抗體芯片實(shí)驗(yàn)室服務(wù)思考留給科研,實(shí)驗(yàn)外包出去!抗體芯片是蛋白芯片的一種,具有微型化、集成化、高通量化的特點(diǎn),可以用于檢測(cè)某一特定的生理或病理過(guò)程相關(guān)蛋白的表達(dá)豐度,目前主要用于信號(hào)轉(zhuǎn)異、蛋白質(zhì)組學(xué)、**及其他疾病的相關(guān)研究。抗體芯片檢測(cè)的樣本類型包括提取物、細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清血漿等,檢測(cè)的方式通過(guò)生物素標(biāo)記的方法完成樣本標(biāo)記,然后芯片孵育,樣本中相關(guān)蛋白與芯片上特異性抗體結(jié)合,通過(guò)熒光的方式使用芯片掃描儀檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)獲得的數(shù)據(jù)將通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的數(shù)據(jù)處理流程進(jìn)行分析??贵w芯片檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn):靈敏度高、特異性好、重復(fù)性佳、準(zhǔn)確性高抗體芯片的檢測(cè)內(nèi)容包括:抗體芯片主要用于蛋白表達(dá)譜、蛋白質(zhì)磷酸化及蛋白質(zhì)相互作用等檢測(cè)LabEx提供 炎癥因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等高通量高靈敏檢測(cè)。全蛋白組芯片萊美藥業(yè)
LabEx多因子檢測(cè)技術(shù)--液相懸浮技術(shù)經(jīng)典炎癥十因子、高通量細(xì)胞因子初篩液相懸浮芯片:高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標(biāo)記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。進(jìn)一步加入生物素標(biāo)記的高親和配對(duì)二抗結(jié)合SA-PE進(jìn)行信號(hào)放大,以實(shí)現(xiàn)對(duì)多種微量細(xì)胞因子的有效檢測(cè)。利用梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)信號(hào)構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,實(shí)現(xiàn)大量目標(biāo)樣本中多因子的同時(shí)檢測(cè)和準(zhǔn)確定量。特點(diǎn)1、既能檢測(cè)蛋白,又能檢測(cè)核酸2、既能用于臨床,又能用于多學(xué)科科研領(lǐng)域3、真正意義的“高通量”檢測(cè),一次檢測(cè)100個(gè)指標(biāo)4、在準(zhǔn)確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達(dá)到相似的水平全血磁珠分選培養(yǎng)PCR Array:用于檢測(cè)生物學(xué)功能相關(guān)的一系列基因的表達(dá)量變化,發(fā)現(xiàn)變化比較明顯的標(biāo)志性基因。
抗體芯片技術(shù)服務(wù)包括:1.樣品蛋白質(zhì)抽提:a.實(shí)驗(yàn)對(duì)象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑,勻漿后抽提總蛋白。b.實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細(xì)胞,PBS清洗細(xì)胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。c.實(shí)驗(yàn)對(duì)象為血清,則直接進(jìn)入步驟3。2.蛋白質(zhì)定量:按蛋白質(zhì)定量試劑盒操作說(shuō)明操作,測(cè)定樣品濃度。3.細(xì)胞因子抗體芯片封閉和抗體孵育a.細(xì)胞因子抗體芯片封閉后加入50-500ug蛋白質(zhì)(若標(biāo)本為血清,通常取100ul血清)與抗體芯片4℃孵育過(guò)夜。b.加入標(biāo)記好的抗體室溫孵育1小時(shí)。4.抗體芯片檢測(cè)5.提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告:包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法和芯片實(shí)驗(yàn)結(jié)果的各種圖表和數(shù)據(jù)比較。您只需提供保存完好的標(biāo)本(血清、組織或細(xì)胞、細(xì)胞上清或其他非常規(guī)液質(zhì)生物樣本),本公司專業(yè)的技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成實(shí)驗(yàn)操作與數(shù)據(jù)分析。
免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質(zhì)量問(wèn)題以及抗體來(lái)源選擇錯(cuò)誤。不知抗體是進(jìn)口的還是國(guó)產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒(méi)能做出陽(yáng)性結(jié)果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果,抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng),必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復(fù)不全,對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來(lái)打開(kāi)抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試。有人做過(guò)實(shí)驗(yàn),這是比較好的時(shí)間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復(fù)。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。5)、DAB孵育時(shí)間過(guò)短。6)、細(xì)胞通透不全,抗體未能充分進(jìn)入胞內(nèi)參與反應(yīng)。7)、開(kāi)始做免疫組化,我建議你一定要首先做個(gè)陽(yáng)性對(duì)照片,排除抗體等外的方法問(wèn)題。LabEx提供多音字檢測(cè)服務(wù)!
多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)優(yōu)勢(shì)1.由于每次體系中都只有單一抗體孵育,因此無(wú)需擔(dān)心抗體交叉反應(yīng),以及一抗二抗種屬匹配問(wèn)題,減少了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)不同種屬抗體選擇匹配的限制。2.TSA技術(shù)可以用于檢測(cè)用傳統(tǒng)方法無(wú)法檢出的低豐度靶標(biāo)?;诶阴0返男盘?hào)放大技術(shù)能夠提供極強(qiáng)的敏感度、檢測(cè)極微量的目的抗原。極大的降低抗體的用量,節(jié)約抗體,實(shí)測(cè)確實(shí)可以提升抗體的稀釋比例。3.熒光法多重免疫組化,可同時(shí)進(jìn)行五個(gè)顏色通道以上,這種情況下發(fā)射光譜會(huì)重疊,我們可以借助多光譜成像系統(tǒng)來(lái)解決這個(gè)問(wèn)題。這是傳統(tǒng)間接熒光法染色和顯色法多重免疫組化所做不到的。這種方法能真實(shí)反映關(guān)鍵蛋白的表達(dá)情況和相互之間的關(guān)系,從而極大地節(jié)約珍貴的樣品。LabEx 藥物篩選平臺(tái):激酶抑制劑篩選,免疫檢查點(diǎn),GPCR,抗體藥研發(fā),蛋白互作??贵w芯片數(shù)據(jù)處理
生物標(biāo)志物開(kāi)發(fā)與研究。全蛋白組芯片萊美藥業(yè)
酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(Elispot)特點(diǎn):酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結(jié)合了細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA),能夠在單細(xì)胞水平檢測(cè)細(xì)胞因子的分泌情況。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在96孔培養(yǎng)板上進(jìn)行,直接以培養(yǎng)板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質(zhì),包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子。(由于涉及到細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程,對(duì)單克隆抗體的要求要遠(yuǎn)高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無(wú)毒,親和力高等特點(diǎn)。)之后,在培養(yǎng)板的孔內(nèi)加入細(xì)胞培養(yǎng)基(現(xiàn)在無(wú)血清ELISPOT技術(shù)已經(jīng)成熟,培養(yǎng)基中可以不再含有血清)、待檢測(cè)的細(xì)胞以及抗原刺激物進(jìn)行培養(yǎng)。全蛋白組芯片萊美藥業(yè)
上海樂(lè)備實(shí)生物技術(shù)有限公司位于古丹路15號(hào)18號(hào)樓4樓。公司業(yè)務(wù)分為標(biāo)志物篩查,多因子檢測(cè),Luminex檢測(cè),MSD技術(shù)服務(wù)等,目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn),為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。公司注重以質(zhì)量為中心,以服務(wù)為理念,秉持誠(chéng)信為本的理念,打造醫(yī)藥健康良好品牌。在社會(huì)各界的鼎力支持下,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造高品質(zhì)服務(wù)體驗(yàn),為客戶成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持。