(Elispot)技術(shù)優(yōu)勢(1)單細胞水平,活細胞功能檢測:彌補了體液中CK半衰期短的不足,當體液中某CK含量較低時,用ELISPOT法檢測具有較高靈敏性。(2)操作簡便經(jīng)濟,可以進行高通量篩選:既可檢測自發(fā)分泌細胞,又可檢測抗原特異性CK分泌細胞,具有較高特異性,并可觀察藥物治療反應,且使對CSF中T、B細胞研究成為可能,對神經(jīng)免疫疾病發(fā)病機制研究及臨床療效觀察均有重要價值。(3)靈敏度高:在一百萬個陰性細胞中只要有一個分泌細胞因子的陽性細胞即可被檢測出來。靈敏度比傳統(tǒng)ELISA方法高2-3個數(shù)量級。本panel可檢測以下因子:IL-17A,IL-17C,IL-17E/IL-25,IL-17F,IL-21,IL-22,IL-23,IL-31,IL-33 種屬:Mouse。

酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術(shù)。基本原理:它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應,用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。測量時,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應結(jié)合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。MSD平臺由于其獨特的電化學發(fā)光原理,可將許多非特異信號予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小。組蛋白磷酸化抗體芯片

LabEx細胞因子檢測是一個強大的工具,通過定制識別對各種產(chǎn)生積極反應的細胞因子的獨特組合。視頻 流式細胞分析

抗體蛋白質(zhì)芯片技術(shù)(Sengenics)優(yōu)勢1、包被蛋白具有正確折疊的空間結(jié)構(gòu)/芯片表面水凝膠保護2、特異性蛋白質(zhì)陣列上正確折疊的蛋白質(zhì)可確保構(gòu)象表位,可用于自身抗體結(jié)合(90%的抗體表位是非線性的)。與顯示低信噪比的其他陣列相比,這會帶來特定的命中和低背景噪音。3、檢測限<10pg/ml蛋白質(zhì)陣列可用于以極高的靈敏度檢測自身抗體,只需要1-10μL血清。檢測限在10pg/ml范圍內(nèi),線性動態(tài)范圍至少為5個數(shù)量級。4、高重復性Sengenics蛋白質(zhì)陣列使用多個陽性和陰性對照來測量研究和批次內(nèi)和之間的重復性。下圖顯示在比較兩個不同批次中的6524個蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)點的自身抗體水平時,0.97以上的近乎完美的Pearson相關性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白質(zhì)折疊技術(shù)用于創(chuàng)建具有一致性的蛋白質(zhì)陣列。下圖顯示了Immunome蛋白質(zhì)陣列的蛋白質(zhì)內(nèi)復制變異系數(shù)(CV%)百分比。Immunome的平均CV%為7.2%。視頻 流式細胞分析

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