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來源: 發(fā)布時間:2022-06-21

LUMINEX常見問題及解答(二)6)客戶自己提供抗體,是否可以進(jìn)行LUMINEX檢測?Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發(fā)Luminex試劑盒的經(jīng)驗。但是,需要一系列的開發(fā)工作才能保證結(jié)果的特異性、重復(fù)性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標(biāo)的檢測?可以用于基因表達(dá),基因多態(tài)性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX數(shù)據(jù)表達(dá)水平差異有無意義?表達(dá)差異主要取決于標(biāo)本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計服務(wù)。9)LUMINEX實驗和流式細(xì)胞儀的優(yōu)劣比較?Luminex技術(shù)是流式細(xì)胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測技術(shù),檢測對象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細(xì)胞儀主要用于檢測整體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達(dá)情況。Luminex檢測蛋白和標(biāo)本數(shù)目大,是一種高通量檢測技術(shù)。普通流式細(xì)胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。由此可見,兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。細(xì)胞因子的檢測常常被用作各項疾病中預(yù)測免疫反應(yīng)強(qiáng)度的生物標(biāo)志物。信號通路圖e

流式多因子檢測技術(shù)(CBA)微球免疫分析系統(tǒng)CBA(CytometricBeadArray)是一個基于流式細(xì)胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標(biāo)進(jìn)行檢測。CBA是種結(jié)合流式細(xì)胞儀熒光檢測和微球免疫分析的應(yīng)用技術(shù),可以輕松的在短時間內(nèi),同時檢測多種蛋白,其作用原理利用熒光強(qiáng)度不同的微球,上面帶有可以辨認(rèn)特定蛋白的抗體(captureantibody),與樣本(例如血清、血漿、培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液等)及PE檢測抗體(detectionantibody)作用后,以流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析,根據(jù)PE熒光強(qiáng)度的不同用FCAPArray軟件進(jìn)行分析和標(biāo)準(zhǔn)品做比對后,可進(jìn)行樣本內(nèi)特定,蛋白的定性或定量。CBA具有以下優(yōu)點:每次檢測需25-50ul樣本;靈敏度可達(dá)0.274pg/ml時間t夬速,需3-4小時,快速上樣可同時測定30種蛋白,實驗可重復(fù)性高利用FCAPArray軟件,不論樣本數(shù)目多少,可快速分析完成分析流式細(xì)胞分析儀市場微球免疫分析系統(tǒng)CBA是一個基于流式細(xì)胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法。

Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測抗體芯片技術(shù)。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標(biāo)記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測時,一束激光照射磁珠上的熒光,識別磁珠標(biāo)記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測哪種細(xì)胞因子,從而實現(xiàn)“定性”作用。進(jìn)一步,通過加入生物素標(biāo)記的高親和配對檢測抗體,同步識別磁珠抓取的目標(biāo)細(xì)胞因子,形成“三明治”結(jié)構(gòu),并加入SA-PE偶聯(lián)上生物素,通過另一束激光照射進(jìn)行信號放大檢測,實現(xiàn)“定量”作用。

基于流式平臺CBA:CBA(CytometricBeadArray),即微量樣本多指標(biāo)流式蛋白定量技術(shù)是一個基于流式細(xì)胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標(biāo)進(jìn)行檢測。CBA的原理通過利用一系列帶有熒光標(biāo)記的微小、分散的微球連接特定的捕獲抗體以捕捉溶液系統(tǒng)中的待測物,通過對應(yīng)各種不同檢測物的特異微球上所帶有熒光強(qiáng)度不同從而同時測定分析樣本中多種可溶性成分的數(shù)量。CBA的特點:1.能夠同時對單個樣本進(jìn)行多種檢測。2.較傳統(tǒng)檢測節(jié)省樣本量9倍。3.靈敏度高、重復(fù)性好。4.所有分析只需一組標(biāo)準(zhǔn)曲線。5.避免酶聯(lián)反應(yīng)所致人工假象。6.節(jié)省操作和檢測時間。LabEx提供 炎癥因子、趨化因子、生長因子等高通量高靈敏檢測。

基于MSD平臺的電化學(xué)發(fā)光超敏多因子檢測技術(shù)MSD(MesoScaleDiscovery)原理:MSD電化學(xué)發(fā)光技術(shù)主要基于超敏多因子電化學(xué)發(fā)光分析儀MESOSector600或QuickplexSQ120。通過點陣技術(shù),在96孔石墨電極板里可實現(xiàn)10個指標(biāo)每孔的檢測。也可在24孔板里定制實現(xiàn)100指標(biāo)/孔的篩選檢測。特點:1、更高靈敏度與更寬的線性范圍:靈敏度可達(dá)0.05pg/ml,有效線性范圍達(dá)6log。2、節(jié)省樣本用量,可實現(xiàn)多重檢測:上樣量≤25ul,為珍稀樣本的研究提供了更多的數(shù)據(jù)。3、均一性、重復(fù)性高:板內(nèi)CV<6-8%,板間<10%,批間<15%。同時MSD試劑盒有效期長達(dá)30個月,為長時間研究項目,提供了使用同一批號試劑的可能性。4、樣本兼容度高,基質(zhì)效應(yīng)小5、實驗流程簡便、快速、多元化6、信號穩(wěn)定且不受顯色順序影響7、開放性平臺,高載量的石墨電極,多樣化實驗方案,更節(jié)省的包被用量。LabEx 提供人、小鼠、大鼠:炎癥反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)、信號通路重要指標(biāo)多因子組合檢測。免疫磁珠分選儀

想進(jìn)行代謝因子相關(guān)研究嗎?指標(biāo)的選擇很重要,選擇Labex,給你更多的panel,總有你想做的指標(biāo)。信號通路圖e

多重?zé)晒饷庖呓M化,主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號放大技術(shù)(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波處理,前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉,共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,然后去檢測結(jié)果。信號通路圖e

上海樂備實生物技術(shù)有限公司辦公設(shè)施齊全,辦公環(huán)境優(yōu)越,為員工打造良好的辦公環(huán)境。專業(yè)的團(tuán)隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展LabEx的品牌。公司以用心服務(wù)為重點價值,希望通過我們的專業(yè)水平和不懈努力,將從事生物科技、生物制品、醫(yī)藥科技領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),檢驗技術(shù)的研發(fā),從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù),化工產(chǎn)品及原料(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)、實驗室耗材與設(shè)備的銷售。 【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動】等業(yè)務(wù)進(jìn)行到底。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造高品質(zhì)的標(biāo)志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務(wù)。