高速流式細胞分析儀

來源: 發(fā)布時間:2022-06-20

腫塊物(瘤類)發(fā)病機制中的細胞因子(內(nèi)源性及相關(guān)功能):Il-1(白介素1):腫塊物侵襲和血管生成所必需的IL-6(白介素6):化學誘導的淋巴瘤所需IL-12(白介素12):抑制化學致腫塊物作用IL-15(白介素15):促進自然殺傷T細胞白血病IFN-γ:抑制化學致腫塊物作用;抑制淋巴瘤;Stat1和Rag2抑制腫塊物M-CSF:促進乳腺腫塊物侵襲GM-CSF:抑制淋巴瘤和腫塊物TNF-α:化學誘發(fā)的皮膚腫塊物所需MIF:抑制p53腫塊物抑制功能TGF-β:抑制結(jié)腸腫塊物Fas-Fasligand:抑制淋巴瘤發(fā)生CBA,細胞因子微球檢測技術(shù),是一個基于流式細胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法。高速流式細胞分析儀

多重熒光免疫組化,主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號放大技術(shù)(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波處理,前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉,共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,然后去檢測結(jié)果。rho信號通路LabEx,多因子實驗服務專家!

流式多因子檢測技術(shù)(CBA)微球免疫分析系統(tǒng)CBA(CytometricBeadArray)是一個基于流式細胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法,它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。CBA是種結(jié)合流式細胞儀熒光檢測和微球免疫分析的應用技術(shù),可以輕松的在短時間內(nèi),同時檢測多種蛋白,其作用原理利用熒光強度不同的微球,上面帶有可以辨認特定蛋白的抗體(captureantibody),與樣本(例如血清、血漿、培養(yǎng)上清液、細胞裂解液等)及PE檢測抗體(detectionantibody)作用后,以流式細胞儀進行分析,根據(jù)PE熒光強度的不同用FCAPArray軟件進行分析和標準品做比對后,可進行樣本內(nèi)特定,蛋白的定性或定量。CBA具有以下優(yōu)點:每次檢測需25-50ul樣本;靈敏度可達0.274pg/ml時間t夬速,需3-4小時,快速上樣可同時測定30種蛋白,實驗可重復性高利用FCAPArray軟件,不論樣本數(shù)目多少,可快速分析完成分析

免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?1)、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯誤。不知抗體是進口的還是國產(chǎn)的工作液,怎么這么高稀釋度也沒能做出陽性結(jié)果?另外,不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。2)、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復。3)、組織切片本身這種抗原含量低;4)、血清封閉時間過長。5)、DAB孵育時間過短。6)、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內(nèi)參與反應。7)、開始做免疫組化,我建議你一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等外的方法問題。MSD平臺由于其獨特的電化學發(fā)光原理,可將許多非特異信號予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小。

酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)(Elispot)特點:酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。結(jié)合了細胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。實驗設計在96孔培養(yǎng)板上進行,直接以培養(yǎng)板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質(zhì),包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養(yǎng)的過程,對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,親和力高等特點。)之后,在培養(yǎng)板的孔內(nèi)加入細胞培養(yǎng)基(現(xiàn)在無血清ELISPOT技術(shù)已經(jīng)成熟,培養(yǎng)基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養(yǎng)。LabEx多因子檢測技術(shù)(包括luminex、MSD等),所需樣本量少,檢測指標豐富。流式細胞分析分選原理

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基于MSD平臺的電化學發(fā)光超敏多因子檢測技術(shù)MSD(MesoScaleDiscovery)原理:MSD電化學發(fā)光技術(shù)主要基于超敏多因子電化學發(fā)光分析儀MESOSector600或QuickplexSQ120。通過點陣技術(shù),在96孔石墨電極板里可實現(xiàn)10個指標每孔的檢測。也可在24孔板里定制實現(xiàn)100指標/孔的篩選檢測。特點:1、更高靈敏度與更寬的線性范圍:靈敏度可達0.05pg/ml,有效線性范圍達6log。2、節(jié)省樣本用量,可實現(xiàn)多重檢測:上樣量≤25ul,為珍稀樣本的研究提供了更多的數(shù)據(jù)。3、均一性、重復性高:板內(nèi)CV<6-8%,板間<10%,批間<15%。同時MSD試劑盒有效期長達30個月,為長時間研究項目,提供了使用同一批號試劑的可能性。4、樣本兼容度高,基質(zhì)效應小5、實驗流程簡便、快速、多元化6、信號穩(wěn)定且不受顯色順序影響7、開放性平臺,高載量的石墨電極,多樣化實驗方案,更節(jié)省的包被用量。高速流式細胞分析儀

上海樂備實生物技術(shù)有限公司坐落在古丹路15號18號樓4樓,是一家專業(yè)的從事生物科技、生物制品、醫(yī)藥科技領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務,檢驗技術(shù)的研發(fā),從事貨物及技術(shù)的進出口業(yè)務,化工產(chǎn)品及原料(除危險化學品、監(jiān)控化學品、易制毒化學品)、實驗室耗材與設備的銷售。 【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】公司。公司目前擁有專業(yè)的技術(shù)員工,為員工提供廣闊的發(fā)展平臺與成長空間,為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務,深受員工與客戶好評。公司業(yè)務范圍主要包括:標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營宗旨,深受客戶好評。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實的工作作風、良好的職業(yè)道德,樹立了良好的標志物篩查,多因子檢測,Luminex檢測,MSD技術(shù)服務形象,贏得了社會各界的信任和認可。